洛伐他汀产生菌土曲霉原生质体的制备与再生

报道了产生降血脂药物洛伐他汀（lovastatin)的土曲霉（Aspergillus terreus)的原生质体的制备与再生条件及原生质体形成过程,结果表明用溶壁酶5mg.mL^-1,Zymolyase 20T 2.5mg.mL^-1和蜗牛酶2．5mg.mL^-1配制的混合酶液,可制备出土曲霉生质体;其最佳酶解温度为34℃,作用5h,原生质体再生率达17％以上。     

响应面法优化泰妙菌素生产菌株原生质体再生培养基

[目的]采用响应面法对泰妙菌素生产菌株原生质体的再生培养基进行优化。[方法]利用Minitab统计软件,采用中心复合响应面设计对泰妙菌素生产菌株原生质体再生培养基的琼脂浓度和蔗糖浓度进行了优化。[结果]泰妙菌素生产菌株原生质体的再生培养基优化为马铃薯20.00%(浸提液)+葡萄糖2.00%+蔗糖2.70%+琼脂1.56%,p H=6.5。优化后的再生培养基的单菌落复苏率由0.7‰提高到3.5‰。[结论]该研究可为泰妙菌素的研发奠定基础。     

泰乐菌素高效降解菌的筛选及降解特性研究

发酵法生产泰乐菌素过程中会产生大量药渣,因残留抗生素的存在,极大地限制了其资源化利用.本研究采用微生物法降解药渣中残留泰乐菌素.结果表明:从堆放泰乐菌素药渣附近土壤中分离筛选到l株高效降解药渣泰乐菌素的菌株,经16SrDNA 鉴定为无丙二酸柠檬酸杆菌(Citrobacter amalonaticus).该菌株适宜生长pH值为6.0～7.0、温度为30～35℃.在30℃、pH6.5条件下,将无丙二酸柠檬酸杆菌按质量比为10%的量接种于含50 mg·L-1泰乐菌素培养基中,经48 h发酵处理后,95.2%的泰乐菌素被降解.提示利用微生物法可有效降解药渣中残留泰乐菌素.     

氧化石墨烯对泰乐菌素的吸附特性

通过改良Hummer方法制备了氧化石墨烯(GO),通过批量平衡试验考察了其对泰乐菌素的吸附特性和机制。研究结果表明:GO对泰乐菌素的吸附在24 h可达到动态吸附平衡,吸附动力学可用拉格朗日二级动力学模型较好地拟合;吸附等温线用线性吸附模型可以较好地拟合;吸附随着p H值的升高而降低,随着离子强度的增大而减弱。     

泰乐菌素药渣残留量的测定

采用高效液相色谱-紫外检测方法,建立了泰乐菌素药渣残留量测定的分析方法。泰乐菌素在6min内完全检出。线性范围为0.5～20.0mg/L,相关系数为0.999 8,最小检出浓度为0.1mg/L。将该方法应用于泰乐菌素测定上,回收率介于98.3%～100.3%,效果较好。     

水溶液性质对泰乐菌素光降解的影响

自然水体中的泰乐菌素的光降解通常受水溶液性质影响,以紫外灯作为光源,考察了水中泰乐菌素(TYL)的光降解特性及影响因素。结果表明,初始浓度为10 mg·L-1的TYL水溶液的6 h后光降解效率在50%左右。碱性条件有助于TYL的光解,酸性和中性条件下TYL的光解情况相似;溶液的初始浓度、NO-3浓度和腐植酸浓度的增大均可抑制TYL的光解。直接光降解可能是水体中泰乐菌素光降解的主要途径。     

泰乐菌素发酵中通气量与D0的分析控制

研究了泰乐菌素发酵生产过程中通气量(aeration)与溶解氧(dissoled oxygen)的关系，在实验中探明了泰乐菌素发酵中溶解氧的变化规律。得出了泰乐菌素发酵中通气量的控制参数并应用于生产实际，在发酵放罐单位相当的情况下，大大降低了空气消耗，有效地控制了发酵成本。     

禾谷镰孢原生质体的形成与再生

研究报道了制备禾谷镰孢原生质体的方法琢影响原生质体再生的条件。ＰＤＳ培养液中菌丝和５％绿豆汁中产生的分生孢子，在２８℃下通过蜗牛酶（３％），蜗牛酶＋纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％＋１．５％）酶解，２ｈ开始有原生质体释放，５ｈ左右达释放高峰后趋于稳定，而以纤维素酶（３％）、溶菌酶３％）、蜗牛酶＋纤维素酶（１．５％＋１．５％）、蜗牛酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）、蜗牛酶＋溶菌酶１．５％＋１．５     

泰乐菌素的超声波降解效果及机制

为研究超声波对水体中大环内酯类抗生素的去除效果,以典型的专用兽药抗生素泰乐菌素(TYL)为研究对象,考察初始浓度、溶液pH值、超声波功率、超声波处理时间对超声波降解效果的影响。在此基础上进一步考察H_2O_2和蒙脱石分别与超声波联合降解TYL的效果,并对TYL的超声波降解机制进行了探讨。结果表明:超声波对TYL有一定的降解效果,在初始浓度10 mg·L~(-1)、pH值11、超声波功率280 W、超声波处理时间90 min的条件下,TYL的降解率为72%。自由基清除剂正丁醇的添加显著抑制了TYL的降解,而且不同超声波功率、超声波处理时间和不同初始浓度及pH值条件下羟基自由基的浓度变化与TYL降解率呈正相关,表明TYL超声波的降解机制可能主要是羟基自由基的氧化。溶液中添加H_2O_2或蒙脱石均对TYL超声波降解产生协同作用,TYL的去除率可分别提高至80.9%和93.9%。H_2O_2可直接氧化TYL、促进·OH生成;蒙脱石的吸附性能及其中少量的铁均可影响溶液中·OH含量。H_2O_2或蒙脱石联合超声波降解TYL的降解效果和降解机制与添加物质的性质密切相关,不能简单归因于羟基自由基的氧化。研究表明,合适的超声波处理方法对大环内酯类抗生素有很好的去除效果,可以考虑将超声波法用于含抗生素废水处理的工艺中。     

蛋白酶对曲霉原生质体稳定性再生及融合的影响

４种蛋白酶对黑曲霉，米曲霉原生质体稳定性，再生有主融合的研究结果表明，蛋白酶用于原生质体灭活前或后保温均显著降低原生体数量，同时提高原生质体再生率及灭活性原生质体融合指数。蛋白酶安全，无毒可以替代常规促融合剂聚乙二醇。     

小麦愈伤组织生长速率与植株再生能力关系的初步研究

本文以4个春小麦品种为材料,筛选出适合小麦成熟胚愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.4-D2mg/L+NAA0.5mg/L+CH200mg/L;用此培养基对10个品种的成熟胚进行离体培养,较系统地比较了愈伤组织生长速率,可再生性愈伤组织诱导率、再生植株频率等指标的基因型间差异。研究结果表明:愈伤组织生长速率与植株再生频率之间存在密切正向相互关系,相关系数为0.78。作者初步认为,前者可作为基因型再生能力大小的一个选择指标。再生能力强的基因型具有较高的愈伤组织生长速率,而且这一生长速率能在继代培养中保持较长时间。     

灭活黑曲霉与中期啤酒酵母原生质体融合的研究

用ＰＥＧ促融剂使经硫酸二乙酯灭活的黑曲霉ＡＭＳ－１１的原生质体与细胞分裂中期折啤酒酵母ＲａｓｓｅⅫ原生质体融合，在选择性培养基上获得了能利用羧甲纤维素作唯一碳源的杂种酵母菌株ＦＡＳＳ１及ＦＡＳＣ１，经测定其ＤＮＡ量，蛋白质电泳谱带，生长曲线和碳源同化等项目，它们将具有双亲菌株的特征性状。     

香菇金针菇远缘亲本原生质体融合及融合子检测

采用１５ｇ／Ｌ溶壁酶处理获得了香菇单核体Ｌ３８－Ｓ０３，Ｌ５２－＾ａｄｅ和金针菇单核体Ｆｖ１１－Ｓ２３的原子质体。１ｇ／Ｌ焦磷酸二乙酯灭知的Ｌ３８－Ｓ０３和腺嘌呤缺陷型Ｌ５２－＾ａｄｃ的原生质分别与８ｇ／Ｌ碘代乙酰胺灭知的Ｆｖ１１－Ｓ２３的原生质体进行ＰＥＧ－Ｃａ＾２＋促融合，在ＲＣＭ，ＩＲＭＭ培养基上再生，得到１４２个融合子，其中１７个菌株能结实出菇。筛选出Ｆ０１，Ｆ０２和Ｆ０３的３个融合子菌株     

甘蓝型油菜原生质体培养和植株再生

从甘蓝型油菜试管苗下胚轴和幼叶分离的原生质体，在含２．４－Ｄ０．８ｍｇ／１，ＮＡＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．５ｍｇ／１的改良ＢＧ培养基中浅层液体和固体平板培养６天，分裂细胞为８％－２０％，至１５天形成３２细胞的细胞团。愈伤组织在含ＮＡＡ０．２ｍｇ／１，ＩＢＡ０．１ｍｇ／１，６－ＢＡ１．０ｍｇ／１的ＭＳ分化培养基上培养基上培养３－４周，产生不定芽，并在附加ＩＢＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．２ｍ...     

大豆原生质体培养基的研究

本试验制成大豆未成熟子叶原生质体再生细胞分裂率高、能保持胚性状态并最终能分化成正常植株的培养基。试验发现,天冬酰胺、谷氨酰胺、尿囊素和尿囊酸等大豆根瘤形成的酰尿有机态氮是有效的主要氮源。     

黄瓜和南瓜原生质体融合研究

黄瓜子叶原生质体经１０μｇ／ｍｌ诺丹明６Ｇ（Ｒ６Ｇ）处理１５ｍｉｎ,南瓜和黑籽南瓜子叶原生质体分别经１．０ｍｍｏｌ／Ｌ和１．３ｍｍｏｌ／Ｌ碘乙酸（ＩＯＡ）处理１０ｍｉｎ,均发生生理性失活。采用聚乙二醇和高钙高ｐＨ法融合后,双亲融合体恢复分裂能力。同工酶鉴定表明,黄瓜和南瓜,黄瓜和黑籽南瓜均获得了体细胞杂种愈伤组织。     

利用原生质体再生恢复核盘菌菌株Ep—1PN毒性的研究

分析了６９个随机挑选的核盘菌弱毒菌株Ｅｐ－１ＰＮ原生质体再生后代的生长速度、菌 落形态和毒性。结果表明：其中的３５个再生后代在ＰＤＡ平板上均匀扩展,形成典型的核盘菌菌落,生长速度大于１８ｍｍ／ｄ。在离体莴苣杆上,这些后代的培养物引起较大的病斑。当它们同亲合性菌株Ｅｐ－１ＰＮＡ１８３在ＰＤＡ平板上接触时没有发现Ｅｐ－１ＰＮＡ１８３菌落发生异常变化,说明这些后代已失去了Ｅｐ－１ＰＮ的弱毒因子,恢复了正     

药用植物原生质体培养及其应用

原生质体培养和植株再生技术是药用植物生物工程的基础，药用植物原生质体的来源，酶解的条件，培养基的组成，培养的方法等对原生质体培养胶丰很大的影响。目前，原生质体培养在药用植物高产细胞系的筛选、体细胞杂交和基础工程方面已取得了长足的进展。     

作物原生质体电融合技术的新进展

本文对作物原生质体电融合技术在作物体细胞杂交中的应用及最新发展进行了综述,并对电融合的原理、方法及优点进行了描述。本文引用了国内外近期报道的具有良好农艺性状的体细胞杂种或胞质杂种的许多例证,并重点介绍了禾谷类粮食作物方面的研究进展及存在问题。这些例证不仅具有育种应用价值,而且对于研究如何选择适宜的融合一脉冲参数、实现高频率异种融合的条件以及对杂种细胞有效的筛选方法等亦有重要的理论意义。