菲律宾蛤仔酶解物抗肺癌H1299细胞的活性研究

[目的]探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备及体外抗肺癌H1299细胞的活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解菲律宾蛤仔,经超滤得到3kD以下的酶解多肽,应用MTT法、HE染色和AO/EB染色等方法检测其体外抗H1299细胞的活性。[结果]3 kD以下的酶解多肽作用于H1299细胞后,MTT法检测结果表明该多肽能抑制该细胞增殖,呈剂量和时间依赖;经HE染色和AO/EB染色发现H1299细胞出现凋亡的形态学改变。[结论]菲律宾蛤仔酶解多肽能明显抑制H1299细胞的增殖并诱导细胞凋亡。     

菲律宾蛤仔木瓜蛋白酶水解物抗氧化活性研究

以菲律宾蛤仔蛋白为原料,用木瓜蛋白酶对其进行水解,采用正交实验方法研究酶解温度、酶解时间,加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除率和还原力评价水解物的抗氧化性。结果表明：水解度与抗氧化性之间没有正反相关系,当温度为45℃,时间为6 h,加酶量为1 500μg/g,pH为7.0时,水解度最大;温度为45℃,时间为2 h,加酶量为2 000μg/g,pH为7.0时,水解物的抗氧化活性最强;水解物对羟自由、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均有很好的清除作用,并呈现浓度依赖性。因此,菲律宾蛤仔蛋白的木瓜蛋白酶水解物具有很好的抗氧化性。     

体外培养菲律宾蛤仔外套膜细胞的增殖

以D-MEM和M199为基础培养基,对菲律宾蛤仔的外套膜进行了细胞培养,并以RNA/DNA比值作为评价细胞增殖的指标.结果表明:外套膜细胞增殖的主要形式是从组织块中迁出,培养前期细胞分泌旺盛,细胞在体外生长可达15 d;外套膜细胞在D-MEM中的生长优于M199;RNA/DNA指标与直观观察的细胞生长状况相吻合,利用这一指标,有助于客观评价体外培养菲律宾蛤仔细胞的增殖特性.     

菲律宾蛤仔糖蛋白提取及体外抗肿瘤活性研究

以菲律宾蛤仔肉为研究对象,水提醇沉,Sevag法除蛋白,DEAE—SepharoseFF阴离子交换层析柱分离纯化,SephadexG-25凝胶柱除盐,得到1种白色组分,红外显示该组分具有糖蛋白的一般吸收特征。将该糖蛋白作用于前列腺癌细胞DU-145进行体外药物敏感性实验,结果显示,0．1moFL氯化钠溶液的洗脱峰组分对DU-145细胞具有明显增殖抑制作用。最适作用浓度约为25mg／mL,表明菲律宾蛤仔具有潜在的抗肿瘤作用。     

菲律宾蛤仔凝集素的分离纯化及抑菌活性研究

采用Cellulose DE52离子交换层析、Sephadex G- 100分子筛层析及TSK G3000PWXL凝胶色谱柱HPLC从菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum中分离纯化出具有N-乙酰半乳糖酰胺(N- acetyl- D- galactosamine,GaINAc)和猪胃黏蛋白(Mucin from porcine stomach,PSM)特异性的菲律宾蛤仔凝集素(简称为MCL-T).SDS-PAGE分析结果表明,MCL-T的相对分子量为148000,含有62000和36000的亚基.抑菌试验结果表明,MCL-T对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis有较高的抑菌活性.对MCL-T中Trp残基、-S-S-、-SH以及Tyr残基进行化学修饰后,MCL-T对金黄色葡萄球菌的抑菌活性丧失;对其-S-S-进行化学修饰后,MCL-T对枯草芽孢杆菌的抑菌活性影响不大,而对其-SH、Trp残基和Tyr残基进行化学修饰后,MCL-T对枯草芽孢杆菌的抑菌活性丧失.研究表明,MCL-T 肽链上的氨基酸残基状态与其抑菌活性有关.     

菲律宾蛤仔凝集素的分离纯化及抑菌活性研究

采用Cellulose DE52离子交换层析、Sephadex G-100分子筛层析及TSK G3000PWXL凝胶色谱柱HPLC从菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum中分离纯化出具有N-乙酰半乳糖酰胺(N-acetyl-D-galac-tosamine,GalNAc)和猪胃黏蛋白(Mucin from porcine stomach,PSM)特异性的菲律宾蛤仔凝集素(简称为MCL-T)。SDS-PAGE分析结果表明,MCL-T的相对分子量为148 000,含有62 000和36 000的亚基。抑菌试验结果表明,MCL-T对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis有较高的抑菌活性。对MCL-T中Trp残基、-S-S-、-SH以及Tyr残基进行化学修饰后,MCL-T对金黄色葡萄球菌的抑菌活性丧失;对其-S-S-进行化学修饰后,MCL-T对枯草芽孢杆菌的抑菌活性影响不大,而对其-SH、Trp残基和Tyr残基进行化学修饰后,MCL-T对枯草芽孢杆菌的抑菌活性丧失。研究表明,MCL-T肽链上的氨基酸残基状态与其抑菌活性有关。     

天津海域菲律宾蛤仔肥满规律研究

于2013年对天津浅海养殖的菲律宾蛤仔在不同密度和月份下的肥满度变化进行研究。结果表明:2 000粒·m-2及以下各养殖密度之间蛤仔肥满度差异不显著,4 000粒·m-2养殖密度下蛤仔肥满度显著偏低;蛤仔肥满度周年变化范围为14.1~25.6,1—5月份,蛤仔肥满度高于20,3—4月份肥满度最高。     

菲律宾蛤仔提取物及生物活性的研究进展

菲律宾蛤仔是我国四大养殖贝类之一,营养丰富,蛋白含量高,具有食用和药用价值.从菲律宾蛤仔中提取的氨基多糖、糖胺聚糖、糖蛋白、活性多肽等物质,具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、增强免疫力及抗动脉粥样硬化等作用,本文综述这些生物活性成分的研究现状,为海洋功能食品和海洋药物的研发提供参考.     

诏安湾菲律宾蛤仔的滤水率研究

应用流水槽法(模拟现场流水法)野外测定了诏安湾菲律宾蛤仔的滤水率,6、8和10月份,菲律宾蛤仔的壳长(cm)分别为3.54±0.21、3.50±0.22和3.72士0.24;软体部干重(g)分别为0.55±0.06、0.57±0.07和0.52±0.11.6、8和10月份,以颗粒有机物(POM)为指标的个体滤水率(L/h)分别为1.17±1.16、1.35±1.00和0.62±0.28;以叶绿素a(Chl a)为指标的个体滤水率(L/h)分别为1.50±0.77、1.41±0.64和1.53±0.79.以POM为指标的单位干重滤水率(L/(g·h))分别为2.18±2.29、2.28±1.63和1.30±0.75:以Chl a为指标的单位干重滤水率(L/(g·h))分别为2.78±1.05、2.55±0.81和3.01±0.87.无论是以POM为指标,还是以Chl a为指标,不同月份的个体滤水率之间和单位干重滤水率之间均无显著差异(19>0.01).除10月外,无论是以POM为指标,还是以Chl a为指标.相同月份的个体滤水率之间和单位干重滤水率之间均无显著差异(P<0.01).并就影响滤水率的一些环境因素和试验方法进行了讨论.     

几种金属离子对菲律宾蛤仔张壳的影响

本文研究了Ｋ＾＋，Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋等几种金属离子以及盐度对菲律宾蛤仔张壳快慢的影响。并认为在一定的条件下，Ｍｇ＾２＋有促进蛤体张壳的作用。     

外源刀豆凝集素对菲律宾蛤仔免疫机能的影响

为了解外源刀豆凝集素对菲律宾蛤仔免疫因子的影响,开展了不同浓度刀豆凝集素对菲律宾蛤仔血细胞吞噬活性、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响研究。结果表明,投喂刀豆凝集素后第1、3、4、6、7天,菲律宾蛤仔吞噬细胞活性显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂5μg/L刀豆凝集素后第4、6、7天,菲律宾蛤仔溶菌酶含量显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂刀豆凝集素后第1～7天,菲律宾蛤仔碱性磷酸酶活性显著高于对照普通养殖(P0.05);投喂5μg/L刀豆凝集素后第3、7天,菲律宾蛤仔的超氧化物歧化酶活性显著高于对照普通养殖(P0.05)。刀豆凝集素在第2～5天对菲律宾蛤仔免疫力具有很大的促进作用,3μg/L刀豆凝集素效果最佳,第7天后投喂5μg/L刀豆凝集素效果最佳。     

磁场对花蛤抗氧化酶活性的影响

在实验室模拟磁场,观察暴露在100～135 mT磁场条件下20 d的花蛤肝胰腺及鳃中超氧阴离子自由基(O_2~-.)的产生速率、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性、丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:在100～135 mT磁场强度下,花蛤腮和肝胰腺中的O_2~-.的产生速率增加;SOD活性、POD活性都呈现应激性上升;MDA的含量没有表现出太大的变化。100～135 mT强度的磁场对花蛤产生了氧化胁迫,但对膜结构尚未产生影响。     

木瓜蛋白酶水解制备菲律宾蛤仔肽工艺研究

利用壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化的木瓜蛋白酶,水解菲律宾蛤仔。通过正交试验对pH值、酶用量、酶解时间、温度等参数进行了优化。结果表明：在pH 6.0条件下,酶解菲律宾蛤仔的最佳工艺条件为固定化木瓜蛋白酶酶加量（E/S）1.8%、酶解时间9 h以及温度60℃,所得菲律宾蛤仔肽含量为60.4 mg。     

天津沿海菲律宾蛤仔人工育苗的初步研究

在天津沿海进行菲律宾蛤仔育苗研究。结果表明,幼虫生长正常,初始壳长93.8μm。与曾在山东胶州进行的菲律宾蛤仔育苗试验相比,其发育速度更快,第3天出现壳顶,第8天部分幼虫进入匍匐阶段。受精后14 d观察,幼虫变态失败,原因有换水量小、变态前饵料不佳、池水浑浊、池底淤泥等。     

菲律宾蛤仔帕金虫病组织病理学研究

对被帕金虫perkinsus sp孢子体感染的菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum主要器官的组织学观察发现，帕金虫孢子体主要寄生于结缔组织中，绝大多数被嗜酸性颗粒细胞包裹，在锶，外套膜，消化管中帕金虫孢子体的数量多，在闭壳肌，出水管中的少，足中尚未发现，孢子体的形状多样，成熟的营养孢子体有一个大液泡，被帕金虫孢子体寄生的组织，表现出程度不同的病理学变化，严重的情况下，结缔组织中游离和寄生的孢体的数量很多，上皮细胞核固缩，坏死，细胞脱落。