去壁低渗法制备长寿沙田柚染色体标本的研究

为了给长寿沙田柚的染色体核型分析、细胞遗传学研究和良种培育提供参考依据,以其幼叶为研究材料,设计4种前低渗时间和12种酶解方式处理,对制片效果的影响进行了研究。结果表明:预处理后的材料经前低渗60min后,用0.2%纤维素酶∶0.2%果胶酶(3∶1,v/v)混合酶液37℃酶解80min,可得到理想的制片效果,背景干净,染色体分散、清晰。     

根尖压片法制备树莓染色体标本的研究

以红泡刺藤(R.niveus)、栽秧泡(R.ellipticusvar.obcordatus)和插田泡(R.coreanus)绿枝或硬枝扦插生根的根尖为材料,通过取材时季与扦插环境气温,8-羟基喹啉、秋水仙素和对二氯苯3种药剂在不同的温度下预处理不同时间,混合酶液和盐酸在不同温度下解离,醋酸洋红、卡宝品红、席夫试剂和铁矾-苏木精各染色剂染色压片等的对比研究,并以细胞中有丝分裂中期分裂相的数目、染色体的清晰性、分散程度和聚缩程度以及染色体的形态为衡量指标,探索出适于树莓属植物核型分析的根尖压片方法是:当根尖长至1~2 cm、扦插环境气温17~23℃时取材,卡诺氏固定液I低温固定24 h,用0.002 mol/L 8-羟基喹啉在0~4℃下预处理24 h,再用1 mol/L HCl(60±1)℃恒温解离4~7 min,最后用卡宝品红染色压片能获得效果好树莓染色体标本,该染色体标本完全适用于核型分析。     

大麻染色体制片技术的比较研究

以大麻种子根尖和雄花花蕾为材料,采用常规压片法和去壁低渗法对大麻染色体进行观察.结果表明,去壁低渗法较常规压片法更易获得分散细胞,且染色体制片背景清晰;对大麻根尖有丝分裂不同时期进行观察,在种子发芽46h时取材,染色体中期分裂相最多;染色体2n=20,38,40,80等不同倍性的大麻染色体细胞均有存在.     

10种散生竹染色体数目初报

散生竹染色体数较为稳定,大都为48。     

天麻染色体有丝分裂期标本的制备方法

通过对天麻染色体标本执制备中染色体阻断剂、细胞壁解离剂、染色剂的筛选,以天麻柱头为材料,结合低渗法制备的染色体有丝分裂标本,可以制备出较好的有丝分裂期标本,观察到天麻染色体有丝分裂不同时期染色体结构变化,较好的呈现出天麻染色体及结构特征变化。     

人体外周血染色体标本制备

本用采自正常人体的静脉血,通过外周血淋巴细胞短期培养,较成功的制备了外周血染色体标本,并对其方法的改进进行了探讨。     

再谈植物染色体标本制备的去壁、低渗法

植物与动物细胞最主要的区别是植物细胞有一个坚实的细胞壁而动物则没有。这就给植物染色体的研究带来了很大的不便。近几年来，随着植物杂色体研究的广泛开展，很多学者都试图将人类染色体的制备技术移植到植物上来。GNI等在压片前使用纤维素酶和果胶酶对植物细胞壁进行解离[2]；Kurata和Omura在水稻染色体研究中应用酶解去壁、Ka液低渗[3]，陈瑞阳等用去壁、低渗、火焰干燥方法对37科105种植物染色体进行实验[1]，均取得了一定的效果。我们在对于黑麦、燕麦及其杂种材料等植物的染色体分带研究中，对上述方法均进行了实验，认为用去壁…     

欧洲黑莓的染色体观察

以组培苗根尖和茎尖为材料,明确了适合欧洲黑莓优良品种‘冬福瑞’(Rubus fruiticosusvar.‘Thorn-free’)染色体观察的去壁低渗法主要条件参数,即:根尖在0.02%秋水仙素和2 mmol/L的8-羟基喹啉混合液(1∶1)中预处理2 h,用2.5%的纤维素酶和果胶酶混合液(1∶1)酶解去壁2 h,后低渗30 min,以确定冬福瑞染色体数。确定了欧洲黑莓‘冬福瑞’为四倍体,染色体数目为28。     

鼷鼠精巢染色体标本制作法

鼷鼠精巢染色体标本制作法刘玉文王常仕刘治国（沈阳农业大学，沈阳１１０１６１）（沈阳师范学院，沈阳１１００３１）哺乳类染色体观察通常先把组织切碎，过滤，作成细胞悬浮液。可是，若将精巢切碎，生殖细胞易受伤，在细胞固定时坏死，不能得到明显的分裂相。本法为不...     

制备黄豆花生染色体标本前处理的初步研究

在染色体标本制备中,对黄豆离体根尖用0.002M8-羟基喹啉、0.05％秋水仙碱及前二者的等量混合液分别在18℃恒温下前处理三小时,冷蒸馏水(4℃～5℃)中前处理22小时,以8-羟基喹啉在18℃处理出现的中期分裂相最多。用0.002M8-羟基喹啉在18℃～20℃恒温下,对黄豆和花生根尖进行不同间隔时间前处理,结果观察到黄豆根尖的晚前期和中期分裂相以3～3.5小时最多;花生根尖的中期分裂相以2～4小时最多。     

植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展

染色体是遗传物质的载体,植物染色体制片和核型分析技术是细胞遗传学中最基本、最常用的方法,在物种亲缘关系鉴定、染色体变异、杂种分析等方面得到广泛应用.文章从取材、材料预处理、材料固定、材料解离、染色体制片、染色与观察等方面综述了近年来植物染色体制片的改进方法,从传统手工分析、Photoshop软件分析、自动核型分析、流式细胞术等介绍了核型分析技术.并从提高制片技术,以获得更清晰可辨的中期染色体图像;在染色体制片中规范统一标准的仪器设备并建立一套统一的标准,便于比较不同研究者的结果,有利于植物分类和遗传的研究;提高数据统计和分析的方法,以降低实验成本等方面展望了今后植物核型分析的发展方向.     

豌豆染色体制片技术的比较研究

采用3种不同的染色体制片技术,以豌豆(Pisum sativum)为材料,对常规压片(醋酸洋红染色)、孚尔根(Feulgen)核反应染色法和去壁低渗法(Giemsa染色)3种不同制片技术效果进行了比较,实验表明3种方法各有特点,去壁低渗法易获得分散细胞,有利于进行染色体核型分析。     

制备皱纹盘鲍染色体标本方法的比较研究

以皱纹盘鲍Haliolis discus Hannai的鳃、外套膜、上足触手为材料,采用植物血球凝集素（PHA）和秋水仙素体内注射法,通过滴片制备染色体标本,统计细胞分裂数。结果表明,鳃、外套膜、上足触手3种组织注射PHA后,细胞分裂指数比没有注射PHA的对照组均有显著提高,其中以PHA2次注射为最高。在3种组织中,鳃组织的细胞分裂指数最高,其次是外套膜、上足触手。用3种组织制备的染色体标本,均获得大量形态清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相。     

半微量全血培养法制备罗非鱼染色体标本的条件探索

鱼类染色体的制作方法最常用的是PHA体内培养肾细胞制片法，对野外没有良好设备的情况，此法尤为适用，但这种方法要求剖杀鱼，不利于鱼种的保存，尤其是对稀有鱼类和种鱼不太合适。因此建立一种一般实验室能够开展的方便稳定的染色体制片方法势在必行。大量研究证实采用鱼类外周血淋巴细胞培养制备染色体的方法能有效地解决这些问题 。本研究以罗非鱼为材料，对鱼类外周血淋巴细胞培养条件进行了探索，初步建立了能够制备优质染色体制片的方法，为进一步研究染色体的结构、基因定位、荧光原位杂交等奠定了基础。     

半微量全血培养法制备罗非鱼染色体标本的条件探索

鱼类染色体的制作方法最常用的是PHA体内培养肾细胞制片法,对野外没有良好设备的情况,此法尤为适用,但这种方法要求剖杀鱼,不利于鱼种的保存,尤其是对稀有鱼类和种鱼不太合适。因此建立一种一般实验室能够开展的方便稳定的染色体制片方法势在必行。大量研究证实采用鱼类外周血淋巴细胞培养制备染色体的方法能有效地解决这些问题 。本研究以罗非鱼为材料,对鱼类外周血淋巴细胞培养条件进行了探索,初步建立了能够制备优质染色体制片的方法,为进一步研究染色体的结构、基因定位、荧光原位杂交等奠定了基础。     

利用Photoshop进行芦笋核型分析的研究

利用Photoshop软件对芦笋染色体核型进行了分析,结果表明:芦笋染色体的数目为2n=20,核型公式K(2n)=2X=2n=20=14m(2SAT)+6sm,核型类型属于2A型,较不对称,为较原始类型;利用Photoshop进行核型分析,方法简单可行,操作性好,且经济实用,值得推广。     

非洲紫罗兰的核型分析

将低渗技术引入染色体压片法,首次对非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha)缟花品种"Sunray Trail"进行了核型分析,并摸索了适用于该试材的预处理方法,为与之有关的细胞学分类、分子育种、新品种培育及转基因的细胞学检测等方面提供了细胞学依据。结果表明,供试材料为4倍体品种,其核型公式为2n=4x=28=16 m+8 sm+4 T;核型类型属于2B型;核不对称系数为63.3%;最佳预处理方法为在4℃下用0.05%的秋水仙素处理根尖2 h。     

延边黄牛体细胞克隆囊胚染色体标本制备的研究

[目的]探讨适合延边黄牛体细胞克隆胚胎染色体标本制备的方法。[方法]利用延边黄牛体细胞克隆产生的囊胚制备染色体标本,采用传统的细胞遗传学方法,将延边黄牛体细胞克隆囊胚分别在含有0.11、.0和10.0μg/ml浓度秋水仙素的CR1aa培养液中继续培养4或6 h,以使细胞分裂停留在中期。处理后的囊胚移入柠檬酸钠低渗液中,室温下处理15~20 min。将低渗后的单个胚胎转移至载玻片上,固定并用体积分数为25%的Giemsa溶液染色1~5 h,蒸馏水冲洗脱色,于室温干燥。显微镜下计算胚胎细胞数和有丝分裂指数以及标本制备质量。[结果]结果表明,1.0μg/ml秋水仙素处理6 h后的染色体标本制备效果较为理想。[结论]该研究为制备延边黄牛体细胞克隆囊胚染色体标本提供适宜的试验参数。