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阳离子脂质体的制备及其与禽流感病毒HA基因作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用超声波法制备了DC-chol阳离子脂质体,研究了阳离子脂质体与禽流感病毒保护性抗原血凝素基因重组质粒pSVH7复合物的特性。电子显微镜观察表明,阳离子脂质体与pSVH7形成复合物后,脂质体发生聚集,膜融合,脂质体直径变大,并出现了多层结构脂质体;通过检测脂质体在248nm处的吸光度变化,研究了脂质体与pSVH7质粒复合物形成及膜融合的动力学过程,脂质体DNA复合物是在最初1-15min内形成的, 相似文献
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阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究 总被引:1,自引:0,他引:1
阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。 相似文献
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禽流感HA基因疫苗脂质体的制备及其理化性质 总被引:17,自引:1,他引:16
用改良的逆相蒸发法制备了H7亚型禽流感保护性抗原血凝素(HA)基因重组质粒pSVH7脂质体。电镜观察表明,该脂质体多呈球形的单层或多层结构,脂质体粒径分布均匀,粒径范围20~700nm,平均粒径163nm,主要粒径分布位于50~200nm(84.80%)。重组质粒DNA在脂质体的制备过程中保持了稳定性,并能抵抗DNA酶的水解破坏作用。吸收光谱表明,在248nm及268nm处脂质体有2个特征吸收峰,DNA的存在不改变吸收峰的位置,但能增加吸收峰的强度。 相似文献
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脂质体是由脂质双分子层组成的囊状栽体,阳离子脂质体介导的基因转染因其转染效率高,操作简单而倍受人们重视,本文就脂质体介导转染法原理及其主要方面的应用进展作一概述。 相似文献
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疫苗佐剂的研究现状和发展趋势 总被引:1,自引:0,他引:1
疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质.佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应,提高机体保护能力,同时又能减少免疫物质的用量,降低疫苗的生产成本.长期以来,传统疫苗(多为菌体或其裂解物)由于其免疫原性强,佐剂的研究和使用只局限于较小的范围,如毒素和类毒素. 相似文献
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吡喹酮脂质体的试制及检测 总被引:4,自引:1,他引:3
以氢化豆磷脂和胆固醇为膜材,采用逆相薄膜蒸发法制备了吡喹酮脂质体(PZQ-Lip),经电镜和光镜检测显示,PZQ-Lip粒径大部分为2~4 μm,并以大单层脂质体为主.3批PZQ-Lip的平均包封率为(71.82±2.2)%,平均含药量为(8.95±0.2)%.建立的反相高效液相色谱检测PZQ的方法简便、准确,绝对平均回收率按照低、中、高3个浓度水平依次为99.7%(RSD=1.4%,n=5)、99.8%(RSD=1.7%,n=5)和99.5%(RSD=1.8%,n=5). 相似文献
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在建立吡喹酮含量测定方法的基础上,通过葡聚糖凝胶柱色谱法、显微镜法、激光散射法等定性及定量方法考察脂质体的包封率、微粒外观、粒径及其分布等指标。首先单因素对脂质体制备方法、表面活性剂种类进行筛选,确定影响制备脂质体的主要因素,然后通过优化手段筛选最佳处方及工艺,并制备PEG表面修饰吡喹酮脂质体。优化后的脂质体其包封率在72%以上,体积粒径范围200 nm~300 nm,电镜结果显示,脂质体外观圆整而均匀。结果表明,按本处方制得的吡喹酮长循环脂质体包封率高,制备工艺简单,重现性好。 相似文献
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阿米卡星脂质体的研制及体外抑菌试验 总被引:6,自引:3,他引:3
为研究阿米卡星脂质体的体外抑菌效果 ,采用逆相蒸发法制备阿米卡星脂质体 ,利用Hantzsh反应测定其包封率 ,并比较阿米卡星脂质体和游离阿米卡星对大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌、金葡菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果表明 :阿米卡星脂质体的包封率较高 ,达到6 1 .8%,阿米卡星脂质体对大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌、金葡菌的最低抑菌浓度分别约为游离阿米卡星的 1/3.5,1/7,1 /2 ,1/2 ,最低杀菌浓度分别约为游离阿米卡星的 1/4,1 /4,1/1 .8,1 /4,证明阿米卡星脂质体的体外抗菌作用明显优于游离阿米卡星 相似文献
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制备了吡喹酮脂质体冻干剂,并对其质量进行评估。采用薄膜-超声法制备吡喹酮脂质体,结合冷冻干燥技术制备吡喹酮脂质体冻干剂,建立HPLC法测定吡喹酮脂质体的包封率,并研究其稳定性。优化后的脂质体冻干剂包封率在70%以上,粒径范围220~310nm,电镜结果显示,脂质体外观圆整而且均匀。本法制备的吡喹酮脂质体冻干剂质量稳定,且建立的包封率测定方法稳定可靠。 相似文献
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禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将制备的禽传染性支气管炎脂质体/DNA疫苗和壳聚糖/DNA疫苗,分别以肌肉注射(i.m)和滴鼻、点眼(i.n)两种途径免疫健康雏鸡,以裸DNA疫苗为对照,采用流式细胞仪(FACS)及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测,并于免疫后35d进行攻毒,结果显示:(1)CD4^+T淋巴细胞数,所有试验组在免疫后1~3周左右均高于对照组(P〈0.01或P〈0.05),各试验组间,脂质体/DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖/DNA疫苗,但仅在第15天差异显著(P〈0.05),而滴鼻、点眼途径则相反;(2)所有试验组CD8^+T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著(P〈0.05),各试验组间无显著差异;(3)所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著;攻毒后脂质体/DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡,其他试验组有4%或8%死亡率,均显著低于对照组(12%)。由此可见,脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体,且脂质体/DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖/DNA疫苗。 相似文献
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磷酸泰乐菌素脂质体的制备及体外释放动力学研究 总被引:2,自引:2,他引:0
为延长磷酸泰乐菌素在体内的作用时间,通过比较采用硫酸铵梯度法制备其脂质体制剂。以包封率为指标,分别考察磷脂与胆固醇之比、药脂比、硫酸铵浓度、孵化温度和孵化时间对包封率的影响,并在此基础上进行正交试验筛选最优处方。同时,对所得脂质体的形态、粒径及分布、包封率及体外释放动力学进行研究。结果显示,正交试验优化得到的最佳处方工艺如下,磷脂与胆固醇质量比为4∶1,药脂比为1∶10,硫酸铵浓度为300 mmol/L,体系pH值为7.0,孵化温度为50℃,孵化时间为20 m in。电镜下观察脂质体呈球形或类球形,分布均匀,平均粒径为6.526μm,且大部分在1μm~12μm之间,包封率为58.32%,体外释药符合W eibull方程(r=0.976 4)。研究证实硫酸铵梯度法制备磷酸泰乐菌素脂质体方法可行,包封率高,稳定性好,体外释药具有一定的缓释效应。 相似文献