棉铃虫(Helicoverpa amigera Hübner)滞育蛹和非滞育蛹血淋巴某些生化特性的比较研究

试验研究了棉铃虫滞育蛹与非滞育蛹血淋巴在甘油、氨基酸、脂肪酸以及蜕皮激素含量上的不同。结果表明：1）滞育蛹血淋巴17种游离氨基酸的总量比非滞育蛹增加,其中脯氨酸、天冬氨酸、精氨酸、赖氨酸的含量明显高于非滞育蛹,已解除滞育的蛹血淋巴中氨基酸的组成与非滞育蛹仍有所不同,其中丝氨酸、苯丙氨酸、组氨酸的比例明显增加。2）滞育蛹和非滞育蛹血淋巴总脂中的饱和脂肪酸均以棕榈酸为高。不饱和脂肪酸中均以亚油酸含量为高,且滞育蛹的饱和脂肪酸比例高于非滞育蛹。3）血淋巴中甘油的含量两者无显著差异。4）滞育蛹在滞育期血淋巴中20－羟基脱皮酮滴度一直维持在极低水平。当滞育开始解除时,20－羟基脱皮酮的滴度明显上升。     

烟夜蛾滞育蛹和非滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及图谱初步研究

利用考马斯亮蓝法和SDS - PAGE电泳法测定并分析了烟夜蛾滞育蛹和非滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及其组成.结果表明,非滞育蛹在化蛹后至羽化前可溶性蛋白呈现出“降低—升高—降低”的变化趋势,在5日龄时含量最高,而滞育蛹呈现出持续降低的变化趋势;除2日龄雌蛹外,其他日龄滞育与非滞育蛹的雌、雄个体间蛋白质含量均存在显著差异.蛋白质SDS - PAGE电泳图谱表明,滞育蛹与非滞育蛹血淋巴的蛋白组成存在明显差异.推测滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及组成的变化与其抗寒性有关.     

棉铃虫滞育蛹的抗寒力

通过观察棉虫滞育蛹在低温０℃和５℃下的死亡率，比较其不同发育时期的抗寒力差异，结果表明，滞育蛹在眼点移动抗寒力较强，在眼点开始移动后抗寒力明显下降。     

烟夜蛾滞育蛹和非滞育蛹氨基酸含量的比较研究

利用高效液相色谱仪分析了烟夜蛾预蛹及化蛹初期的滞育蛹和非滞育蛹体内和血淋巴中的游离氨基酸种类及含量.结果表明,在化蛹初期(化蛹9 d内),滞育蛹血淋巴中氨基酸总量逐渐增加,而正常发育的非滞育蛹血淋巴氨基酸总量逐渐减少;精氡酸、脯氨酸、赖氨酸、缬氨酸等在滞育诱导的预蛹及滞育蛹血淋巴中含量丰富,且均表现出随滞育时间延长而增加的趋势,因此推测这些氨基酸可能与滞育蛹的抗寒性有关.经滞育诱导的蛹体内氨基酸总量在化蛹初期缓慢增加,正常发育的蛹在化蛹后氨基酸总量迅速下降,羽化前又急剧增加.     

棉铃虫蛹滞育的研究

观察了棉铃虫滞育蛹和非滞育蛹的主要形态特征;测定了滞育蛹和非滞育蛹不同时期海藻糖浓度;测定了滞育蛹的过冷却点和冻结温度。结果表明：滞育蛹在整个滞育期保持着蛹化初期的形态特征;滞育蛹的血糖浓度在滞育期间呈上升趋势,且明显高于非滞育蛹;滞育雌、雄蛹的过冷却点分别为－１０．１℃和－１１．５℃,冻结温度均为－５．３℃。     

棉铃虫蛹在滞育中脂肪、糖原等生化成分含量变化的研究

本文通过乙醚提取法、蒽酮法、Ｆｏｌｉｎ－ｐｈｅｎａｌ法和紫外吸收法分别测定了棉铃虫滞育越冬蛹在滞育期中脂肪、糖原、蛋白质、ＲＮＡ和ＤＮＡ含量的变化。研究结果表明，蛹在进入滞育后至解除滞育的过程中，其含水量、蛋白质、ＲＮＡ和ＤＮＡ的含量都逐渐有所增加；脂肪和糖原的含量明显减少，二者是滞育期间的主要代谢化合物。研究为分析棉蛉虫蛹的耐寒性和越冬死亡率提供了理论依据。     

烟实夜蛾滞育蛹和非滞育蛹生化特性的比较研究

测定了烟实夜蛾滞育蛹和非滞育蛹甘油、血淋巴蛋白、糖原、脂肪等含量的变化.结果表明,在预蛹阶段,滞育蛹和非滞育蛹的甘油含量差异不显著,3日龄和5日龄的滞育蛹甘油含量显著高于非滞育蛹;滞育蛹血淋巴蛋白含量略高于非滞育蛹,但两者之间的差异不显著;滞育预蛹的糖原显著高于非滞育预蛹,但发育至3日龄时急剧下降,发育至5日龄时糖原含量仍保持在3日龄的水平,非滞育个体的糖原含量从预蛹发育到3日龄蛹时基本保持在一个水平,而发育至5日龄时,糖原含量急剧下降;滞育蛹脂肪含量高于非滞育蛹,二者在预蛹期的差异达显著水平.     

温度和光周期对柞蚕滞育蛹和非滞育蛹呼吸强度的影响

在室温、恒温及不同光周期条件下测定了柞蚕滞育蛹与非滞育蛹的呼吸速率，结果表明，滞育起始时，呼吸速率急剧下降；而终止时则显著升高。室温下，蛹体于化蛹后第３０ｄ进入滞育；化蛹后约２个月滞育终止。     

棉铃虫幼虫血淋巴免疫因子溶血素的理化特性研究

为深入研究棉铃虫幼虫血淋巴免疫因子溶血素的分子结构和生理功能,明确其分离、纯化的理化条件,采用分光光度法分别研究了温度、浓度、作用时间、pH、EDTA和金属离子对该溶血素的溶血活性影响及其糖结合特性。结果表明,棉铃虫幼虫血淋巴溶血素属热不稳定型。溶血素反应浓度与溶血活性并不成正比,8倍稀释液的溶血活性反高于4倍稀释液。反应2 h后,血淋巴溶血素对鸡血红细胞溶解速度急剧加快,6 h溶血效能达最大。血淋巴溶血活性的最适pH 7.0～8.0。62.5～500 mmol·L~(-1)EDTA对血淋巴溶血活性具有促进作用,而Ca~(2+)却具有极显著的抑制作用。糖抑制试验结果表明,供试的8种糖(糖苷)和唾液酸均未对血淋巴溶血活性产生抑制作用。     

昆虫激素对家蚕血淋巴和体壁酚氧化酶活性及其基因表达水平的影响

[目的]研究外源昆虫激素对家蚕酚氧化酶活性及其基因表达水平的影响,明确昆虫激素对酚氧化酶的调控作用,为深入解析家蚕酚氧化酶的功能及基因表达调控机制提供参考依据.[方法]对五龄第3d发育良好的家蚕幼虫注射蜕皮激素20E和保幼激素JH,以注射等量0.1%二甲基亚砜(DMSO)为对照,分别在注射3、6、12和24 h后解剖家蚕幼虫采集血淋巴和体壁,检测分析家蚕酚氧化酶活性及其基因表达的变化情况.[结果]注射外源JH和20E均能促进家蚕血淋巴酚氧化酶原基因PPO1和PPO2的表达,有效增加酚氧化酶活性.家蚕血淋巴PPO1和PPO2基因对JH和20E的响应时间存在一定差异,其中,经JH处理后2个酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)仅在处理6和12 h时显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调表达;而经20E处理后PPO1和PPO2基因从3 h开始一直持续到12 h均呈上调表达趋势.JH和20E对家蚕体壁PPO1和PPO2基因的影响恰好相反,具体表现为:JH能有效抑制家蚕体壁PPO1和PPO2基因的表达,降低酚氧化酶活性;20E则促进家蚕体壁PPO1基因上调表达,但不影响PPO2基因表达.[结论]家蚕酚氧化酶原基因PPO1和PPO2表达受JH和20E的调控,且激素对酚氧化酶原基因表达水平的影响与其酶活性变化规律一致,提示酚氧化酶不仅参与昆虫激素的代谢,还与激素协同调控家蚕的蜕皮变态.     

抗菌肽及柞蚕蛹血淋巴粗提液对蔬菜病原细菌的抑制效果

通过人工合成的抗菌肽D基因转化酵母表达产物和自然诱导的柞蚕蛹血淋巴粗提液对枯草杆菌等几种细菌及蔬菜黑腐病菌，软腐病菌抑制作用的试验，结果表明人工合成的抗菌肽D基因转化酵母表达产物对敏感菌大肠杆菌Escherichia coliK12D31及枯草杆菌Bacillus subtilis等多种细菌有较好的抑制效果。自然诱导的柞蚕蛹血淋巴粗提液对敏感菌E.coliK12D31有明显抑制效果，说明经诱导的血淋巴含有抗菌肽，但其对蔬菜病原菌抑制效果较差，其中对黑腐病菌有一定抗性，对软腐病菌没有观察到抗性。     

转Bt基因棉和寄生蜂双重作用对棉铃虫生理的影响

研究了转Bt基因棉和斑痣悬茧蜂双重作用对棉铃虫生理的影响,分析比较取食转基因棉和常规棉后,寄生蜂后代的生长发育情况。结果表明,无论取食时间长短,寄生蜂幼虫发育时间都显著延长,茧质量没有显著差异;取食2 d,寄生蜂的茧期显著延长。棉铃虫幼虫血淋巴总蛋白含量和黑化反应表明,取食转基因棉后,棉铃虫血淋巴总蛋白浓度低于取食常规棉的,推测寄主血淋巴蛋白含量降低是导致寄生蜂生长缓慢的一个重要原因。取食转基因棉1 d后棉铃虫幼虫血淋巴的黑化时间显著长于取食常规棉的,2、3 d后,无论取食转基因棉还是常规棉,幼虫的血淋巴都没有黑化现象。     

中华绒螯蟹蜕皮过程中血淋巴主要生化成分的变化

利用生物化学及原子吸收方法测定了中华绒螯蟹蜕皮过程中血淋巴主要生化成分的变化。研究结果显示:在中华绒螯蟹蜕皮前期,血淋巴中总糖、总脂、总蛋白和4种无机离子(Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+)的含量都呈上升趋势。总糖含量在D0期达到高峰,Ca2+、Cu2+和Zn2+含量于D1期达到高峰,总脂和总蛋白含量于D3-4期达到高峰;蜕皮后,总糖、Ca2+、Mg2+含量升高,总脂、总蛋白和Cu2+、Zn2+含量开始降低。中华绒螯蟹蜕皮过程中血淋巴生化成分的变化与蜕皮周期密切相关。     

不同盐度对中国对虾血淋巴渗透浓度和离子浓度的影响

1、中国对虾生活在盐度为4．5—35．5‰海水(渗透浓度为114—1178mOsm／kg)中，其血淋巴渗透浓度变化范围为587—797mOsm／kg。当海水渗透浓度为602mOsm／kg时，其血淋巴与海水等渗；当海水渗透浓度低于602mOsm／kg时，中国对虾表现为强高渗调节，高于602mOsm／kg时为中等低渗调节。2、中国对虾血淋巴中Na^ 离子在低盐度时为高离子调节，高盐度时为低离子调节。在试验盐度范围内，K^ 和Ca^2 均为高离子调节，Mg^2 为低离子调节。3、中国对虾对盐度突变有较强的适应能力。从盐度15‰海水转移到盐度7‰和28‰海水中，转移后分别在6和24小时中国对虾血淋巴渗透浓度基本能达到稳定。     

不同盐度对中国对虾血淋巴渗透浓度和离子浓度的影响

1、中国对虾生活在盐度为4．5—35．5‰海水(渗透浓度为114—1178mOsm／kg)中，其血淋巴渗透浓度变化范围为587—797mOsm／kg。当海水渗透浓度为602mOsm／kg时，其血淋巴与海水等渗；当海水渗透浓度低于602mOsm／kg时，中国对虾表现为强高渗调节，高于602mOsm／kg时为中等低渗调节。2、中国对虾血淋巴中Na^ 离子在低盐度时为高离子调节，高盐度时为低离子调节。在试验盐度范围内，K^ 和Ca^2 均为高离子调节，Mg^2 为低离子调节。3、中国对虾对盐度突变有较强的适应能力。从盐度15‰海水转移到盐度7‰和28‰海水中，转移后分别在6和24小时中国对虾血淋巴渗透浓度基本能达到稳定。     

闹羊花素—Ⅲ对菜粉蝶幼虫血淋巴和中肠酯酶的影响

闹羊花素－Ⅲ（简称R－Ⅲ）对菜粉蝶5龄幼虫血淋巴和中肠酯酶的活性，并分析了酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）图谱。活体试验结果表明，R－Ⅲ以每虫5μg定量饲喂或以20mg/L浸渍叶碟后饲喂试虫，能显著降低血淋巴和中肠酯酶比活力，以每虫1－3μg处理或5mg/L浸叶饲喂处理时，对酶活性的影响取决于处理剂量和时间。PAGE表明，R－ Ⅲ以每虫5μg处理，酯酶酶谱发生明显变化，主酶带明显抑制。     

~（60）Co－γ射线对柞蚕（Antheraea pernyi G）蛹某些生理生化特性的影响

本实验对（６０）Ｃｏ－γ射线１～１００×０．２５８Ｃ／ｋｇ照射量辐射柞蚕蛹所引起的一系列变化进行了研究．柞蚕蛹解除滞育后，进行旺盛的代谢活动．经照射后，发现６０Ｃｏ－γ射线对柞蚕蛹呼吸代谢、血淋巴中蛋白质代谢和糖代谢都有一定影响，其中对雌性个体影响比较大，对血淋巴蛋白质代谢和糖代谢的影响趋势基本一致．当照射量增加到一定值时，对各种代谢均有抑制趋势，高照射量还有致死作用．     

白斑综合征病毒（WSSV）和血卵涡鞕虫多重PCR检测方法的建立

根据对虾白斑综合征病毒（WSSV）和血卵涡鞕虫在GenBank中已发表的基因序列分别设计2对引物,建立了一种同时检测WSSV和血卵涡鞕虫的多重PCR方法,即通过一次PCR反应,同时扩增WSSV和血卵涡鞕虫2种病原的核酸。应用该方法分别对已知WSSV和血卵涡鞕虫阳性的样品进行PCR扩增,分别扩增出了2条特异性带———467 bp（WSSV）和168 bp（血卵涡鞕虫）,与实验设计相符,且与常规PCR检测结果一致。特异性实验结果也表明,该方法对WSSV和血卵涡鞕虫的检测均具很好的特异性,而对三疣梭子蟹其它常见病原、梭子蟹DNA样本的PCR扩增结果均为阴性。10份临床样品检测结果表明该检测结果与常规PCR检测结果符合率达到100%,说明所建立的多重PCR方法可以用于三疣梭子蟹2种病原的快速检测和鉴别诊断,对养殖三疣梭子蟹的疾病及时防控具有重要意义。