家兔抗长角血蜱免疫模型的建立及对长角血蜱成蜱生长发育的影响

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔对长角血蜱成蜱的吸血和生长发育影响显著,其抗体水平与长角血蜱成蜱在兔体的吸血周期、死亡率成正相关,与雌蜱的饱血脱落率、饱血体重成负相关。结果进一步证明,蜱的唾液腺是其主要的免疫器官之一。家兔抗体水平的持续期足以使长角血蜱完成一个世代,可以满足试验需求,是抗蜱免疫研究理想的阳性对照模型。同时,血清中特异性抗体的效价也可以作为判断动物对长角血蜱抵抗力强弱的重要指标之一。     

湖南省需步县南山牧场长角血蜱的发育史观察

经观察，长角血蜱雌虫１月份和８月份在兔体饱血时间为６－９ｄ，８月份和９月份在牛体饱血期为４－７ｄ，饱血雌虫产卵前期为７－１０ｄ，产卵期为１７－２７ｄ，产卵数３１２－１２６８粒，卵孵化期为１６－２１ｄ。幼虫８月份在兔体饱血期为５－７ｄ，９月份为３－４ｄ，８月份在牛体饱血期为３－５ｄ，９月份为２－２．５ｄ。饱血幼虫蜕化期８月份为１６－１９ｄ，９月份为１０－１７ｄ。     

长角血蜱不同龄期虫体抗原分析

用琼脂双向扩散法、酶联免疫吸附技术和蛋白质免疫印迹技术，用长角血蜱三个龄期的虫体蛋白检测其幼虫、若虫和成虫未吸血全蜱匀浆液分别免疫兔后的血清效价。结果表明不同生活阶段的虫体之间存在免疫交叉反应。实验结果表明不仅长角血蜱三个龄期虫体之间存在共同抗原，而且与微小牛蜱幼虫和越南血蜱幼虫之间也存在共同抗原。     

半散放麋鹿长角血蜱病的诊治

长角血蜱（Haemaphysalis Longicorni,）是属蛛形纲、蜱螨目、硬蜱科、血蜱属的一种节肢动物。分布较广泛，未成熟吸血时体小而不易引人注意。由于生活方式的多样性，它寄生于多种动物体表，对人也有侵袭，并且许多性疾病的传播媒介，对此国内早有研究。但长角血蜱寄生半散放麋鹿体表而致病死亡的情况尚未有报导，     

长角血蜱的免疫研究进展

以长角血蜱疫苗候选抗原为例，从长角血蜱蛋白水解酶、蜱生殖和发育相关分子及RNA干扰技术、IgG结合蛋白技术几方面概述了近年来国内外有关蜱疫苗的研究现状，并展望了蜱疫苗的发展趋势。     

延边某地长角血蜱和全沟硬蜱体内东方泰勒虫的分子生物学检测

为调查吉林省延边地区自然生境内游离蜱携带东方泰勒虫的情况,以东方泰勒虫主要表面蛋白基因(MPSP)基因为靶基因,采用PCR方法对延边地区自然生境内的游离蜱DNA进行扩增。在长角血蜱的DNA中检测了东方泰勒虫,检出率为29%;而全沟硬蜱中没有检测到东方泰勒虫。结果表明,自然生境中的游离长角血蜱体内携带着东方泰勒虫。     

青岛市奶牛瑟氏泰勒焦虫病传播媒介——长角血蜱的调查分析

在青岛市奶牛中发现黄疽病，经血液学检查和临床分析，已证明瑟氏泰勒焦虫病的存在，传播媒介的调查分析将是疫情分析不可缺少的依据，因为这种疫病和各种血液原虫病一样，必须通过专一的蟀叮咬吸血传播，对蜂的调查分析是本病流行病学和病因学研究的重要组成部分。1采样在瑟氏泰勒焦虫病的发病地区，广泛发动养牛户寻找牛身上寄生的蜂，一旦发现，即采集个体细小的华啤和吸血后粗大的雌蝉，放进小瓶中，加开水烫死后，送到实验室进行蝉的鉴定。1994年8月9日从峡山区中韩镇王德斋发病奶牛身上采集数枚妈，按上述方法采样送检。该牛曾有典型…     

长角血蜱不同龄期虫体抗原分析

用琼脂双向扩散法、酶联免疫吸附技术和蛋白质免疫印迹技术,用长角血蜱三个龄期的虫体蛋白检测其幼虫、若虫和成虫未吸血全蜱匀浆液分别免疫兔后的血清效价。结果表明不同生活阶段的虫体之间存在免疫交叉反应。实验结果表明不仅长角血蜱三个龄期虫体之间存在共同抗原,而且与微小牛蜱幼虫和越南血蜱幼虫之间也存在共同抗原。     

嗜群血蜱和长角血蜱ITS-2、COI和COⅡ基因序列变异与亲缘关系分析

本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系.采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COI)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ基因(COⅡ)片段,并进行测序,进而分析其基因变异与系统发育.结果表明,长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2、COⅠ和COⅡ基因片段的大小存在差异,长角血蜱3种基因分别为361、479和647 bp,嗜群血蜱基因分别为354、474和661 bp.长角血蜱与嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因的相似性分别为84.2%、89.0%和88.4%.以3种基因构建的NJ进化树中,长角血蜱和嗜群血蜱均聚类.因此,认为长角血蜱和嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因间变异较小,它们是血蜱属中亲缘关系较近的2个有效种,支持传统形态学的分类地位.     

长角血蜱肠道细菌的分离与鉴定

为深入研究肠道细菌在蜱的生理学和传播病原上的作用,本研究进行了长角血蜱肠道细菌的分离鉴定。按照细菌传统分离方法并结合16S rDNA测序鉴定,获得7个分离株,这些菌株分别属于显核菌属(Caryophanon sp.)、考克氏菌属(Kocuria sp.)、葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)、微杆菌属(Microbacterium sp.)和短杆菌属(Brevibacterium sp.)5个菌属。     

双芽巴贝斯虫在长角血蜱肠内发育的形态学研究

以耳袋法将长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)幼虫饲于实验感染双芽巴贝斯虫(Babesia bigemina)牛,幼虫饱血后24h内,其肠管内容物中红细胞内、外见有单梨子型(3.5～4.5μm×1.2～2.6μm)和双梨子型(4.1～4.8μm×1.8～3.0μm)两种裂殖体.饱血后24～48h,随着裂殖体细胞膜及核变性而发生形态变化.48～72h,绝大多数裂殖体出现溶解.72h后,这些裂殖体从肠道消失.其后,在蜱肠上皮及血淋巴中也未能找到双芽巴贝斯虫体.本实验从形态学上证明双芽巴贝斯虫在长角血蜱若虫肠道内不能发育.     

河北省长角血蜱的区系调查及季节动态观察

通过野外定点观察发现长角血蜱是河北省危害家畜的主要蜱种，分布于该省西部的太行山和北部的燕山地区，牛，羊是其主要宿主，该蜱以饥饿的成虫，若虫越冬，每年从３月下旬开始活动侵袭畜体，最迟１１月中旬消失，若虫在４月底到６月中旬为活动盛期，成虫在６月下旬至７月下旬为活动盛期，幼虫在８月中旬至９月下旬为活动盛期。该蜱的３个活跃期以幼虫阶段对外界和主要灭蜱剂的耐受性最低。     

长角血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的原核表达

根据GenBank中的长角血蜱丝氨酸蛋白酶抑制荆(Haemaphysalislongicornis serine proteinase inhibitor-2,HLS2)基因序列设计特异性引物,以长角血蜱饥饿成蜱总RNA为模板,经RT-PCR扩增出1164 bp的HLS2DNA片段.将其与pET-30a载体连接,构建pET-30a-HLS2表达载体,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆,经双酶切鉴定及测序分析后转化到E.coli BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析.优化表达条件后纯化融合蛋白,用Western blotting鉴定其抗原性.结果表明,获得的HLS2 DNA片段与GenBank中的HLS2(序列号AB162827)序列的同源性为98%.构建的pET-30a-HLS2表达载体在大肠杆菌中表达了约为47 000的HLS2融合蛋白,主要以包涵体形式存在,IPTG终浓度为1.0 mmol/L、28℃诱导7 h后融合蛋白的表达量最高.Western blotting显示该融合蛋白可与兔抗长角血蜱阳性血清反应.