猪血红蛋白抗氧化肽的酶法制备及其体外抗氧化活力观察

为建立猪血红蛋白抗氧化活性肽的酶法制备工艺,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和AS1398中性蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白8 h,结果显示：采用AS1398中性蛋白酶获得的产物水解度最高,其酶解过程中第2小时获得的抗氧化活性肽（NDAPⅡ）还原力最高,较猪血红蛋白还原力高31.8%;AS1398中性蛋白酶的酶解条件为底物5%（质量分数）,底物中含酶400U/g,温度45℃,pH 7.0。NDAPⅡ的还原力随浓度的增加基本呈线性增长趋势,虽然在低浓度下其还原力较阳性对照物BHT及VC弱,但在40 mg/mL质量浓度条件下,其还原力已略高于天然抗氧化剂VC,极具作为天然抗氧化剂的潜力。     

啤酒麦糟纤维素酶水解的研究

以经过适当预处理后的啤酒麦槽作原理，采用里氏木霉素产生的纤维素酶进行水解。其纤维素的水解反应可描述为：①前６小时内迅速水解；②６－２４小时内较慢水解；③２４小时后缓慢水解。在水解过程中，存在纤维二糖的积累。     

固态发酵啤酒糟生产饲料蛋白的研究

以啤酒糟为主要原料,采用多菌种固态发酵生产饲料蛋白,对种子的制备和发酵条件进行了研究。实验结果表明,在制备黑曲霉和米曲霉瓷盘曲时,最适培养条件为啤酒糟与麸皮配比为3：7,料层厚度为1．5cm;在制备黑曲霉和米曲霉帘子曲时,最适培养条件为啤酒糟与麸皮配比为6：4,料层厚度为3cm;在发酵生产蛋白质时,最适发酵条件为啤酒糟与麸皮配料比为9：1,料层厚度为20cm,其发酵生产的蛋白质含量可达46．8％。     

酶解啤酒糟工艺及替代豆粕饲喂育肥猪的研究

研究采用水解蛋白酶、复合纤维素酶水解啤酒糟,提取啤酒糟中的蛋白质、降解其中的粗纤维,以利于动物消化和吸收;并进一步用经干燥的酶解啤酒糟替代蛋白饲料饲喂生长育肥猪。从应用酶解啤酒糟的饲料配方的营养水平、饲养肥猪的增重效果、饲料的利用率及经济效益综合分析得出,酶解啤酒糟比原啤酒糟的各种营养成分有所增加,用适量的酶解啤酒糟取代豆粕等蛋白饲料完全可行。结果虽然对提高日增重无显著效果,但就经济效益而言,利用酶解啤酒糟可以降低饲料成本,拓宽蛋白饲料来源,提高养猪的经济效益。     

养殖鱼类对干啤酒糟和发酵啤酒糟饲料的表观消化率

【目的】研究草鱼Ctenopharyngodon idellus、尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus、黄颡鱼Peltobagrus fulvidraco和高体革鯻Scortum barcoo对干啤酒糟和发酵啤酒糟干物质、粗蛋白质、粗脂肪和粗纤维的表观消化率,评价干啤酒糟和发酵啤酒糟对鱼类的营养价值。【方法】以Cr2O3为外源指示剂,以70%基础饲料和30%待测饲料组成试验饲料,饲养试验鱼4周后,用虹吸法收集粪便。【结果】不同鱼种对干啤酒糟和发酵啤酒糟饲料的表观消化率存在极显著差异(P0.001);草鱼和尼罗罗非鱼对干啤酒糟和发酵啤酒糟饲料的表观消化率显著高于黄颡鱼和高体革鯻(P0.05);经发酵处理后,4种试验鱼对发酵啤酒糟饲料中主要营养成分的表观消化率均显著高于对干啤酒糟饲料的表观消化率(P0.05)。【结论】草食性和杂食性鱼类可以较好地利用干啤酒糟,而肉食性鱼类的利用能力较差;发酵处理使鱼类对干啤酒糟的利用能力得到有效改善;发酵啤酒糟可在草食性和杂食物性鱼类中适量应用,但在肉食性鱼类中仍要限制其用量。     

酶法水解螺旋藻蛋白研究

[目的]研究木瓜蛋白酶对螺旋藻蛋白的水解作用。[方法]采用正交试验设计分析温度、酶浓度、pH值、水解时间对水解度的影响,利用葡聚糖凝胶柱Sephadex G-25层析测定螺旋藻多肽分子量。[结果]木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最适宜工艺参数为:温度55℃,酶与底物比0.4%,时间3 h,pH值6.0。[结论]当水解度为82.6%时,2个螺旋藻多肽洗脱峰的分子量分别为2 992和231 Da。     

啤酒麦糟制备蛋白饲料过程中蛋白质的转化

啤酒麦糟经湿磨，稀酸预水解和酶水解后，有３７％的麦糟蛋白溶解在水解糖液中，糖液供培养酵母用，溶解在其中在麦糟蛋白质４０％～５０％能被酵母利用转化成酵母蛋白。产酶用纤维渣中保留了２０％麦糟蛋白，在产酶过程中菌丝体可溶解并利用共中３０％的麦糟蛋白质合成纤维素酶，６３％的麦糟蛋白质留在滤渣，预水解渣，酶解渣和产酶渣中，干燥后与酵母混合制成蛋白饲料。麦糟蛋白质在所选用的工艺条件下，基本不受损失。     

蚕蛹蛋白双酶法水解工艺优化

研究了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件.在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,研究温度、脱脂蚕蛹粉浓度、水解时间、加酶量、酶质量比(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,通过正交试验优化水解工艺条件.结果表明,优化的工艺条件为脱脂蚕蛹粉浓度30 g/L,水解时间6h(其中碱性蛋白酶的水解时间为4.5 h,中性蛋白酶的为1.5 h),加酶量3％,温度55℃,酶质量比3:1,碱性蛋白酶处理时pH9.0、中性蛋白酶处理时pH7.5.在此工艺条件下蚕蛹蛋白水解度可达22.99％.     

酶法提取啤酒糟中水溶性膳食纤维的研究

[目的]采用响应面法优化啤酒糟中水溶性膳食纤维的提取工艺,以期提高啤酒糟的综合利用价值。[方法]采用酶法提取啤酒糟中水溶性膳食纤维。在单因素试验基础上,以温度、纤维素酶量、固液比3个因素为自变量,水溶性膳食纤维得率为响应值,进行响应面分析,确定最佳工艺参数。[结果]啤酒糟中水溶性膳食纤维最佳提取条件:温度为50.8℃、纤维素酶量为6.7%、固液比(g∶m L)为1∶14。当满足最佳提取条件时,验证值为5.16%。根据最佳提取条件进行验证试验,水溶性膳食纤维的实际得率为5.09%,相对误差为1.36%。[结论]酶法提取提高了水溶性膳食纤维得率,且操作简单、可重复性强,适用于啤酒糟中水溶性膳食纤维的提取。     

酶法制备活性肽的讨论

酶解蛋白质产生的短肽混合物中,一些肽段不仅提供营养,而且具有特殊生理功 能,称为活性肽。目前,由于蛋白酶解制备法可实现规模化大生产,活性肽的主要生产方法是酶 法制备活性肽。本文讨论了酶法制备活性肽工艺流程的主要步骤,判定酶解效果的指标,酶的 选用,酶解各种影响因素如温度、酸度、加酶量、底物浓度、水解时间等对应参数的确定。对当前 存在的问题提出了理论上的的解决方法,并对在新的技术背景下,如何更高效率地生产活性肽 进行了展望。     

酶解法制备臭鳜鱼蛋白水解液

该文以水解度为考察指标,采用中性酶对臭鳜鱼肉糜进行了蛋白质水解,然后对影响水解反应的因素如酶的添加量、酶解温度、pH和液固比进行了研究,确定了最佳工艺条件.结果表明,中性酶水解臭鳜鱼蛋白质的最佳条件为液固比(g:mL)为4:1,酶的添加量为3000U/g,pH6.0,水解温度35℃.该条件下酶解时间3h,臭鳜鱼肉蛋白质的水解度为32.9％.     

酶法制备大米活性肽及抗氧化性的研究

以水解液中活性多肽的得率为目标,分别采用5种蛋白酶对大米蛋白进行水解,得出最佳水解酶。水解大米蛋白然后脱盐处理,用铁氰化钾测定了大米多肽的还原能力,并考查了大米多肽对羟基自由基(.OH)、超氧阴离子(O2-.)、二苯代苦味肼酰基自由基(DPPH.)的抑制作用,并同VC做了比较。结果表明:大米蛋白制备活性肽的最佳水解工具酶为枯草杆菌碱性蛋白酶。大米多肽具有还原能力,并对这几种自由基体系具有不同的清除作用。在20.00～50.00 mg/mL时,大米多肽和VC对.OH的清除作用相当;大米多肽对O2-.的清除作用随浓度的增加而增强;在5.00 mg/mL时,大米多肽对DPPH.的清除率达到57.69%,但对O2-.和DPPH.的清除能力均低于VC。     

花生肽的膜分离制备及抗氧化活性研究

热轧花生粕经过双菌种混菌固态发酵,将发酵产物溶解后经过膜分离得到1 ku以下、1～3 ku、3～10 ku、10 ku以上四种分子量范围的发酵滤过液。对四种分子量范围的滤过液分别以不同的浓度进行羟自由基清除、DPPH自由基清除、还原力、铁离子螯合力试验,并以还原型谷胱甘肽作比较,发现3～10 ku分子量范围的滤过液具有最高的抗氧化活性,其次为10 ku以上的滤过液,然后是1～3 ku的滤过液,1 ku以下的滤过液抗氧化活性最低。     

乌贼墨多肽体外抗氧化活性研究

[目的]研究乌贼墨多肽体外抗氧化活性。[方法]采用分光光度法测定多肽对2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑林-6-磺酸）二铵盐（ABTS）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羟自由基（·OH）的清除能力和还原能力,利用琼脂糖凝胶电泳检测多肽对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作甩。[结果]乌贼墨多肽具有明显清除ABTS自由基（半数有效浓度EC。为3．45mg／ml）、·DPPH自由基（EG。为4．34mg／m1）和羟自由基（E‰为3．30mg／ml）的能力;当乌贼墨多肽的浓度达到5．00mg／ml时,还原力达到0．387。[结论]乌贼墨多肽具有较好的抗氧化活性。     

超声波辅助酶解鲭鱼制备抗氧化肽的研究

针对鲭鱼鱼肉蛋白质含量相对较高的特点,利用超声波辅助酶解制备抗氧化肽。以双缩脲法测得多肽含量,以对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基的清除率为指标,探究制备鲭鱼抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明,最佳的酶解制备条件为:中性蛋白酶加酶量3%、酶解温度50℃、底物浓度4%、超声波辅助酶解时间2.5 h,在此条件下,得到的多肽抗氧化能力较强,对DPPH自由基的清除率达到89.33%,采用中性蛋白酶在超声波辅助下酶解鲭鱼蛋白制备抗氧化肽是可行的。     

微波辅助酶解辣木粕清蛋白制备抗氧化肽及工艺优化

【目的】筛选酶解辣木粕清蛋白的最佳蛋白酶,采用微波辅助酶解制备辣木粕抗氧化肽。 【方法】以辣木粕清蛋白水解度作为考察指标,采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、菠萝 蛋白酶以及木瓜蛋白酶进行初筛和复筛,筛选最佳的蛋白酶。通过单因素试验以及响应面试验,筛选最佳酶解 条件,采用微波辅助进一步优化酶解工艺。通过测定 DPPH·清除率、O2-·清除率、ABTS+ ·清除率和还原能 力评价辣木粕清蛋白抗氧化活性。【结果】辣木粕清蛋白为酶解的最佳蛋白质,风味蛋白酶为最佳蛋白酶。通 过单因素试验以及响应面试验得到最优酶解工艺：加酶量 7 491.44 U/g、底物浓度 9.36%、pH 7.50、酶解温度 45 ℃,水解时间 3.88 h,在此酶解条件下,抗氧化肽得率为 19.09%,水解度为 69.80%。采用低功率微波仪器 （0~100 W）进一步将酶解时间缩短到 1 h,同时可提高酶解物的抗氧化活性。检测出辣木粕酶解物具有较好的 抗氧化活性,清除 DPPH·的最佳质量浓度为 10 mg/mL;清除 ABTS+ ·、O2-·的最佳质量浓度为 50 mg/mL;还 原 Fe3+ 的最佳质量浓度为 50 mg/mL,与阳性对照 Vc 相当。【结论】低功率微波能够提高辣木粕清蛋白酶解效 率和抗氧化活性,辣木粕具有制备天然抗氧化肽的潜力。     

鲤鱼鱼鳞蛋白的酶解制备工艺及其抗氧化活性

[目的]确定鲤鱼鱼磷蛋白的酶解制备工艺,并分析所得的鱼磷抗氧化肽的抗氧化性能。[方法]以鲤鱼鱼鳞为原料,选用胰蛋白酶考察其加酶量、反应温度、酶解时间、pH、底物浓度等因素对鱼鳞蛋白水解程度的影响,用单因素及正交试验的方法优选出鱼鳞蛋白酶解的最佳条件并测定其抗氧化活性。[结果]试验得到鲤鱼鱼磷抗氧化肽酶法制备的最佳工艺条件为pH 8.4、酶解温度45℃、加酶量4000 U/g、酶解时间3 h、底物浓度15%,此条件下得到的鱼磷抗氧化肽水解度较佳(29.97%),抗氧化能力较好。[结论]胰蛋白酶有溶解鲤鱼鱼鳞蛋白的能力,并且酶解产物的抗氧化活性与水解度有关。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

芝麻肽的制备及抗氧化活性

为探明芝麻蛋白肽的抗氧化活性,采用Box-Behnken设计响应面试验优化碱性蛋白酶水解芝麻蛋白条件,研究芝麻肽清除DPPH自由基的能力、还原能力以及抑制猪油和冷藏熟肉糜的氧化活性.结果表明,较优水解条件为:底物与酶的质量比为12.24,底物浓度6.91%、水解时间6.82 h,在此条件下水解度为30.2%.芝麻肽具有较强的抗氧化活性和还原能力,0.2 mg/ml 芝麻肽对DPPH自由基的清除率为98.55%;0.8 mg/ml 时,还原能力的吸光度为1.267,并达到稳定.0.02%的芝麻肽能明显抑制猪油的过氧化,144 h时能将其过氧化值从126.6 meq/kg降至43.0 meq/kg;芝麻肽浓度高于0.02%时抑制效果不明显.0.08%的芝麻肽对冷藏熟肉糜氧化的抑制率达到80%.     

海洋生物源抗氧化活性肽的制备和构效关系

海洋生物因其生存环境不同而蕴藏着许多结构独特、功能各异的活性物质。海洋生物活性肽具有多种生物学功能,如抗氧化、抗炎症、抗癌、抗高血压、抗菌等。该研究对海洋生物活性肽抗氧化性的构效关系、检测方法等研究现状进行综述,并且对其应用和研究前景进行展望。