布氏菌活疫苗皮内与皮下接种的免疫效果评价

将布氏减毒活疫苗通过皮内注射和皮下注射方式免疫小鼠,比较2种方式的免疫效果。用布氏菌活疫苗,通过皮内和皮下注射免疫小鼠,免疫4周后分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中总IgG抗体;ELISPOT法检测分泌IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目,同时用ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFN-γ、IL-4的水平;用流式细胞仪对T淋巴细胞亚群进行分类;用羊布鲁氏菌弱毒株M5攻击免疫动物,通过脾脏细菌计数评价布氏活疫苗的免疫保护作用。ELISA、ELISPOT和T淋巴细胞亚群分类结果显示,2种免疫途径均能诱导较强的体液免疫和细胞免疫应答,但两者间无显著差异;BALB/c小鼠攻毒试验显示皮内注射组脾脏中布氏菌数量的对数值为0,皮下注射组为2.27±0.21,阴性对照组为5.13±0.16。由此可知,2种免疫方法均能诱导较强的体液免疫和细胞免疫应答,但皮内注射组的免疫保护作用显著优于皮下注射组,提示通过皮内注射布氏疫苗可能是安全、高效的免疫途径。     

滴鼻免疫布氏菌活疫苗保护效果的研究

为评价布氏疫苗通过滴鼻方式免疫豚鼠的免疫保护效果,将60只豚鼠随机分为3组,滴鼻免疫布氏菌活疫苗,免疫30 d后进行心脏采血,制备肺泡灌洗液以及鼻腔灌洗液。ELISA法检测免疫动物血清中IgG抗体和免疫动物肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液中IgG、IgA抗体;通过迟发型皮肤超敏实验进行体内细胞免疫评价;用羊布氏菌弱毒株M5经皮下和滴鼻两种途径攻击免疫动物,通过脾脏细菌计数评价布氏菌活疫苗的主动免疫保护力。取40只小鼠随机分为8组,将豚鼠免疫血清对小鼠进行腹腔注射,2 h后皮下攻击M5羊布氏菌弱毒株,通过脾脏细菌计数评价免疫血清的被动免疫保护力。用ELISA法检测到经布氏活疫苗免疫的豚鼠体内有特异性抗体产生;疫苗免疫动物对Br PPD抗原迟发型超敏反应（DTH）阳转率均为100％;通过布氏菌活疫苗保护力分析,表明该疫苗的主动免疫以及免疫血清的被动免疫都具有较好的保护效果。布氏菌活疫苗采用滴鼻方式免疫豚鼠,免疫后能获得较好的免疫保护效果。     

黄芪多糖对猪瘟活疫苗免疫应答的佐剂作用

为研究黄芪多糖对猪瘟活疫苗的佐剂作用,分别用0.5％黄芪多糖、疫苗专用稀释液、生理盐水（对照）稀释猪瘟耐热保护剂活疫苗免疫猪,测定免疫后不同时间段内血清中 IgG 及其亚型IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和细胞因子IL 2、IL 6的含量。结果显示,与对照组相比,黄芪多糖作为疫苗稀释液可以显著提高血清中IgG及其亚型和细胞因子IL 2、IL 6的含量。与疫苗专用稀释液组相比,在免疫后第7、14、28天,黄芪多糖组IgG含量均提高,分别提高1.6％（P＞0.05）、6.4％（P＜0.05）、7.1％（P＜0.05）,IL 2含量分别提高12.1％（P＜0.05）、2.9％（P＞0.05）、15.3％（P＜0.05）,IL 6含量差异均不显著。表明,黄芪多糖作为疫苗稀释液对猪瘟活疫苗具有良好的佐剂作用。     

布氏杆菌抗独特型抗体苗小白鼠免疫试验

用布氏杆菌抗独特型抗体苗(简称二抗苗)进行试验表明,免疫小白鼠酸性α-醋酸萘酯酶阳性T淋巴细胞(TANAE~+)数明显高于对照组(P<0.01),且比19号苗免疫组还高,证实此二抗苗确有增强细胞免疫功能的作用。     

不同部位皮下注射DNA疫苗对小鼠体液免疫的影响

主要探讨在小鼠不同部位皮下注射DNA疫苗对体液免疫应答的影响, 为DNA疫苗在体内获得高滴度抗体提供优化条件. 用RT-PCR从人肺癌细胞株A459中克隆VEGF片段, 并插入pVAX1质粒构建pVAX1-VEGF真核表达质粒; 在耳廓、胸部、腹部、尾跟部、背部及足垫的皮下注射1 μg/μL pVAX1-VEGF疫苗DNA 100 μL, ELISA法检测血清中VEGF抗原表达及其IgG抗体分布, 测定血清中IgG2a和IgG1两亚型水平. 实验结果发现: 耳廓、胸部、腹部免疫产生的VEGF抗原较快, 其中耳廓免疫产生的体液免疫最快最强, 与胸部、腹部、背部、尾根及足垫免疫产生的体液免疫反应相比, 具有统计学意义, 同时pVAX1-VEGF疫苗组与pVAX1对照组的体液免疫差异显著, 但pVAX1-VEGF疫苗组主要产生IgG2a型抗体. 上述结果表明: 所构建人VEGF的DNA疫苗能在小鼠体内有效表达, 不同部位皮下免疫后均能产生抗VEGF的IgG抗体, 以IgG2a抗体为主; 但就抗原表达、抗体及IgG2a而言, 以耳廓皮下接种最佳.     

不同部位皮下注射DNA疫苗对小鼠体液免疫的影响

主要探讨在小鼠不同部位皮下注射DNA疫苗对体液免疫应答的影响,为DNA疫苗在体内获得高滴度抗体提供优化条件.用RT-PCR从人肺癌细胞株A459中克隆VEGF片段,并插入pVAX1质粒构建pVAX1-VEGF真核表达质粒;在耳廓、胸部、腹部、尾跟部、背部及足垫的皮下注射1μg/μL pVAX1-VEGF疫苗DNA 100μL,ELISA法检测血清中VEGF抗原表达及其IgG抗体分布,测定血清中IgG2a和IgG1两亚型水平.实验结果发现：耳廓、胸部、腹部免疫产生的VEGF抗原较快,其中耳廓免疫产生的体液免疫最快最强,与胸部、腹部、背部、尾根及足垫免疫产生的体液免疫反应相比,具有统计学意义,同时pVAX1-VEGF疫苗组与pVAX1对照组的体液免疫差异显著,但pVAX1-VEGF疫苗组主要产生IgG2a型抗体.上述结果表明：所构建人VEGF的DNA疫苗能在小鼠体内有效表达,不同部位皮下免疫后均能产生抗VEGF的IgG抗体,以IgG2a抗体为主;但就抗原表达、抗体及IgG2a而言,以耳廓皮下接种最佳.     

4种多糖对口蹄疫疫苗免疫反应的影响

目的:该研究旨在探讨口服黄芪多糖、白术多糖、黄芩多糖和金银花多糖等4种多糖对小鼠注射口蹄疫疫苗 后体液免疫和细胞免疫反应的影响.方法:试验选取4~6周龄ICR小鼠42只,随机分为6组,每组7只.各试验 组小鼠分别灌服多糖或生理盐水,连续给药4d后,注射口蹄疫疫苗进行首次免疫,间隔14d后2次免疫.2免后2 周采集血清测定抗体质量分数,同时无菌取脾,制备脾细胞悬液,测定淋巴细胞增殖能力、细胞因子的表达水平和 CTL杀伤能力.结果:结果显示,与对照组相比在二免后14d,这4种多糖均不同程度促进了淋巴细胞增殖反应, 诱导产生了较高水平的IgG抗体,同时能够上调CD4 T 细胞IL-2,IL-4,IFN-γ和CD8 T 细胞IFN-γ的表达,并 增强了CTL反应.结论:免疫前口服这4种多糖均可提高Th1,Th2型免疫反应,进而增强小鼠的体液和细胞免疫 反应.该研究为增强口蹄疫疫苗的免疫应答提供了新途径,同时也表明受试的3种多糖均具备良好的佐剂潜力.     

黄芪多糖调节免疫应激雏鸡免疫功能研究

采用NDⅠ系疫苗大剂量肌肉注射雏鸡的方法建立实验性免疫应激模型,探讨应激状态下雏鸡免疫功能变化及黄芪多糖（APS）对免疫应激雏鸡的免疫功能的影响。将120只2周龄健康雏鸡随机分成正常对照组（C）、试验组（T1、T2）。分别胸肌注射0.5ml/只：生理盐水,10头份新城疫（ND）Ⅰ疫苗;10头份NDⅠ疫苗＋5mgAPS。于应激后1,3,5,10,15,21d采用血凝抑制试验（HI）β-微量法检测ND抗体消长变化,以及用免疫组化法检测雏鸡免疫器官中CD4＋、CD8＋T淋巴细胞数目。结果显示：免疫应激后雏鸡免疫功能明显紊乱,体液免疫和细胞免疫均受到抑制,而黄芪多糖体内应用可有效恢复其免疫功能。     

雏鸡新城疫免疫后免疫器官组织的免疫学变化

本文主要研究了雏鸡 ND 免疫后免疫中枢器官(法氏囊、胸腺)、外周免疫器官(脾脏)以及消化道和呼吸道相关的局部免疫组织(盲肠扁桃体、丕氏斑、十二指肠粘膜和肺支气管粘膜淋巴组织、哈德尔腺)中浆细胞,TANAE~+,MΦ,淋巴细胞数的变化。结果表明,ND 免疫后免疫器官组织的体液免疫和细胞免疫应答均增强。     

细毛羊布氏菌病的检测与防治

为了认清布鲁氏菌病的原因、疫情发展的趋势和控制布病的方法,对2008~2009年二年的布病检测进行分析,表明本场绵羊血清学检查阳性率在0.1%以下,达到县级稳定控制标准。     

卡介菌多糖核酸对IBDV感染鸡的免疫活性研究

为了评价卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)在畜禽病毒性疾病中的作用及其诱导机体免疫的能力,建立了人工感染传染性法氏囊病(IBD)动物模型,通过检测免疫器官指数、IBDV抗体、外周淋巴细胞亚群、诱导干扰素和白介素水平等特异性和非特异性免疫指标,评估不同剂量BCG-PSN对IBDV感染鸡免疫功能的影响。结果显示:免疫器官脾脏指数和胸腺指数在注射BCG-PSN的初期出现上升趋势,而在注射BCG-PSN后期(15d)受试鸡外周血液CD4+/CD8+值显著提升;各BCG-PSN注射组的IBDV抗体滴度在试验初期明显提高;从注射开始,BCG-PSN就显示出其对IFN-γ、IFN-α和IL-2的显著提升效果。上述结果说明:BCG-PSN既能调节IBDV感染鸡的细胞免疫功能,又能调节机体的体液免疫功能,激活组织细胞释放包括IFN-γ、IFN-α和IL-2等多种细胞因子,以0.3mg·kg-1的注射剂量可获得良好的免疫效果。     

马尾藻多糖佐剂对猪PRRS疫苗免疫效果影响的研究

分别以马尾藻多糖的不同剂量与猪PRRS灭活抗原配制成完全佐剂疫苗,免疫5组非猪PRRSV免疫猪,并于首免的第0、20、40、50d采血,测定其体液免疫和细胞免疫水平。结果表明：（1）各马尾藻多糖佐剂组T淋巴细胞转化率（61.4%、65.0%、63.4%）均高于空白组1（52.8%）及普通佐剂疫苗组（59.6%）,各马尾藻多糖佐剂组与空白对照组间差异显著（P〈0.05）;（2）各马尾藻多糖佐剂组的T淋巴细胞亚群数量均高于空白组和普通佐剂疫苗组,其中以CD3的数量差异最明显（P〈0.05）,但马尾藻多糖组与普通佐剂疫苗组的CD8和NK细胞亚群的测定值差异不显著;（3）间接ELISA法测定各马尾藻多糖佐剂组血清中抗体的活性（0.631、1.015、0.688）均高于两对照组（0.518、0.568）,其中100mg/头份马尾藻多糖佐剂组与对照组间的差异显著（P〈0.05）。可见,以马尾藻多糖作为佐剂即可以提高体液免疫水平,又能增强细胞免疫功能,其中100mg/头份马尾藻多糖剂量的总体免疫效果最佳。     

海参的免疫机制研究

海参是棘皮动物门、海参纲动物的统称,作为海洋底栖生物能在高浓度病原体微生物环境中生存有其特有的免疫机制。海参的免疫应答是由参与免疫反应的效应细胞-体腔细胞和多种体液免疫因子共同介导的。体腔细胞通过吞噬、包囊、降解等方式抵抗病原入侵,同时体腔细胞还会释放免疫因子到体液中对外来物质进行识别和攻击。对目前海参免疫机制的研究进行了综述。     

不同生物素添加水平对肉仔鸡免疫器官发育和免疫功能的影响

将400只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分成4个处理,每处理5个重复,每重复20只鸡(公母各半);在 基础日粮——小麦-酪蛋白-鱼粉型日粮中分别添加0．3,0．9和2．7 mg／kg生物素,以基础日粮为对照,系统研究了 生物素对肉仔鸡免疫器官发育、机体免疫反应和神经内分泌激素的影响。结果表明:(1)生物素缺乏可抑制免疫器 官的发育,降低其重量指数;添加生物素可促进免疫器官发育,提高其重量指数。(2)添加生物素可促进细胞免疫反 应和体液免疫反应,提高血清中球蛋白水平及新城疫抗体滴度和IgG水平,极显著提高血液中T、B淋巴细胞转化 率。(3)添加生物素后,血清甲状腺素T4、三碘甲状原氨酸T3、生长激素和皮质醇水平均呈上升趋势。     

弓形虫分子免疫学研究进展

弓形虫病是由刚第弓形虫引起的一种危害严重的全球性人兽共患寄生虫病,全世界各国学者对此原虫的研究十分重视,尤其是近年来对其免疫学的研究成果对深入了解该原虫的致病机理和进行有效的免疫预防非常重要。从宿主感染弓形虫后的免疫效应、免疫诊断及其疫苗等方面阐述了弓形虫分子免疫学研究进展。     

布氏杆菌抗独特型抗体苗豚鼠免疫试验

用新研制的抗牛布氏杆菌独特型抗体苗(简称二抗苗)免疫豚鼠并于免疫后4个月进行强毒菌株攻击保护试验表明,3个不同免疫剂量组豚鼠平均保护率为79.1％,血清凝集试验结果表明,免疫豚鼠产生了一定滴度的凝集抗体,这证明该抗独特型抗体苗具有良好的免疫原性。     

蒙药组方“花艽-6”对小鼠特异性免疫功能的影响

目的:本文旨在研究抗类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)蒙药组方(简称花艽-6)对正常小鼠和免疫低下模型小鼠特异性免疫功能的影响.方法:分别利用环磷酰胺( Cyclophosphamide,CTX)、环孢素A(Cyclosporin A,CsA)两种药复制了体液、细胞免疫功能低下的动物模型.采用分光光度法测定血清溶血素HClgM,ELISA法测定血清中抗体水平(IgG、IgM),观察花艽-6对正常鼠和免疫低下鼠体液免疫功能的影响.采用迟发型变态反应法测定小鼠耳壳肿胀度,流式细胞术测定小鼠外周血中T淋巴细胞亚群百分含量,观察花艽-6对正常鼠和免疫低下鼠细胞免疫功能的影响.结果:花艽-6能显著抑制正常小鼠和加强CTX致体液免疫功能低下小鼠血清中抗体水平的含量;能显著抑制正常小鼠的DTH反应并加强CsA对细胞免疫功能低下小鼠的DTH反应的抑制作用,能显著提高正常鼠和CsA致细胞免疫功能低下小鼠外周血CD3+含量,但显著降低CD4+和CD8+及CD4 +/CD8+含量.结论:花艽-6可显著抑制正常鼠和加强CTX致免疫功能低下鼠的体液免疫功能,对正常鼠和CsA致免疫功能低下鼠的细胞免疫功能具有调节作用.     

Trap抗原诱导细胞免疫对S.aureus免疫保护作用的研究

金黄色葡萄球菌(S.aureus)是奶牛乳房炎的主要致病菌.实验利用S.aureus的Trap基因构建Trap/PET-32a表达质粒,IPTG诱导表达后柱层析纯化Trap蛋白,与弗氏佐剂混合制备疫苗,小鼠肌肉免疫,二免后7 d,分离小鼠脾细胞,经Trap抗原刺激后检测细胞因子,二免后14 d,小鼠眼球采血制备血清检测...     

高热应激模型下CLA对蛋鸡免疫功能的影响Ⅰ细胞免疫和体液免疫指标的变化

选用ND、IBD常规免疫25周龄的海兰(褐)蛋鸡120只,随机等分为试验组、对照组,分别置于2个人工气候室内二层阶梯式单笼饲养,试验组日粮为基础日粮+20 g/kg共轭亚油酸,对照组为基础日粮,设定热应激模型:22℃5 d(预试期)、30℃5 d、32℃5 d、35℃5 d、22℃5 d(恢复期),进行为期25 d的CLA对高热应激蛋鸡免疫功能的影响试验。结果显示,在30℃119 h、32℃119 h、35℃119 h、22℃119 h(恢复期)时,血液淋巴细胞比率,T、B淋巴细胞转化率,CD 4+、CD 8+T细胞亚群等细胞免疫指标和血清ND、IBD、IgG抗体水平等体液免疫指标试验组均显著高于对照组(P<0.01)。表明CLA有缓解高温环境导致的蛋鸡免疫水平下降,促进热应激解除后机体免疫力恢复等降低热应激负效应的作用。     

奶牛免疫布病(Ⅱ)疫苗后流产率及对未免疫牛感染情况调查

布氏杆菌病又称传染性流产,本病是由布氏杆菌引起人畜共患的一种慢性传染病,病原菌侵害生殖系统,引发子宫、腹膜、关节和睾丸等炎症,临床上以母牛流产和不孕症为主。病畜可传染给人类或其他动物,布氏杆菌病影响奶业的发展。因此,要从根本控制布氏杆菌病的发生与流行,应采取布病疫苗接种与检疫净化相结合的防治措施,从而为控制和消灭牛布氏杆菌病提供更有力的技术支撑。