秘鲁番茄高效再生体系的研究

以秘鲁番茄的叶片和茎段为外植体,研究不同外植体种类、激素配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导、分化和不定芽生根的影响,以期建立秘鲁番茄组织培养高效再生体系。结果表明:秘鲁番茄的叶片较茎段更适宜愈伤组织诱导与分化,以叶片为外植体时,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达100.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达92.4%。以茎段为外植体时,最佳诱导愈伤培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达95.8%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达86.5%。不定芽最适宜的生根培养基为MS+1.0 mg/L NAA,生根率达100.0%。采用草炭土+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

野生紫斑百合高效离体再生体系的建立

 采用丽江野生紫斑百合鳞片为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度激素,进行鳞片分化诱导、增殖和生根培养,筛选适宜激素浓度配比。结果表明：鳞片可以通过愈伤诱导发生途径再生,从愈伤组织上直接形成不定芽,最佳愈伤诱导培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,诱导率为45.00%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0mg/L 6BA+0.5mg/L NAA,增殖率为72.58%;最佳生根培养基为1/2MS + 1.5mg/L IBA,生根率达到93.33%。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

香叶天竺葵组培快繁体系的研究

以香叶天竺葵无菌苗叶片为外植体,MS为基本培养基进行组培快繁研究,结果表明:愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系长势良好.     

杜仲愈伤组织诱导和植株再生体系的建立

【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率88.9%;叶片MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率100%;茎段MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为100%。愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,不定芽诱导率为88.9%,增殖系数为3±1;杜仲在1/4MS的基本培养基中生根最好,生根率达80%,激素的存在反而会抑制生根。【结论】杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段均可通过愈伤组织途径诱导不定芽的形成,并诱导生根,建立杜仲愈伤组织再生体系,但不定芽的增殖系数较低。     

太阳扇愈伤组织培养及植株再生体系建立

以太阳扇(Scaevola aemula)嫩叶、老叶、茎段、茎节为材料进行外植体筛选;以太阳扇嫩叶为外植体,研究愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖、生根培养的适宜条件.结果表明:嫩叶为太阳扇愈伤组织诱导最佳外植体;MS+6-BA 0.50mg/L+2,4-D 0.20mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基;MS+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L为芽分化最佳培养基,分化率可达96.5%;1/2MS+NAA 0.01mg/L为芽增殖最佳培养基,增殖系数最高可达3.33;糖浓度、NAA均影响太阳扇无菌苗生根,1/2MS+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L为生根培养最适培养基;g腐殖质∶g珍珠岩∶g细土=2∶1∶1为组培苗移栽最佳基质,移栽成活率达75%.     

香叶天竺葵的离体培养研究

以香叶天竺葵的嫩茎为外植体进行组织培养研究,结果表明:培养基MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L既适合于愈伤组织的诱导,也适合于不定芽的分化增殖;培养基1/2MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.7 mg/L为生根诱导的最佳配方。组培苗的过渡成活率可达到90%以上。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

天门冬组织培养条件的优化

以天门冬(Asparagus cochinchinensis)幼嫩茎段为外植体,考察1 g/L HgCl2灭菌时间对外植体的消毒效果,以及激素浓度组合对外植体愈伤组织、不定芽的诱导和不定芽生根的影响.结果表明,1 g/L HgCl2处理7 min,外植体褐化率和污染率较低;MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的愈伤组织诱导率最高,且生长势最强,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的出芽率最高;1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA培养基中生根率最高,可达76％.     

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

高原野生濒危药材独一味的组培快繁技术研究

[目的]探究独一味组培快繁技术体系,保护并合理利用独一味资源.[方法]选取独一味无菌苗的子叶、嫩芽和幼根为外植体,采用不同类型的培养基和不同种类的植物生长调节剂进行组培快繁研究.[结果]独一味幼叶、嫩芽和幼根均可诱导出愈伤组织,其中幼根的愈伤组织诱导率最高,达93.5％,出愈时间为7d,最适诱导培养基为MS ＋1.0mg/L2,4-D＋ 0.5 mg/L 6-BA＋ 0.5 mg/L NAA;丛生芽诱导的适宜培养基为MS＋ 1.0 mg/L 6-BA＋ 0.5 mg/L NAA,诱导率达88.8％;生根的适宜培养基为1/2 MS＋ 0.5 mg/L NAA,诱导率高达97.9％.[结论]利用组织培养技术能够实现独一味的快速繁殖,为独一味资源的可持续利用提供参考.     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

帝玉露的离体培养及快速繁殖技术研究

[目的]建立帝玉露的叶片离体快繁体系,为帝玉露商业化快速生产、种质资源的保存及新品种的选育提供技术支持。[方法]以多肉植物帝玉露不同成熟度叶片为外植体进行诱导、增殖和生根培养,探究不同激素和Na H2PO4浓度对其愈伤组织诱导、分化及生根移栽的影响。[结果]帝玉露愈伤诱导最佳培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA,诱导率达95.00%;愈伤组织最佳分化培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+40.00 mg/L NaH_2PO_4,分化时间短且分化率最高为96.70%;最佳壮苗生根培养基为1/2MS+0.20 mg/L NAA,移栽成活率为96.00%。[结论]使用成熟叶片作为外植体可以建立帝玉露的快繁体系。     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

紫薇茎段离体培养体系的优化

以矮首领紫薇当年生半木质化带腋芽茎段、硬枝茎段以及叶片为外植体,从消毒时间、启动培养基、增殖培养基和生根培养基选择等方面进行离体培养体系的优化。结果表明,茎段为较好的外植体。最佳消毒时间:带腋芽茎段用0.1%升汞处理8 min,诱导率为66.67%;带水培芽茎段用0.1%升汞处理4 min,诱导率为65.55%;叶片用0.1%升汞处理4 min,诱导率为55.56%。带腋芽茎段最佳启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,诱导率为83.33%。腋芽和水培芽的最佳增殖培养基均为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.30 mg/L。腋芽增殖系数为2.42,芽长为3.2 cm;水培芽增殖系数为3.21,芽长为2.1 cm。腋芽最佳生根基本培养基为1/2MS,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率为96.67%;水培芽最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+活性炭(AC)0.1 g/L,生根率为81.25%。     

墨西哥蒲包花愈伤组织诱导及无性系建立的研究

以具有有利变异性状的墨西哥蒲包花嫩茎为材料,采用组织培养的方法,对愈伤组织的诱导、分化、不定芽生根、试管苗的生根继代增殖培养,以及试管苗的移栽、定植进行了研究。结果表明:MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L是嫩茎愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+AgNO3 1.0 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/3 MS+蔗糖15 g/L+ABT 2.0 mg/L是不定芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基。试管苗移栽成活率为91.2%,定植成活率为96.8%,定植的试管苗保持了墨西哥蒲包花原有的植物学性状和淡黄色花瓣上呈现出橙色斑点的有利变异性状。