基于蛋白质组学技术分析初乳和常乳摄入对初生犊牛肝脏蛋白表达的影响

【目的】试验旨在对犊牛肝脏蛋白进行蛋白质组学分析,筛选与初乳、常乳摄入相关的蛋白。【方法】以经产荷斯坦母牛分娩的9头公犊牛为研究对象,随机分为初乳组(CI)、常乳组(M)和对照组(CT),每组3头。初乳组和常乳组犊牛分别饲喂初乳和常乳,于出生后24 h屠宰;对照组未饲喂初乳或常乳,于出生后2 h屠宰。采用Label-free蛋白组学技术对3组犊牛肝脏的蛋白表达谱进行分析,以Q<0.05为阈值筛选各组间的差异表达蛋白,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】在犊牛肝脏中共鉴定到3 901个蛋白,其中在初乳组、常乳组和对照组中分别鉴定到3 521、3 646和3 548个蛋白,有3 202个蛋白在3组中共表达。对差异表达蛋白进行分析显示,初乳组和常乳组犊牛肝脏中共筛选出287个差异表达蛋白,主要参与细胞代谢、应激反应、生长发育和氧化还原等生物过程,显著富集通路为内吞作用、氨基酸代谢和氧化磷酸化;初乳组和对照组犊牛肝脏中共筛选出154个差异表达蛋白,主要参与细胞代谢、单组织过程和肌酸合成等生物过程,显著富集通路为氨基酸代谢、黏着斑和内吞作用等。【结论】饲喂初乳的犊牛肝脏中差异表达...     

绵羊初乳和常乳中乳脂肪酸组成的变化研究

利用气相色谱法检测冬季绵羊初乳和常乳中70种C4-C24脂肪酸随时间的变化情况。初乳中单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸和C14-C16直链饱和脂肪酸含量高于常乳,而C4-C12、C18及C15-C17支链饱和脂肪酸含量却低于常乳。绵羊品种对于其乳中脂肪酸分布无影响。产羔后1～2d即初乳形成时,乳中脂肪酸组成发生显著变化。在泌乳第6天,乳中脂肪含量持续升高,而在此之后的第60天内乳脂肪含量上升缓慢。这与推荐大家在绵羊泌乳后6～8d食用羊奶的建议一致。与常乳相比,初乳中棕榈酸和豆蔻酸含量偏高,表明初乳的脂肪酸组成可以满足羔羊生长过程中不断变化的需要。     

水牛初乳和常乳主要组分的动态变化

试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,初乳中乳糖含量随泌乳天数的增加逐渐升高;乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)含量呈下降趋势;初乳中乳脂含量变化不规则,出现小幅波动;蛋白质各组分中乳铁蛋白(LF)、血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白(Igs)含量第1天最高,以后开始下降;酪蛋白(CN)在乳蛋白百分比含量中占优势,随着泌乳天数的增加逐渐升高;β-乳球蛋白(β-LG)第1天含量低,第5 和7天达到最高值;α-乳白蛋白(α-LA)第1天最低,第2天急剧上升,以后变化平稳。常乳中大部分组分含量比较稳定,有时有波动,但各天数之间差异不显著。研究结果显示,水牛乳中大部分组分的含量在初乳中变化较大,初乳的营养价值高于常乳。     

水牛初乳和常乳中五种酶活性的动态变化

对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定.结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05).初乳中AMS活性第1、2、3天差异不显著(P>0.05),第1、2天极显著高于第5、7天...     

妊娠后期饲粮蛋白质水平对母驴初乳与常乳中蛋白质、脂肪和氨基酸含量的影响

本试验旨在研究妊娠后期饲粮蛋白质水平对母驴初乳与常乳中蛋白质、脂肪和氨基酸含量的影响,为母驴饲粮蛋白质的适量供给和驴乳的优化生产提供理论依据.采用二因素完全随机试验设计,因素一为妊娠后期饲粮蛋白质水平,因素二为产后时间.选择24头年龄[(7.15±1.69)岁]、体重[(270.11±63.24)kg]、胎次[(1.6...     

脱脂初乳与常乳在牛冷冻精液中的应用研究

本试验通过在稀释液Ⅰ液中用脱脂初乳或脱脂常乳部分或全部替代柠檬酸钠液,以研究其对牛精液冷冻效果的影响。试验结果表明：当完全以脱脂初乳或脱脂常乳替代柠檬酸钠液后,虽然各试验组与对照组间冻后精子活力差异不显著（Ｐ＞００５）,但精子总存活时间与顶体完整率有显著提高（Ｐ＜００５）,尤以脱脂初乳为最好（Ｐ＜００１）。     

高通量测序技术分析青海藏羊初乳和常乳微生物多样性

为探究藏羊初乳和常乳的微生物组成及多样性,本试验选取体况良好、2～3胎次的藏羊6头,采集初乳（C）和常乳（OM）。基于高通量测序技术对2组乳样的16S rDNA的V4区进行分析,选用PICRUSt进行功能预测。结果显示：97%的一致性共得到3 413个OTUs,微生物Alpha多样性指数在藏羊常乳中高于藏羊初乳（P<0.05）。变形菌门（Proteobacteria）和厚壁菌门（Firmicutes）是2组乳样中丰度最高的2种菌门,藏羊初乳中2种菌门丰富度分别为77.61%和11.66%,常乳中为71.65%和17.43%。在属水平上,2组乳样的优势菌属均为假单胞菌属（Pseudomonas）、丛毛单胞菌属（Comamonas）,且藏羊初乳中假单胞菌属和乳杆菌属（Lactobacillus）丰度高于常乳。16S rDNA基因KEGG水平功能预测,结果发现常乳在遗传信息处理、复制修复和翻译功能上得到显著富集,初乳在氨基酸代谢功能上得到显著富集。表明藏羊初乳和常乳微生物多样性存在显著差异,并发现常乳在遗传信息处理、复制修复和翻译功能上得到显著富集,初乳在氨基酸代谢功能上得到显著富集。     

麦洼牦牛初乳和常乳中超氧化物歧化酶活力的研究

研究了麦洼牦牛脱脂乳中超氧化物歧化酶 (SOD)的活力。结果显示 :牦牛初乳 (泌乳第 1～ 7天 )中SOD活力(Nu/mL)分别为 31 4 6 3± 39 5 1、35 5 73± 39 1、36 4 4 9±2 2 1 7、32 4 73± 30 6、31 3 96± 1 8 0 0、31 6 6 5± 1 9 5 1、31 7 5 2± 1 0 6 8,常乳中的活力为 2 92 4 9± 6 96Nu/mL。与常乳相比 ,泌乳第 3天的初乳中SOD活力显著高于常乳 ,其余各天差异不显著。半奶牦牛和犏牛乳中SOD活力分别为 1 89 75± 1 1 71和 1 2 5 6 5± 2 2 9,均极显著低于常乳     

牛初乳与牛常乳中游离氨基酸和不溶性蛋白质氨基酸对比研究

牛乳是生产婴幼儿配方乳粉时首要选择的原料乳,氨基酸是构成牛乳蛋白质的结构单位,按照分布区域的不同,分为游离氨基酸和不溶性蛋白质氨基酸两类。以产后0～7 d的牛初乳和15 d～6 个月的牛常乳为原料,对牛乳中不同结构域的氨基酸种类及含量进行对比分析。结果表明：9 种游离必需氨基酸在牛初乳和牛常乳中均被检测到,分别有8 种和7 种游离非必需氨基酸在牛初乳和牛常乳中被检测到,其中,牛初乳中8 种必需氨基酸、4 种非必需氨基酸含量均显著高于牛常乳（P＜0.05）;在不溶性蛋白质氨基酸中,牛初乳和牛常乳中均含有8 种必需氨基酸和10 种非必需氨基酸,其中,牛初乳中苏氨酸、精氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、丙氨酸含量显著高于牛常乳（P＜0.05）,而牛常乳中赖氨酸含量显著高于牛初乳（P＜0.05）。     

澳洲白绵羊和黑杜泊羊与湖羊杂交试验初探

本文利用澳洲白绵羊和黑杜泊羊与湖羊开展杂交试验,对其生长发育和繁殖性能进行观测,筛选适合临夏地区肉羊最佳杂交组合,促进临夏肉羊生产提质增效,加快推进肉羊产业高产、优质、高效健康发展。实验结果表明:产羔率湖羊>黑杜湖F1>澳湖F1,繁殖成活率澳湖F1>黑杜湖F1>湖羊;羔羊初生重三个组合之间差异均不显著(t<0.05),三月龄六月龄重澳湖F1与湖羊、黑杜湖F1与湖羊差异极显著(t>0.01);杂交羔羊出生时体高、体长均不显著(t<0.05),黑杜湖F1与澳湖F1两个杂交组合的胸围与湖羊之间差异极显著(t>0.01);三月龄两个杂交组合管围与湖羊之间差异极显著(t>0.01);六月龄体高黑杜湖F1与湖羊差异不显著(t<0.05),澳湖F1与湖羊差异显著(t>0.05),体长三个组合之间差异均不显著(t>0.05),胸围和管围澳湖F1与黑杜湖F1两个杂交组合与湖羊之间差异均为显著(t>0.05)。     

牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成及功能的对比研究

利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)将牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成部分进行分离鉴定,发现牛初乳与牛常乳中乳脂肪球膜蛋白质的组成存在较大的差异,且在牛初乳中鉴定出628种乳脂肪球膜蛋白质,牛常乳中鉴定出487种乳脂肪球膜蛋白质.由基因本体(gene ontology,GO)功能注释分析发现,在生物过程中生物调控作用是牛初乳和牛常乳中乳脂肪球膜的主要生物过程.在分子功能上,牛初乳的乳脂肪球膜蛋白质的绑定作用大于牛常乳.在细胞组成上,牛初乳乳脂肪球膜蛋白质参与细胞外区域远远大于牛常乳.通过京都基因与基因组百科全书系统(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路分析可知,牛初乳和牛常乳乳脂肪球膜蛋白质参与的代谢途径不同,表明牛初乳在日后的生产加工中更具有利用价值.     

东佛里生、湖羊及其杂交后代部分产肉性能对比分析研究

为了证明引入东佛里生羊发展肉乳兼用型羊产业的可行性,本研究开展了东佛里生羊、湖羊、东湖杂交F₁代、东湖杂交F₂代的初生、2月龄、4月龄、6月龄体重数据和6月龄胴体重数据测定,以及体重、日增重、屠宰率数据的对比分析。结果表明:随着东佛里生羊血统占比提高,羔羊体重呈现增加趋势;4月龄和6月龄各组合羔羊体重都呈现显著性差异;东湖F₁、F₂代羔羊哺乳期和育肥期日增重显著高于湖羊。因此,生产中可以利用东佛里生羊对湖羊开展导血改良,提高羔羊体重,增加养殖效益。     

桑椹与叶片蛋白质双向电泳样品制备方法的比较试验

为建立适合于桑树蛋白质组研究的双向电泳技术体系,以桑品种"大10"的桑椹与叶片为材料,探讨了桑树蛋白质不同提取方法对凝胶电泳效果的影响。结果表明,改良酚提取法与常规的SDS提取法、尿素/硫脲提取法相比,电泳图谱清晰,分离效果良好,能检测到更多的蛋白质组分,适用于桑椹与叶片蛋白质IPG-IEF/SDS-PAGE双向电泳及SDS-PAGE电泳的样品制备。     

Study on Skin Differential Expression Proteins of Tan Sheep Within One Year Old

In order to study different expressed proteins of one-year-old Tan sheep skin, two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) was used to separate the Tan sheep skin proteins of different growth stages by Coomassie blue staining, with PDQuest 8.0 software to detect and analyze differences in protein spots,and were identified by MALDITOF/TOF-MS/MS.Protein maps of four growth stages were performed between pairwise, after testing found a total of 19 differentially expressed proteins, mass spectrometry successfully identified 15 protein spots and a total of 13 proteins, of which 14-3-3 σ protein isoforms, annexin A2, keratin 25 and tubulin α chain might be related to growth regulation sheep skin. Those different expressed proteins might be associated with different stages of growth of Tan sheep skin follicles cyclical changes. The different proteins of one-year-old Tan sheep skin provided theoretical basis for annual variation of Tan sheep skin.     

一周岁内滩羊皮肤差异表达蛋白研究

为研究一周岁内滩羊皮肤中的差异表达蛋白,本试验利用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离了滩羊不同生长阶段皮肤蛋白,经考马斯亮蓝染色,用PDQuest 8.0软件检测并分析差异蛋白点,并经MALDITOF/TOF-MS/MS鉴定。对4个生长时期的蛋白图谱进行两两比对,共发现了19个差异蛋白点,质谱成功鉴定出15个蛋白点共13种蛋白,可能与滩羊皮肤生长调控有关的蛋白有14-3-3蛋白σ亚型（14-3-3 protein sigma）、膜联蛋白A2（annexin A2）、角蛋白25（keratin 25）、微管蛋白α链（tubulin alpha chain）。对差异表达蛋白进行分析,发现这些差异表达蛋白可能与滩羊皮肤不同生长阶段的毛囊周期性变化有关。一周岁内滩羊皮肤差异蛋白的发现为滩羊皮肤的年变化规律研究奠定理论基础。     

Identification of Hu Sheep Family Based on Microsatellite Markers

The purpose of this study was to explore identification and division methods of Hu sheep family based on simple sequence repeats(SSR) polymorphism.Nine SSR loci of BM3051,HH64,TGLA137,MAF33,FCB48,VH72,INRA023,ETH152 and MCM527 were selected,which were distributed in several autosomes,with high polymorphism and high heterozygosity.DNA was extracted from the blood samples of 30 Hu breeding rams by blood DNA extraction kit.SSR primers were synthesized and labeled with the fluorescent group.The products were amplified by touch-down PCR.After genotyping,CERVUS3.0.7 was used for genotyping analysis.POPGENE1.32 was used to construct a dendrogram based on Nei's genetic distance to divide Hu sheep families.The results showed that the cumulative exclusion probability of single parent was 99.2094% when the genotypes of both parents were unknown,99.9688% when a single parent genotypes were known,99.9999% when both parents' genotypes were unknown.Exclusion probability could meet the requirements of paternity identification and pedigree analysis in genetic breeding.UPGMA clustering map was constructed according to Nei's genetic distance,and 30 breeding rams were divided into six families,which provided a reference for sheep breeding.The method could run the family identification and division of Hu sheep,which had application value for the breeding of Hu sheep.     

基于微卫星标记鉴定湖羊家系

试验旨在基于微卫星（simple sequence repeats,SSR）多态性探索一种鉴定与划分湖羊家系的方法,通过查阅文献筛选出9个分布于多个常染色体、具有高多态性信息、高杂合度的湖羊微卫星位点BM3051、HH64、TGLA137、MAF33、FCB48、VH72、INRA023、ETH152和MCM527。采集30只湖羊种公羊血液,使用试剂盒提取血液基因组DNA,合成筛选出的9个微卫星引物并使用荧光基团标记,利用降落式PCR进行扩增,扩增产物在基因分型后使用CERVUS3.0.7进行基因型分析,使用POPGENE1.32基于Nei氏遗传距离构建树状聚类图,根据图示的亲缘关系远近划分湖羊家系。结果显示,当双亲基因型未知时,9个微卫星位点的单亲累积排除概率为99.2094%;当单亲基因型已知时,9个微卫星位点的累积排除概率为99.9688%;当双亲基因型未知时9个微卫星位点的双亲累积排除概率为99.9999%,排除概率能够满足遗传育种中亲子鉴定和系谱分析的要求。根据Nei氏遗传距离构建UPGMA聚类图,将30只种公羊划分为6个家系,为育种工作提供了一定参考。本方法能够进行湖羊家系的鉴定与划分,对湖羊育种工作具有一定的应用价值。