阳离子脂质体的制备及其与禽流感病毒HA基因作用的研究

用超声波法制备了ＤＣ－ｃｈｏｌ阳离子脂质体,研究了阳离子脂质体与禽流感病毒保护性抗原血凝素基因重组质粒ｐＳＶＨ７复合物的特性。电子显微镜观察表明,阳离子脂质体与ｐＳＶＨ７形成复合物后,脂质体发生聚集,膜融合,脂质体直径变大,并出现了多层结构脂质体;通过检测脂质体在２４８ｎｍ处的吸光度变化,研究了脂质体与ｐＳＶＨ７质粒复合物形成及膜融合的动力学过程,脂质体ＤＮＡ复合物是在最初１－１５ｍｉｎ内形成的,     

脂质体佐剂在基因疫苗中的应用

作者论述了脂质体佐剂介导的基因转染机制,脂质体佐剂在基因疫苗中的应用,并对其在基因疫苗中的应用前景进行了展望。     

阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究

阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。     

禽流感HA基因疫苗脂质体的制备及其理化性质

用改良的逆相蒸发法制备了Ｈ７亚型禽流感保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７脂质体。电镜观察表明,该脂质体多呈球形的单层或多层结构,脂质体粒径分布均匀,粒径范围２０～７００ｎｍ,平均粒径１６３ｎｍ,主要粒径分布位于５０～２００ｎｍ（８４．８０％）。重组质粒ＤＮＡ在脂质体的制备过程中保持了稳定性,并能抵抗ＤＮＡ酶的水解破坏作用。吸收光谱表明,在２４８ｎｍ及２６８ｎｍ处脂质体有２个特征吸收峰,ＤＮＡ的存在不改变吸收峰的位置,但能增加吸收峰的强度。     

兽用疫苗佐剂的研究及应用现状

佐剂在制苗工艺中是非常重要的一环,能够得到广泛的应用并不断有新型佐剂在研发面世,主要是因为佐剂在疫苗的功效方面发挥了不可替代的作用。目前在兽医领域应用的佐剂主要包括不溶性盐类佐剂、油乳佐剂、天然来源佐剂(主要指蜂胶     

脂质体介导转染法原理及其研究近展

脂质体是由脂质双分子层组成的囊状栽体,阳离子脂质体介导的基因转染因其转染效率高,操作简单而倍受人们重视,本文就脂质体介导转染法原理及其主要方面的应用进展作一概述。     

金属阳离子影响卵磷脂-胆固醇脂质体结构稳定性的形态学分析

以胆固醇和卵磷脂二元脂质体为研究模型,采用原子力显微镜显微技术,结合基本的热力学、静电力学与胶体科学原理,从微观成像的结果追溯和推测更微观层面上的作用机制,对金属阳离子对脂质体结构稳定性形态学特征进行了初步分析。研究发现,胆固醇的含量对脂膜的流动性和稳定性有着明显的影响,而金属阳离子可与磷脂分子极性头基发生作用,从而影响到脂质体的组装能力以及脂质体胶体系统的热力学稳定性。     

植物来源角鲨烯的制备方法和发展前景

角鲨烯作为一种天然的抗氧化剂,是人体必不可少的类固醇物质,具有改善人体抗氧化生理功能,同时也是医疗保健相关产品的重要来源.从以往的资料中可以得知角鲨烯主要来源于深海鲨鱼,采用减压蒸馏鱼肝油的方法提取角鲨烯,角鲨烯含量可达到50％以上.但由于人们对动物的保护意识增强,许多研究人员都逐渐将目光转向植物资源,并且目前关于提取...     

VC新剂型——脂质体的制备及性质初探

通过对薄膜法、改良冰冻熔融法、复乳法分别制备脂质体，其中以薄膜法和改良冰冻熔融法对VC的包裹效果为佳，其包封率达17．2％和12．8％；本文还研究了影响脂质体包封率的一些因素，如各原料的比例，超声处理的时间等，并对脂质体的稳定性也作了一些探讨。     

疫苗佐剂的研究现状和发展趋势

疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质.佐剂能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应,提高机体保护能力,同时又能减少免疫物质的用量,降低疫苗的生产成本.长期以来,传统疫苗(多为菌体或其裂解物)由于其免疫原性强,佐剂的研究和使用只局限于较小的范围,如毒素和类毒素.     

脂质体作为疫苗免疫佐剂的应用研究进展

脂质体作为一种新型疫苗佐剂可同时增强机体的体液和细胞介导免疫应答,对疫苗有很强的增效作用。通过分析脂质体的作用机理,概述脂质体作为疫苗免疫佐剂的一些优点以及目前在抗细菌、抗病毒、抗寄生虫以及抗肿瘤疫苗等方面的应用情况,列举出存在的问题并提出改进的方法,展现出脂质体未来良好的应用前景。     

吡喹酮脂质体的试制及检测

以氢化豆磷脂和胆固醇为膜材,采用逆相薄膜蒸发法制备了吡喹酮脂质体(PZQ-Lip),经电镜和光镜检测显示,PZQ-Lip粒径大部分为2～4 μm,并以大单层脂质体为主.3批PZQ-Lip的平均包封率为(71.82±2.2)%,平均含药量为(8.95±0.2)%.建立的反相高效液相色谱检测PZQ的方法简便、准确,绝对平均回收率按照低、中、高3个浓度水平依次为99.7%(RSD=1.4%,n=5)、99.8%(RSD=1.7%,n=5)和99.5%(RSD=1.8%,n=5).     

吡喹酮长循环脂质体的研制及质量评价

在建立吡喹酮含量测定方法的基础上,通过葡聚糖凝胶柱色谱法、显微镜法、激光散射法等定性及定量方法考察脂质体的包封率、微粒外观、粒径及其分布等指标。首先单因素对脂质体制备方法、表面活性剂种类进行筛选,确定影响制备脂质体的主要因素,然后通过优化手段筛选最佳处方及工艺,并制备PEG表面修饰吡喹酮脂质体。优化后的脂质体其包封率在72%以上,体积粒径范围200 nm~300 nm,电镜结果显示,脂质体外观圆整而均匀。结果表明,按本处方制得的吡喹酮长循环脂质体包封率高,制备工艺简单,重现性好。     

阿米卡星脂质体的研制及体外抑菌试验

为研究阿米卡星脂质体的体外抑菌效果 ,采用逆相蒸发法制备阿米卡星脂质体 ,利用Hantzsh反应测定其包封率 ,并比较阿米卡星脂质体和游离阿米卡星对大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌、金葡菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果表明 :阿米卡星脂质体的包封率较高 ,达到6 1 .8%,阿米卡星脂质体对大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌、金葡菌的最低抑菌浓度分别约为游离阿米卡星的 1/3.5,1/7,1 /2 ,1/2 ,最低杀菌浓度分别约为游离阿米卡星的 1/4,1 /4,1/1 .8,1 /4,证明阿米卡星脂质体的体外抗菌作用明显优于游离阿米卡星     

吡喹酮脂质体冻干剂的制备及质量评估

制备了吡喹酮脂质体冻干剂,并对其质量进行评估。采用薄膜-超声法制备吡喹酮脂质体,结合冷冻干燥技术制备吡喹酮脂质体冻干剂,建立HPLC法测定吡喹酮脂质体的包封率,并研究其稳定性。优化后的脂质体冻干剂包封率在70％以上,粒径范围220～310nm,电镜结果显示,脂质体外观圆整而且均匀。本法制备的吡喹酮脂质体冻干剂质量稳定,且建立的包封率测定方法稳定可靠。     

禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究

将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。     

磷酸泰乐菌素脂质体的制备及体外释放动力学研究

为延长磷酸泰乐菌素在体内的作用时间,通过比较采用硫酸铵梯度法制备其脂质体制剂。以包封率为指标,分别考察磷脂与胆固醇之比、药脂比、硫酸铵浓度、孵化温度和孵化时间对包封率的影响,并在此基础上进行正交试验筛选最优处方。同时,对所得脂质体的形态、粒径及分布、包封率及体外释放动力学进行研究。结果显示,正交试验优化得到的最佳处方工艺如下,磷脂与胆固醇质量比为4∶1,药脂比为1∶10,硫酸铵浓度为300 mmol/L,体系pH值为7.0,孵化温度为50℃,孵化时间为20 m in。电镜下观察脂质体呈球形或类球形,分布均匀,平均粒径为6.526μm,且大部分在1μm~12μm之间,包封率为58.32%,体外释药符合W eibull方程(r=0.976 4)。研究证实硫酸铵梯度法制备磷酸泰乐菌素脂质体方法可行,包封率高,稳定性好,体外释药具有一定的缓释效应。