鸡CD4和CD8分子研究进展

鸡CD4和CD8分子是T细胞表面重要的表面标志,绝大部分胸腺细胞表面都表达CD4和CD8分子,但大多数脾脏和外周血的T细胞表面只表达CD4或CD8分子,或两者都不表达。少数脾脏和外周血中存在的CD4 CD8 T 细胞具有重要的生物学功能。不同品种鸡的CD4 基因具有高度的保守性,而CD8αcDNA 在胞外区表现为多型性。鸡的CD4和CD8分子在组织分布、结构和功能等方面有着很大的相似性。针对鸡CD4 和CD8分子的单克隆抗体为研究这些免疫细胞的生理功能及细胞表面标志的生物学作用等创造了有利条件。     

鸡主要组织相容性复合体的结构与功能研究进展

鸡主要组织相容性复合体(MHC)分子是免疫应答过程中抗原递呈的分子基础,利用其多肽结合特性可鉴定病原的T细胞表位,阐述不同单倍型鸡的抗病机制。论文总结了鸡MHCⅠ类分子的结构特征,分析了与哺乳动物MHC分子在结构上的差异,并对鸡MHCⅠ、MHCⅡ、MHCⅣ类分子在免疫应答过程中功能的研究进展做了综述。     

传染性支气管炎病毒结构蛋白免疫鸡对CD4+CD8+T淋巴细胞亚群的影响

为了比较传染性支气管炎病毒3种主要结构蛋白免疫鸡后对CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的不同影响.本试验以pVAX1载体为携带工具,制备分别含有IBV主要结构蛋白基因的质粒免疫健康雏鸡,采用流式细胞仪(FACS)对免疫鸡外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数进行检测.结果显示:各试验组间,携带N蛋白基因的质粒在免疫后3周内CD4+T淋巴细胞数和CD8+T淋巴细胞数均高于其他组,且差异极显著(P＜0.01).由此可见,IBV的N蛋白可明显诱导CD8+T淋巴细胞的CTL免疫作用和CD4+T淋巴细胞的辅助性免疫作用,其细胞免疫原性高于S1蛋白和M蛋白.     

镉致鸡CD4^＋与CD8^＋T淋巴细胞动态变化

镉是一种蓄积性强而且广泛存在的有毒金属，对人和动物具有多器官、组织和细胞毒性。大量研究表明，镉具有致癌、致畸、致突变作用，可引起多器官中毒。镉作为主要环境污染物之一，对机体淋巴细胞损伤及对免疫功能有一定的影响。近年来，慢性低水平接触镉引起宿主体内淋巴细胞损伤及免疫功能的改变，从而导致机体许多相关疾病的发生及其免疫毒性作用已引起免疫毒理学家越来越多的关注，并成为免疫毒理学领域研究的热点之一。     

镉致鸡CD4+T与CD8+T淋巴细胞动态变化

镉是一种蓄积性强而且广泛存在的有毒金属,对人和动物具有多器官、组织和细胞毒性。大量研究表明,镉具有致癌、致畸、致突变作用,可引起多器官中毒。镉作为主要环境污染物之一,对机体淋巴细胞损伤及对免疫功能有一定的影响。近年来,慢性低水平接触镉引起宿主体内淋巴细胞损伤及     

鸡卵泡选择及分子调控作用机制研究进展

鸡卵泡选择能否有序进行是直接影响等级卵泡数量以及产蛋持续性的重要因素。本文主要综述了家禽卵泡选择发育过程及其影响因素,并提炼阐述卵泡选择过程中颗粒细胞的作用,以及各信号通路之间的串扰调控功能,丰富禽类繁殖调控基础理论,为鸡的繁殖调控研究提供参考价值。     

CD4和CD8分子在细胞免疫中的作用及其与PRRSV感染的关系

CD4和CD8是T细胞的两个重要的细胞表面标志，它们在T细胞免疫应答中发挥重要的作用本文将T细胞的免疫学基础及CD4和CD8与PRRSV感染的关系进行综述。     

家禽CD3分子研究进展

CD3是由γ、δ、ε、ζ和η5种不同成分的跨膜蛋白组成的复合蛋白,是T淋巴细胞重要的表面标志.它在未成熟胸腺细胞中能被检测到,因而被作为T细胞系发挥作用的最早信号.在许多免疫相关性疾病的研究中都以它作为检测的重要指标.通过对家禽CD3分子的发育、分布、基因结构及功能的叙述,为有关CD3分子在生物学和医学方面更深入的研究...     

猪CD4分子的全长cDNA克隆与序列分析

CD4分子为动物辅助性T细胞（TH）和部分胸腺细胞的共受体与信号传导分子，参与TCR介导的TH细胞活化和胸腺细胞分化过程。本研究应用RT-PCR和RACE技术从猪胸腺细胞总RNA中扩增克隆了猪CD4全长cDNA序列，并进行了序列特性分析。序列分析结果表明，在猪胸腺细胞和外周血淋巴细胞中存在2种方式剪接的CD4 mRNA转录本，其中一种mRNA转录本缺失编码40个氨基酸残基的120nt序列，提示该转录本可能编码猪分泌型CD4分子；猪CD4全长cDNA序列为2715nt。其中5′非编码区159nt，3′非编码区1183nt，1374nt的开放阅读框编码457个氨基酸的猪CD4前体蛋白（含4个糖基化住点）；猪CD4分子的7个Cys残基（Cys^43、Cys^122、Cys^327、Cys^418、Cys^421、Cys^444和Cys^446）和2个Ser残基（Ser^432和Ser^439）在动物种间保守；在猪CD4分子胞浆区．存在高度保守的Src家族蛋白酪氨酸激酶p56^kk。识别位点KKTCQC和内化相关双亮氨酸基序。推导氨基酸序列分析结果显示，猪与人、免、猫、狗和鼠CD4蛋白的氨基酸同源性分别为56．0％，54．5％。56．9％，56．5％和44．9％。     

CD4分子结构和功能研究新进展

CD4分子属于免疫球蛋白超家族,其胞外区由4个免疫球蛋白样的结构域组成,在胸腺细胞发育的过程中,CD4分子的表达受多种因素的影响。由于该分子在T淋巴细胞发育、信号转导、细胞间通讯、细胞免疫应答和体液免疫应答的过程中发挥着重要作用,而被深入研究,对其功能有了初步的了解。成熟人类Th细胞表面表达的CD4(T4)受体,具有调控并识别抗原的能力,最新研究发现,CD4分子在精子介导转基因过程的外源DNA内化机制中还扮演着不可或缺的角色。     

中国部分地方品种鸡CD4和CD8α基因cDNA的克隆与序列分析

用Trizol分别提取4～6周龄白莱航鸡、狼山鸡、大骨鸡、北京油鸡、仙居鸡、茶花鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺细胞的总RNA，再用Oligo-dT纤维索富集mRNA后，用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和cD8α基因cDNA。将PCR产物克隆进T载体后测序。序列分析显示不同品种鸡的CD4 cDNA序列完全一致；中国地方品种鸡与国外品种的白莱航鸡、RPL7系鸡在CD8α胞外区有6～13个氨基酸的差异，仙居鸡与其他5个中国地方品种鸡在CD8α胞外区有4～5个氨基酸的差异，狼山鸡、北京油鸡和隐性白羽鸡CD8α cDNA的核苷酸序列及推导的氨基酸序列完全一致。这些结果表明，中国地方品种鸡CD4基因序列高度保守；中国地方品种鸡与国外品种鸡的CD8α cDNA序列之间具有遗传多态性，而中国地方品种鸡之间CDSα cDNA序列遗传多态性低，为进一步研究CD4分子和CD8α链的结构和功能提供了条件。     

荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平

白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,并采用该方法对26-50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10^-4-10^-9和10^-3-10^-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%-2.15%和1.17%-3.68%,组间变异系数分别在1.16%-3.25%和1.66%-2.86%。26-50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法。     

鸡CD4基因片段原核表达及其单抗制备

将PCR扩增的鸡CD4基因片段克隆到pET-32a原核表达载体,构建获得原核表达重组载体pET-32a-CD4.重组载体导入大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和树脂纯化获得融合蛋白His-CD4.以此融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤细胞技术制备了1株能够稳定传代并分泌抗CD4多肽单抗的杂交瘤细胞株,命名为3E12.经检测该抗体亚类为IgG2b,单抗腹水的间接ELISA效价为1:105,Western blot结果显示单抗与CD4多肽能特异性地结合.     

鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞,应用RT-PCR对这些免疫器官中鸡CD4分子mRNA的表达进行了研究。同时,用RT-PCR对鸡脾淋巴细胞CD4分子cDNA进行了克隆和序列测定。结果表明,在上述器官中,法氏囊淋巴细胞不表达鸡CD4分子mRNA,其他器官中均有表达。通过序列分析表明,本试验扩增得到的基因为编码鸡CD4分子的基因。     

The Localization Changes of CD4+ and CD8+ T Lymphocytes in Chicken Lung at Different Ages

The aim of this study was to investigate the immune state of chicken lung in different periods.With lung tissue of Hy-line White chicken at different ages,the distribution and quantity changes of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in lung were studied using immunohistochemistry staining.The results showed that CD8⁺T lymphocytes appeared firstly in embryonic at 18 d,while CD4⁺T lymphocytes appeared at 1-day-old chicken.At 4-day-old,there were aggregates of lymphocytes at the junction of the primary and secondary bronchi,which formed obvious broncho-associated lymphoid tissue (BALT).CD4⁺T lymphocytes of each age mainly occupied the central area of BALT,while CD8⁺T lymphocytes mainly surrounded the periphery.Since 56 days old,CD8⁺T lymphocytes are distributed in the inner wall of third-order bronchial airway,atrial septum,gas exchange area and interlobular connective tissue,and are distributed throughout the lung.In terms of quantity change,with the growth of daily age,the number of CD4⁺T lymphocytes and CD8⁺T lymphocytes gradually increased,and the number of CD4⁺ T lymphocytes was more than that of CD8⁺ T lymphocytes before 35 days of age,while the number of CD8⁺ T lymphocytes was significantly more than that of CD4⁺ T lymphocytes at the same age thereafter.The results showed that the distribution and number of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in the lungs of chickens were correlated with the age,and the changes could reflect that the lungs before the age of 35 days were dominated by humoral immunity,while the lungs after that tended to be cellular immunity.     

胸腺外CD4和CD8双阳性T细胞的研究概述

胸腺依赖性细胞即 T细胞具有多种重要的免疫功能 ,不同的免疫功能与其细胞膜上的分化抗原 (CD)的种类相关联。其中 CD4和 CD8是关键的分化抗原。 CD4分子是单链糖蛋白 ,是自身主要组织相容性复合体 (MHC) 类抗原的受体。研究表明 ,其功能性分子可能是低聚体 [1 ] 。CD8分子也是糖蛋白 ,包含α链和β链 ,是 MHC 类抗原的受体。 CD4和 CD8与相应 MHC抗原结合是 T细胞在胸腺外发挥免疫功能的生化基础 ,也与 T细胞在胸腺微环境中的分化有关。来自骨髓的前 T细胞表面无任何 CD标志 ,在胸腺微环境中先后表达CD2、CD7、CD3抗原和 T…     

高温下清凉冲剂对鸡免疫器官中CD4+、CD8+ T细胞数量的影响

采用免疫组化方法检测鸡免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量，探讨高温下清凉冲剂对机体细胞免疫机能的影响及其药理作用。108只农大3号35目龄公雏，随机分为3组，每纽36只鸡，即常温对照组、高温对照组和高温用药组。用药组饲喂中药煎荆（浓度为1g／ml），用药量与饲料量比为1：1000。在试验的第1、4、8、10天各组捕杀5只。分别采取胸腺、脾脏、法氏囊检测。结果高温下。用药组免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量均高于高温对照组。第8、10天差异极显著（P〈0．01）。表明高温下清凉冲剂可以增加鸡免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量，有效地提高鸡细胞免疫水平。