禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗安全性检验及免疫保护性试验研究

该试验采用6日龄鸡胚、2日龄商品肉雏鸡和7日龄SPF雏鸡，分别进行了禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的鸡胚卵黄囊接种及雏鸡脑内和皮下接种试验，通过病理检验检测了疫苗的安全性，同时利用琼扩试验进行了疫苗的免疫效应性检测，利用攻毒试验进行了免疫保护性试验。结果表明，禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗具有可靠的安全性和良好的免疫保护性，其琼扩效价可达1：32。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的田间免疫试验

以禽脑脊髓炎ＶＲ株病毒接种ＳＰＦ鸡胚，取发病胚病粒经福尔马林灭活制成油乳剂灭活苗，用实验室制品４批，分别在济宁，章丘，茌平，禹城四个种鸡场共３７３００只种鸡进行田间免疫试验。结果表明，疫苗对鸡群不良反应，鸡群于免疫后３周ＡＧＰ检出率１００％，鸡群开产后产蛋性能良好，产蛋量与蛋壳质量正常，免疫鸡的后代均被有效保护不发ＡＥ。     

禽脑脊髓炎油佐剂灭活疫苗免疫效果观察

将感染了ＡＥＶ－ＶａｎＲｏｃｋｅｌ株的ＳＰＦ全胚磨制的乳剂离心分离,取上清液制成抗原含量不同的两种灭活疫苗。将两种疫苗各接种３月龄的ＳＰＦ鸡,未见接种鸡出现症状。４周后以强毒ＡＥＶ攻击,所有疫苗接种鸡皆被保护,组织学检查进一步证明了疫苗的效力。抗原含量较高的疫苗引起的保护力更好,作者认为攻击时经过脑内接种更适合于临床评价疫苗效力。     

禽脑脊髓炎灭能油乳剂疫苗免疫试验

前言禽脑脊髓炎(AE)遍及世界所有饲养商品鸡的地区。采用疫苗接种以控制本病是一种有效的办法。早在50年代,A.J.Macleod(1959)和Kermit Schaaf(1964)等分别利用人工感染的发病鸡脑和鸡胚研制灭能疫苗对鸡进行免疫试验。试验证实,加入适量氢氧化铝的疫苗免疫效果较好,一周龄的鸡免疫接种后,无任何临床反应。母鸡免疫接种后产的蛋孵育的蛋胚对强毒攻击有一定的保护能力。母鸡免疫接种后112天,其     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗的研究

选用ＡＥＶ－ＮＨ９３７株Ｅ８－１２为制苗种毒,接种易感鸡胚制备抗原,经甲醛溶液灭活制成的禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗,物理性状检验、无菌检验、安全检验、效力检验合格,疫苗ＰＤ５０≥３２,疫苗免疫期成鸡至少一年,雏鸡至少半年,疫苗稳定性好,４℃－８℃保存期为１２个月,１０℃－２４℃保存期为６个月。田间试验、中间试制和区域试验安全、有效,反应良好,该疫苗能够预防禽脑脊髓炎的发生。     

禽脑脊髓炎灭活油乳剂疫苗的研制

将ＡＥＶ－ＶＲ株接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚卵黄囊，孵化至１６日龄时迫，要集鸡胚毛尿囊膜，尿囊液，胚体称重，研磨，离心取上清液加入福尔马林灭活，以灭菌ＰＢＳ稀释成１：１、１：１０、１：２０三种浓度，加入吐温－８０制成水相，另以白油，司斑－８０和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相，搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄ＳＰＦ雏鸡，安全可靠。用ＡＥＶ－ＶＲ、ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７三株混合毒     

鸡新城疫油乳剂灭活疫苗的免疫效力试验

对本室研制的鸡新城疫油乳剂灭活疫苗（ＮＤ－ＯＥＶ）的免疫效果进行了实验室与田间试验评价，并与美国同类疫苗进行了对比。结果表明，自制ＮＤ－ＯＥＶ与Ｌａ Ｓｏｔａ系弱毒疫苗同时接种雏鸡后，可生产高水平的抗体，且抗体维持时间长，能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击；在抗体水平与持续时间和抵御强毒方面均优于美国进口的ＮＤ－ＯＥＶ；接种雏鸡后，可使原有抗体水平相差悬殊的鸡群产生高效价、较为整齐的抗体；免疫成年鸡后６     

鸡新城疫油乳剂灭活疫苗的免疫效力试验

对本室研制的鸡新城疫油乳剂灭活疫苗（ＮＤ－ＯＥＶ）的免疫效果进行了实验室与田间试验评价，并与美国同类疫苗进行了对比。结果表明，自制ＮＤ－ＯＥＶ与ＬａＳｏｔａ系弱毒疫苗同时接种雏鸡后，可生产高水平的抗体，且抗体维持时间长，能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击；在抗体水平与持续时间和抵御强毒方面均优于美国进口的ＮＤ－ＯＥＶ；接种雏鸡后，可使原有抗体水平相差悬殊的鸡群产生高效价、较为整齐的抗体；免疫成年鸡后６个月，ＨＩ抗体仍在６ｌｏｇ２以上。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗的现场应用试验

以分离到的禽离脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）野毒接种ＳＰＦ鸡胚，取其病料用福尔马林灭活并制成油乳剂苗。免疫种鸡的试验结果表明，这种灭活苗应激反应小，对产蛋时的鸡基本无影响，免疫后的鸡产生的抗体较快，用间接免疫荧光反应检测（ＩＦＡ），第５天即可检出特异的抗体，琼扩抗体可在２０～３０天查出。田间试验的初步结果表明，这种灭活苗的免疫效果稳定，３０天和４５天后的琼扩抗体检出率分别为４／４和６０／６０，免疫鸡的后代均被有效保护不发生ＡＥ。     

鸭传染性浆膜炎油佐剂灭活疫苗的研究

以血清Ⅰ型鸭疫里默氏菌(RA)分离株为菌种研制RA油佐剂灭活疫苗,对3日龄樱桃谷鸭颈背皮下注射0.25mL/只即可产生良好的免疫应答,免疫后10、13和16天对同源RA的攻击表现出35%、85%和100%免疫保护。疫苗一次免疫后30天ELISA抗体滴度达到高峰,至93日龄时仍能检出抗体。10日龄进行第二次免疫可产生更高的抗体滴度,到65天时仍能保持较高抗体水平。ELISA抗体滴度≥500时雏鸭即获得免疫保护。疫苗免疫雏鸭后能够显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地增强T细胞的免疫力,时间持续两周。RA油佐剂灭活疫苗免疫雏鸭后免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果,其中体液免疫占主导作用。     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗免疫持续期的研究

应用3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了免疫持续期的试验。结果表明，鸡群免疫1次后，对A型强致病力菌株的攻毒保护率为83%，对C型强致病力菌株的攻毒保护率为51.5%，在首免后4周左右进行二免，则免疫鸡群对A型菌的保护率在免疫后13个月仍然保持100%，对C型菌的保护率在免疫后9个月内可达到90.5%。免疫鸡血清抗体也均保持较高的水平，其中B-ELISA的A型抗体的检出率为83%-100%、C型的检出率为33%-87%，血凝抑制试验（HI）的A型抗体阳性检出率为87%-100%，C型抗体的检出率为62.8%-93%，血清平板凝集抗体的检出率为62.8%-100%，此结果充分显示了鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的良好的免疫效力以及B-ELISA、HI及血清平板凝集试验较高的敏感性的特异性，研究还证实了HI抗体与攻毒保抗力的密切相关。     

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡保护力的试验

用三批AE（Avian Encephalomyebius)油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡，免疫后定期采集种蛋进行孵化，当孵至6日龄时取部分鸡胚，卵黄囊途径接种AEVVR株，进行AE鸡胚易感性试验，剩余鸡胚孵化至出雏后，分别于1，7，14，21日龄肌肉途径攻击AEV VR株，攻毒后观察不同日龄仔代雏鸡AE的保护能力。结果疫苗免疫后2-3个月的种鸡所产种蛋的AE鸡胚易感性试验的保护率达100%，而同期所产种蛋孵出的子代雏鸡，在出雏后3周内对AEVVR株攻毒的保护率亦达100%，免疫后6-7个月种鸡所产种蛋的AEVVR鸡胚易感性试验的保护率达75%-80%，而同期所产种蛋孵 出的子代雏鸡，在出雏后3周内对AEVVR株攻毒的保护率达70%-90%，试验结果表明，AE鸡胚易感性试验的鸡胚保护率与同期雏鸡对AEV VR肌肉途径攻毒的保护率基本相同。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究——Ⅱ油乳剂型(OE)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白，作为抗原，制备油乳剂型（Oil Emulsion OE)亚单位疫苗。该亚单位疫苗为油包水（W/O）型，稳定性良好，安全可靠。对3周龄雏鸡用该疫苗肌注接种，6周龄攻毒，结果表明，接种800ugOMP/只油乳剂型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究——Ⅱ油乳剂型(OE)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白，作为抗原，制备油乳剂型（Ｏｉｌ　Ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ＯＥ） 亚单位疫苗。该亚单位疫苗为油包水（Ｗ／Ｏ）型，稳定性良好，安全可靠。对３周龄雏鸡用该疫苗肌注接种，６周龄攻毒，结果表明，接种 ８００ｕｇ ＯＭＰ／只油乳剂型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

鸡传染性鼻炎二介油乳剂灭活疫苗的保存期检验

应用3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了保存期检验，结果表明，二价苗在4－8℃保存12个月和18个月后免疫鸡群，鸡群对A、C型强致病力菌株的保护率在二免后4周左右分别为100％和88．5％，血清SPA、阻断ELISA和HI抗体阳性检出率较高，但疫苗保存18个月后所免疫鸡的血清C型HI抗体效价的几何平均数有显著的下降。因此，该二价苗的保存期以12个月为宜。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。     

大肠杆菌菌毛油乳剂苗的实验研究

利用加热法对一株用牛心琼脂培养的当地产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）进行了宿主特异性菌毛的提取，并用该菌毛制成的油乳剂苗进行了家兔免疫试验。用甘露糖抵抗血凝反应（MRHA）及血凝抑制试验（HI）检测了菌毛的表达效果及抗体含量。结果显示，菌毛的血凝价为1：512，抗体滴度为1：64。     

鸡病毒性关节炎油乳灭活苗免疫种鸡对其后代雏鸡免疫保护测定

试验用从内蒙古及天津分离到的鸡病毒性关节炎B、C、G、T毒株制成的油乳剂灭活苗以及商品苗分别免疫种鸡后,对其后代雏鸡进行免疫效力测定.结果表明其后代雏鸡在孵化后1,5,20日龄时血清抗体均为阳性,而空白对照均为阴性;攻毒试验显示,试验苗组(20.0%,46.6%)和商品苗组(33.3%,46.6%)发病率相近,并且大大低于空白对照组(86.6%).经检验可知,试验苗和商品苗组差异不显著(P＞0.05),而2个疫苗组与空白对照组相比,差异显著(P＜0.05).