第七章PRRS病毒感染的诊断

由于PRRS病毒感染的临床症状与其它病毒性或细菌性病原感染的临床症状相似,因此PRRS病毒感染的确诊需要进行实验室诊断。目前可用的血清学检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、血清病毒中和(SVN)试验和间接荧光抗体(IFA)检测。这些试验的阳性结果只能表明猪曾经自然感染或接种过该病毒的疫苗,而不能判断猪是否仍旧感染。其它可用的检测方法实际上是确定该病毒是否存在,这些方法包括:免疫组织化学染色(Immunohistochemistry Staining,IHC)、荧光抗体染色法(Fluorescent Antibody Staining,FA)、聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和病毒分离(VirusIsolation,VI)。虽然阳性检测结果能说明样本中存在病毒,但阴性检测结果并不一定说明被检猪没有感染病毒。正确地选择并处理样本、检测方法的敏感性都有助于提供可靠的检测结果。没有任何一种血清学检测方法可以区分猪感染的是PRRS病毒野毒株或疫苗株。病毒的基因测序可以预测PRRS病毒两种毒株之间的亲缘关系以及它们与疫苗株之间密切性。基因测序不能预测某一种疫苗是否能成功预防这种疾病。限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP或"切割模式")作为PRRS病毒的一种诊断手段价值有限。由PRRS血清学阳性母猪所产的仔猪,在3～16周龄前血清学检测仍会保持阳性。转阴的确切时间因母猪阳性的水平以及所采用的血清学试验类型的不同而异。由于猪体内的PRRS病毒抗体不能终生存在,一般建议青年猪(而非种猪)应进行监测,以确定猪群的PRRS病毒感染状态。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术（如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等）的研究现状作一简单的概述。     

利用猪口腔液对猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体进行检测

猪口腔液应用于检测猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体监测在国内尚处于起步阶段。通过研究在猪场利用猪口腔液监测商品猪的PRRS抗体,并同时采集血液,比较口腔液和血液中PRRS抗体水平,进而为猪PRRS抗体监测提供新思路。对母猪和仔猪免疫PRRS弱毒疫苗,免疫后分不同时间段分别进行耳缘静脉采血和使用自制口腔液采样套装采集口腔液。然后利用2种ELISA试剂盒分别检测口腔液和血液PRRS抗体。结果表明,利用商品化ELISA试剂盒进行口腔液和血液中的PRRS抗体水平检测发现其具有相关性,尤其是免疫6周后,使用2种试剂盒检测的口腔液和血清中PRRS抗体结果符合率可达100%,故可选择测定免疫6周后口腔液抗体用于PRRS免疫效果评价。所以,猪口腔液采样是一种实用、有效的猪群PRRS抗体监测方法,可根据监测需求确定监测方案。     

猪繁殖与呼吸综合征血清学检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪和成长猪的呼吸困难为主要特征的传染病。目前,血清学检测是猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测最常用的方法,文章对血清中和试验、酶联免疫吸附试验、过氧化酶单层细胞试验、间接免疫荧光试验等猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体诊断技术的原理及其应用现状作一综述,并对各种检测方法的优缺点进行了分析。     

规模猪场母猪繁殖与呼吸综合征的临床免疫试验

应用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒疫苗、灭活疫苗、自家组织灭活疫苗对PRRS阳性场母猪,PRRS抗体阴性母猪进行临床免疫试验,比较不同PRRS弱毒疫苗、灭活疫苗与自家组织苗的临床免疫效果及安全性,应用ELISA监测PRRS抗体,结果表明PRRS弱毒疫苗免疫母猪,经临床观察全部得到保护,安全有效,未发现流产、早产等不良临床反应.     

琼脂扩散试验检测羊口疮病毒

以羊口疮痂皮毒抗原接种家兔制备高免血清,经琼扩试验检测血清价为1∶16;通过抗原与兔抗羊口疮高免血清的方阵分析,确定兔抗羊口疮高免血清诊断抗体的最佳稀释度为1∶4;该诊断抗体对5份不同地区的羊口疮疑似病料都呈现特异性反应,不与山羊痘疫苗毒、口蹄疫疫苗毒和羊正常皮肤抗原发生交叉反应。琼脂扩散试验检测羊口疮病毒是一种简便、易于判断、实用性强的诊断方法。     

猪繁殖与呼吸综合征综合防控技术的研究

为探索猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的综合防控技术,采用现场调查、血清学监测和病原学诊断等方法,对贵州省2007年3月至2009年10月采集的PRRS样本进行了血清学流行病学调查和病原学诊断,对比了不同疫苗免疫效果,测定了仔猪母源抗体的消长规律,确定了不同免疫/感染状态下仔猪首免日龄,结果表明,PRRS易于7~10月份流行;仔猪和能繁母猪的感染率较高,达到96.15%和74.73%;弱毒疫苗免疫效果优于灭活疫苗;哺乳仔猪母源抗体水平随着日龄增长逐渐降低,因此免疫PRRSV母猪所产仔猪的首免日龄定为17~20日龄;曾感染PRRSV母猪所产仔猪首免日龄定为30~34日龄。同时调查了猪场中蚊蝇携带PRRSV情况,初步证明猪场中的蚊蝇均可携带PRRSV;通过消毒试验对比进行了综合防治措施效果初探,取得理想结果。为贵州省PRRS综合防控措施的实施和推广提供了技术支撑。     

猪繁殖与呼吸综合征植物亚单位疫苗的免疫学研究

目前,防控猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)主要采用灭活疫苗和弱毒活疫苗。然而,灭活疫苗的效率十分有限,弱毒活疫苗的安全问题又令人担忧,所以研制新型疫苗非常必要。本试验尝试使用转基因植物这种经济有效且有可扩展性的体系表达和传递病毒蛋白,并制成PRRS口服亚单位疫苗。通过转基因技术利用玉米愈伤组织表达PRRSV的病毒膜蛋白M蛋白。小鼠口服转基因植物组织可诱导体内产生血清抗体和肠系膜抗原特异性抗体,且血清抗体和黏膜抗体表现出病毒中和活性。终免后血清和粪便中的中和抗体滴度可分别达到6.7和3.7。接种动物脾细胞内也可检测到PRRSV特异性IFN-γ反应。结果表明,转基因玉米是一种有效的PRRS亚单位疫苗产品,口服后可激发机体产生抗PRRS的系统免疫应答和黏膜免疫应答。     

不同类型猪蓝耳病疫苗的免疫探讨

为科学评价不同猪蓝耳病疫苗免疫效果,选取19个规模猪场,分别使用蓝耳病国产弱毒疫苗、进口弱毒疫苗、普通灭活疫苗、猪高致病性蓝耳病疫苗进行免疫,免疫1月后,采集免疫猪群的血清与全血样品,进行PRRSV病原学和免疫抗体检测,结果显示:国产弱毒疫苗、进口弱毒疫苗、普通灭活疫苗、高致病性猪蓝耳病灭活疫苗、对照组抗体阳性率分别为86.40%、76.10%、36.70%、49.30%、31.17%。使用PRRS弱毒疫苗免疫组PRRSV变异株检出率较高,使用高致病性PRRS灭活疫苗免疫组PRRSV普通株检出率较高。此结果提示PRRS疫苗免疫后能产生一定的保护性抗体水平,但交叉免疫保护性较差。对于PRRS的防控,关键在于提高猪群PRRS抗体的水平与整齐度,同时加强饲养管理。     

猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流感血清学及病原学快速诊断技术集成与应用

本试验对PRRS、CSF、SI血清学及病原学诊断方法进行了集成、筛选,并选择敏感、快速、便捷的方法进行应用。集成了7种血清学诊断方法,从中筛选出3种快速、准确、可靠的方法,集成了6种病原学诊断方法,从中筛选出1种。其中利用ELISA方法检测PRRS抗体2 303份,CSF抗体2 059份,利用HI方法检测猪流感抗体1 519份。利用RT-PCR方法检测PRRSV、CSFV、SIV分别4 354份,结果证明选择的几种方法可用于大规模的PRRS、CSF、SI流行病学调查、免疫监测及在基层单位推广应用。     

猪繁殖与呼吸综合征实验室诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是一种能引起母猪繁殖障碍、新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病。其确诊依赖于实验室方法,本文就其检测技术,如病毒分离、血清抗体检测、免疫胶体金技术、分子生物学技术的研究进展作一综述。     

重组白细胞介素-2提高PRRS抗体阳性猪的猪瘟疫苗免疫效果试验

观察了重组白细胞介素-2（IL-2）对健康成年猪和PRRS抗体阳性猪的猪瘟疫苗免疫效果的影响。结果显示,重组IL-2和猪瘟疫苗一起免疫健康猪,20d后间接血凝抗体滴度达到1∶64的猪的比例为87.5％,而不注射IL-2的对照组抗体滴度可以达到这一水平的比例只有25％。给经2次猪瘟疫苗免疫但抗体滴度在1∶32以下的PRRS抗体阳性猪单独注射IL-2,20d后,注射前检测不到抗体的猪都检测到了抗体,注射前抗体滴度在1∶8～1∶16之间的猪的抗体滴度提高到1∶32～1∶64。再次用猪瘟疫苗和IL-2共同免疫,可使抗体滴度提高4倍以上。而不注射的对照组抗体滴度则略有下降。说明重组IL-2可以减轻PRRS感染所引起的免疫抑制,提高猪瘟疫苗的免疫效果。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。现已遍及世界各主要养猪国家和地区,成为危害养猪业最严重的传染病之一。作者就猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理方面的研究情况作一综述,为诊断技术、免疫机理研究、疫苗设计和疫病防制提供借鉴。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病。在世界包括中国在内的各养猪国家广泛流行,造成严重经济损失,受到国内外学者的高度重视,对此病的研究特别是对其疫苗的研究正日益受到关注。文章就猪繁殖与呼吸综合征病毒的灭活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗的研究进展做了详细的阐述。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的严重危害世界养猪业的一种传染病,该病可造成猪的繁殖障碍、呼吸系统病症与生长受阻。本文着眼于PRRSV疫苗的免疫原性、保护效力和安全性,涉及市场上现有的商品化疫苗与已报道的处于试验阶段的相关疫苗研究成果,以期为PRRSV的防控与疫苗研发提供有益的参考。     

A modified immunoperoxidase assay for detection of antibody porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus in swine sera

MARC-145 cell monolayers infected with PRRS virus were fixed in 3% neutral buffered formalin and embedded in paraffin. The sections were stained by avidin-biotin complex immunoperoxidase (ABC) method. Test sera were applied to sections as primary antibodies. The positive reactions were detected by ABC method and indirect immunofluorescent assay (IFA). There was good correlation between ABC and IFA, and the titers in ABC were higher than those in IFA. The present results indicate that the immunohistochemical staining is a useful test for the detection and quantitation of PRRS virus antibody in swine sera as well as IFA.     

猪繁殖与呼吸综合征免疫防制新途径的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种主要表现为母猪繁殖障碍与仔猪呼吸道症状的传染病。近年来,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异株不断出现,免疫逃避及持续性感染使得猪群发病率或复发率均相继增高,给养猪业带来了巨大的损失。目前所采用的胃肠道途径接种活疫苗或灭活疫苗的方法无法诱导对猪群的全面保护作用。为减少养猪业的经济损失,亟需研制新防制方法和新疫苗接种途径。作者主要从黏膜免疫的免疫部位、呼吸道保护性黏膜免疫反应诱导、黏膜免疫途径、佐剂的选择及病毒的免疫抑制反应等方面简要论述了有效防制PRRSV的黏膜免疫方法的研究进展,为进一步了解黏膜免疫抵御PRRSV突变株感染及黏膜疫苗研制等方面提供有用的信息。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍及新生仔猪呼吸道症状和高死亡率的传染病,其病原猪繁殖与呼吸综合征病毒是RNA病毒,各国相继发生流行性感染,给养猪业造成严重的经济损失。本文旨对猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及疫苗研究进展予以综述,为进一步研究提供材料。     

三个厂家猪瘟活疫苗免疫效果比较试验

在同一条件下对3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗进行了免疫效果评价试验,并与猪瘟传代细胞苗免疫效果进行比较。结果发现3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗存在一定差异,2个厂家的免疫效果较好,1个厂家的免疫效果较差。猪瘟传代细胞苗免疫效果优于猪瘟细胞源活疫苗,猪瘟传代细胞苗免疫1次,抗体合格率高,持续时间长,猪瘟细胞源活疫苗要免疫两次才能获得比较好的效果。同时,我们发现高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）对猪瘟抗体产生有一定影响。