芒果炭疽病菌对甲基硫菌灵的敏感性测定

采用生长速率法测定了采自中国芒果主产区、泰国、夏威夷等地的127个芒果炭疽菌对甲基硫菌灵的敏感性。结果表明,芒果炭疽菌株对甲基硫菌灵的EC50值范围为0.005 7~7.850 5μg/m L,最大EC50值是最小EC50值的1 377倍。不同地区、不同染病部位、不同年份的芒果炭疽菌株对甲基硫菌灵的敏感性不同,采自四川菌株敏感性最低,采自夏威夷菌株敏感性最高;不同分离部位敏感性程度依次为枝、果、叶;2011~2013年,菌株敏感性逐年降低,存在很大的抗药性风险。     

芒果炭疽病菌生防细菌的筛选,鉴定及生防潜能的初步研究

从热带作物,果树,蔬菜的叶,果上和根系周围土壤中分离到了１１０个芽孢杆菌分离物,以炭疽病菌－芽隐杆菌对峙培养法筛选出拮抗力较强的Ｂａ２４,Ｂａ６和Ｂａ２３。经形态特征,培养特性和生理生化性状的测定,这３株芽孢杆菌被鉴定为桔芽孢杆菌。抑菌谱的测定结果表明,这３株芽孢杆菌为广谱性的拮抗菌。经离心,过滤,除去菌体后的Ｂａ２４,Ｂａ,Ｂａ２３的培养滤液对芒果炭疽病菌的菌丝生长和分生孢子萌发均有较好的抑制作     

抗多菌灵的芒果炭疽病菌的杀菌剂筛选及其交互抗性测定

为筛选抗多菌灵的芒果炭疽病菌的杀菌剂,采用生长速率法测定23种杀菌剂对8株抗、感多菌灵的芒果炭疽病菌(Colletotrichum gtoeosporioides Penz.)的室内毒力.通过EC50值、EC90值及杀菌剂间的交互抗性测定等综合分析表明:对芒果炭疽病菌毒力最强的杀菌剂是咪鲜胺,其平均EC50值和EC90值分别为0.04、0.21μg/mL;苯醚甲环唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、氟硅唑、氟硅唑·恶唑菌酮、戊唑醇、腈菌唑和多抗霉素对芒果炭疽病菌的毒力也较强,与多菌灵不存在交互抗性,这9种杀菌剂均可作为防治芒果炭疽病的首选杀菌剂.另外,三唑酮、异菌脲、三环唑和代森锰锌也有较好的抑菌效果,可用于芒果炭疽病的防治.通过交互抗性分析,在苯并咪唑类杀菌剂之间,苯并眯唑类杀菌剂与烯唑醇,嘧菌酯、醚菌酯与腈菌唑·醚菌酯,嘧菌酯、醚菌酯与三唑酮,苯醚甲环唑与氟硅唑·恶唑菌酮之间存在交互抗性;而百菌清与嘧菌酯、醚菌酯和腈菌唑·醚菌酯,恶霉灵与嘧菌酯、醚菌酯、腈菌唑·醚菌酯和三唑酮之间存在负交互抗性.     

内生拮抗细菌BEB2的分子鉴定及其对香蕉枯萎病菌的抑制作用

利用聚合酶链式反应(PCR)方法对细菌BEB2做进一步的分子鉴定,并研究不同温度、pH值和培养基下BEB2发酵液对香蕉枯萎病菌生长的抑制能力.以及应用BEB2对香蕉枯萎病进行防治测试.结果发现,香蕉内生拮抗细菌BEB2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);不同温度、pH值和培养基下的BEB2发酵液对香蕉枯萎病菌生长的抑制能力具显著差异,在King B2培养基上抑菌作用最强,最适抑菌温度为32℃,最适抑菌pH值为9.0.香蕉枯萎病盆栽防治实验结果发现,菌株接种离体叶片和植株均表现出一定的抑制活性,防治效果良好;该菌株连续20次转接培养,遗传稳定性高,抑菌谱较宽,具一定的生防应用价值.     

不同杀菌剂对红麻炭疽病菌的室内毒力测定

利用生长速率法对采自福建漳州的红麻炭疽病菌进行了不同杀菌剂的室内毒力测定.结果表明,在供试的9种药剂中,50%咪鲜胺锰盐WP的抑制效果最好,其EC50和EC90分别为0.0443μg/ml和0.8077μg/ml:25%吡唑醚菌酯EC和10%的苯醚甲环唑WG也表现了良好的抑制效果,其EC50分别为0.1410μg/ml和0.4098μg/ml,EC90分别为954.8009μg/ml和207.7769μg/ml.     

茶炭疽病菌毒素的致病活性及理化性质初探

研究发现茶炭疽病菌Gloeosporium theae-sinensis Miyake产生有致病力的外毒素,引起茶树叶片坏死,形成枯斑,类似于病原菌侵染形成的症状。对该菌的培养毒素滤液进行了生物测定,以探讨最佳产毒条件和理化性质。得最佳产毒条件：pH=5.0、25℃且于Czapek-Dox培养液中连续振荡培养16βd。将茶梢浸入毒素滤液而感毒,而后用于茶炭疽病菌毒素生物测定的方法比较合适。     

不同培养条件对红麻炭疽病菌菌丝生长的影响

试验表明,红庥炭疽病菌菌丝在温度为12～30℃时均能生长,最适生长温度为25℃;菌丝在pH值为1～12均能生长,最适pH值为7;菌丝在完全光照和光暗交替的环境下生长速度最快;在被测试的碳源和氮源中,菌丝生长的最佳碳源为可溶性淀粉、麦芽糖和甘油,最佳氮源为酵母浸膏、牛肉浸膏、蛋白胨、硝酸钾、硝酸钠.     

香蕉枯萎病菌及其粗毒素对香蕉的致病性比较

从8种培养液中筛选出能诱导香蕉枯萎病菌4号小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race4)FOCAAA315菌株高产毒素的改良CzapekB培养液,FOCAAA315菌株在该培养液中培养第15d,镰刀菌酸(FA)产量高达669.2mg/L,蔗糖为诱导产毒的最佳碳源。采用伤根浸渍法接种,测定枯萎病菌和病菌发酵粗毒素对香蕉组培苗的致病性。结果表明,粗毒素接种可诱发与病原菌类似的病害症状。受侵染的植物组织在细胞水平上发生一系列形态结构和生理生化代谢的病理变化,包括细胞壁消解、侵填体堵塞气腔、粘胶质减少、淀粉量减少、细胞木质化和黄褐色胶状物堵塞导管等。香蕉枯萎病菌的粗毒素是重要的致病化学物质;利用病菌孢子悬浮液在香蕉苗期接种,可以作为室内快速鉴定香蕉品种抗病性的方法。     

橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶基因CgATPase 01的敲除及表型分析

为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因Cg ATPase01的功能,本研究利用Splitmarker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的Cg ATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进行分析。结果表明:通过Split-marker方法获得了敲除突变体△Cg ATPase01,表型分析发现该突变体与野生菌株间存在明显差异,病菌气生菌丝的颜色发生了改变,生长速率降低,产孢量下降,对橡胶树叶片的致病性减弱,推测该基因可能在橡胶树胶孢炭疽菌的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用。本研究结果为进一步研究胶孢炭疽菌P型ATP酶基因功能和病原菌的致病机理奠定了基础。     

橡胶炭疽病菌致病相关突变体的筛选及表型分析

通过对实验室已获得的1 685个橡胶炭疽病菌T-DNA插入突变体的生物学及致病性测定,从中筛选出15个致病力明显减弱的突变体,并进行PCR检测。结果表明,该基因组中均含潮霉素磷酸转移酶基因片段。在PDA培养基上,其中2个突变体菌落颜色异常,6个生长速率下降,8个产孢量显著降低,2个突变体分生孢子形态异常,2个附着胞形态异常,3个不能形成附着胞,在洋葱表皮上,侵染钉形成率显著降低。     

Antioxidant and Cytotoxic Activities of Aphanes arvensis Extracts

The objectives of this study were to examine the free radical scavenging activity and the protective effects against macromolecular oxidation as well as the cytotoxic activity of Aphanes arvensis aqueous and methanolic extracts. Free radical scavenging activity was determined by DPPH method. The methanolic extract showed a scavenging activity nearly equivalent to Trolox and Vitamin C and has an IC₅₀ value of 4.54 μg/mL. Total antioxidant capacity was determined by CUPRAC method. The antioxidant capacity of aqueous and methanolic extract was 0.792 and 1.550 mmol TE/g DWE, respectively. The protective effect of A. arvensis extracts against lipid peroxidation was evaluated using a liposome oxidation system. The methanolic extract was more active than the aqueous extract. The aqueous extract possessed protective effect against protein oxidation in a dose dependent manner. Both extracts showed inhibitory effect on DNA oxidation as measured by plasmid relaxation assay. Results presented here indicate that A. arvensis possess strong antioxidant activity and protective effects with very little cytotoxic effect, and they can therefore be used as a natural additive in food, cosmetic and pharmaceutical industries.     

Biological weed control in rice with a strain of Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc. used as a mycoherbicide

An indigenous fungal pathogen of the native leguminous weed, northern jointvetch (Aeschynomene virginica [L.] B.S.P.) was found to cause an anthracnose disease at endemic levels annually on its host in Arkansas rice and soybean fields without apparent impact on competitive ability or dispersal of the weed. The pathogen was isolated in pure culture and identified as a host-specific strain of Colletotrichum gloeosporioides, an intensively studied ‘group species’ which causes many anthracnose diseases and consists of species and strains representing wide latitudes of hosts specificity and virulence on both economic crops and wild plants in the tropical and temperate regions of the world. An understanding of anthracnose disease aetiology gained from the literature and confirmed by empirical studies with the weed and fungus revealed that the pathogen was specific and potentially devastating to its weed host, but was constrained in natural situations by poor capacity for dissemination of inoculum. Its spores, although produced in abundance, develop late, are sticky and dispersed mainly by splashing rain or insects, mechanisms that are suppressed on annual weed plants interspersed with annual crop plants. For the fungus to be effective as a biological control agent (i.e. as a mycoherbicide), complete coverage of a field with inoculum at appropriate times and levels to compensate for the pathogen's poor capacity for dissemination would be required. A multidisciplinary team of plant pathologists, weed scientists, veterinary scientists and fermentation scientists investigated the practical potential of the mycoherbicide concept with this host-pathogen combination and found it to be biologically feasible, registerable and commercially practical. The fungus is marketed as living dry spores for use on a comparatively small area weed problem and in a crop-management programme that relies heavily on chemical pesticides. Extension of this concept to control other weeds or other pests seems possible and practical.     

全基因组法绘制禾谷炭疽菌和希金斯炭疽菌中MAPK级联信号途径简图

MAPK（促分裂原活化蛋白激酶, Mitogen-Activated Protein Kinase）信号转导途径在植物病原真菌的生长发育、有性生殖和致病性调节等方面占有重要作用,是一种普遍存在的细胞外信号转导途径。在真核生物MAPK蛋白的同源性和2种炭疽菌（禾谷炭疽、希金斯炭疽菌）全基因组数据库的基础上,结合Blastp、蛋白质结构域分析和聚类分析3种方法,从禾谷炭疽菌和希金斯炭疽菌基因组数据库中找出18个与酿酒酵母菌同源的3类MAPK级联信号途径基因,并绘制出这2种炭疽菌MAPK级联信号途径简图,为深入     

中国橡胶树苗圃2种炭疽病菌分子鉴定及分布分析

根据胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌特异引物对,对采自中国云南、海南、广东和广西植胶区的138株炭疽病菌进行分子鉴定。结果显示:138株炭疽菌中鉴定为胶孢炭疽菌的有100株,占总测定株数的72.46%,尖孢炭疽菌的有38株,占总测定株数的27.54%。其中海南、云南和广东橡胶苗圃中胶孢炭疽菌占所分析菌株总数比例分别为81.82%(54/66)、60.0%(15/25)和77.27%(17/22),而广西3个橡胶苗圃中的2个苗圃地尖孢炭疽和胶孢炭疽病菌各占一半。总体来看,国内橡胶树苗圃地炭疽病病原菌仍以胶孢炭疽菌为主,部分苗圃同时存在胶孢和尖孢炭疽菌的危害。     

希金斯刺盘孢全基因组候选效应分子的预测

希金斯刺盘孢（Colletotrichum higginsianum Sacc.）是一种世界性分布的重要植物病原真菌,可引起严重的十字花科植物炭疽病,影响作物品质并造成严重的经济损失。效应分子在植物病原真菌侵染寄主植物过程中发挥着重要的作用。根据已公布的希金斯刺盘孢的全基因组信息,以其全基因组蛋白序列为材料,通过生物信息学方法,对其候选效应分子及其功能进行了预测和分析。首先利用SignalP、TMHMM、Protcomp、big-PI Predictor 和TargetP程序依次预测出其分泌类型的蛋白,再通过其序列大小和半胱氨酸含量作进一步筛选,最后利用blastp工具与非冗余蛋白质数据库进行比对,找出数据库中没有蛋白同源性的序列,从而获得候选效应分子;同时对希金斯刺盘孢全基因组的16 150个蛋白序列进行分析,最终预测到135个符合条件的候选效应分子,而大多数都是功能未知的假定蛋白。本研究采用生物信息学分析方法预测出了希金斯刺盘孢的候选效应分子,为进一步研究这些效应分子的功能奠定了基础,其研究技术和手段也为其它真菌效应分子的预测提供了重要的参考资料。     

甘蔗割手密种和热带种基因差异表达的基因芯片和Solexa高通量技术的比较分析

分别采用甘蔗表达谱芯片和Solexa技术,对甘蔗热带种和割手密种基因表达谱进行分析.结果表明:基因芯片技术筛选得到1 245个差异表达基因;Solexa技术分别在热带种和割手密种中得到42 913 194个和39 363 668个初始tag,从中获得143 121和112 281个高质量测序标签(clean tags),对应的标签种数(distinctclean tags)分别为25 164和20 349,未知序列(unknown clean tags)分别为117 957和91 932,其中差异表达基因有l 432个.基因芯片和Solexa技术得到的差异基因中有823个是相同的,主要涉及非生物刺激响应、磷代谢、转录调控等功能.     

金钟藤与掌叶鱼黄草水浸液对土壤养分和酶活性的影响

近年来金钟藤在海南地区扩散蔓延成灾,已严重威胁着生物多样性和生态系统功能。为揭示本地有害植物金钟藤对土壤生态的影响机制,比较研究金钟藤与同属本地植物掌叶鱼黄草鲜枝叶不同浓度（0.5、0.25 、0.125、0 g/mL）的水浸液对土壤理化性质及3大类酶活性的影响。结果表明：随浓度的增加,金钟藤水浸液显著提高了土壤pH和土壤有机质、全氮、全磷、铵态氮、硝态氮、有效磷、速效钾的含量以及蔗糖酶、尿酶和磷酸酶的活性,但对土壤全钾含量没有显著影响;随浓度的增加,掌叶鱼黄草水浸液也显著提高了土壤有效养分的含量以及蔗糖酶和磷酸酶的活性,但对土壤全钾含量和尿酶活性影响不显著。与掌叶鱼黄草水浸液相比,金钟藤水浸液对土壤pH值、全磷、铵态氮、有效磷的含量和尿酶活性的影响更为显著,在最高浓度0.5 g/mL下,经金钟藤水浸液处理的土壤全磷、铵态氮、有效磷和尿酶含量分别是掌叶鱼黄草水浸液处理的1.13、1.52、1.31、2.19倍;在0.25 g/mL浓度下,分别是掌叶鱼黄草水浸液处理的1.06、1.51、1.26、1.88倍;在0.125 g/mL浓度下,分别是掌叶鱼黄草水浸液处理的1.07、1.64、1.23、1.39倍。土壤养分和酶活性的改善可能为金钟藤的生长提供有利条件,使得其在与本地植物的竞争中获得优势,这可能是其能够成功入侵新区域和快速扩散蔓延的生态机制之一。     

海南4个地区暹罗炭疽菌群体遗传结构分析

对分离自海南4个地区13种寄主植物上暹罗炭疽菌的ITS-CAL-GAPDH 3基因序列进行群体遗传结构分析。95条暹罗炭疽菌多基因序列可定义为16个单倍型,其中,单倍型H5为主要单倍型,分布于所有寄主植物。AMOVA分析显示,遗传变异主要发生在种群内;病菌未经历过大规模的种群扩张过程。研究结果表明,暹罗炭疽菌种群具有丰富的遗传多样性。