蓝莓菌根菌的分离与回接试验

蓝莓属于菌根植物,其根系上共生有多种菌根菌.为了筛选促进蓝莓生长的菌根菌,本试验采用蓝莓根段直接分离法和根段组织研磨溶液分离方法,从长白山野生蓝莓新鲜根系中分离11株真菌,其中只有4株真菌才能够回接成功,回接成功侵染率达33.3％～63.3％.菌株LM001和LM003对蓝莓苗的生长具有有明显的促生作用.     

接种与非接种菌根菌对蓝莓组培苗生长的影响

本实验通过接种与非接种菌根菌来研究菌根菌对蓝莓组培苗生长的影响。试验以草炭土、松针腐殖土及珍珠岩混合作为栽培基质,将驯化好的北高丛蓝莓组培苗栽培于基质中,一组接种菌根菌,一组不接种作为对照,观察记录两种组培苗的生长状况。结果表明接种了菌根菌的蓝莓组培苗在各项生长情况中比未接种菌根菌的对比实验组更加优异。     

不同菌根真菌对蓝莓组培苗移栽成活率和生长的影响

将4种菌根真菌分别侵染蓝莓组培移栽苗,20天后分别统计成活率,测定苗高、叶片数、叶面积及分枝数。结果表明,接种BNEM0101和BBEM0103的蓝莓移栽苗的成活率、苗高、叶片数、叶面积明显高于对照组。其中BBEM0101对蓝莓植株生长的促进作用最大,是最有效的菌根真菌,BNEM0101、BBEM0103次之,而BNEM0105则抑制了蓝莓的生长。有效菌根真菌促进蓝莓生长的高峰期在接种后30天左右。     

红树林固氮菌和解磷菌的分离及对秋茄苗的促生效果

采用选择性培养基富集培养,结合形态及生长性状等特征分析,分别从广东湛江、珠海及海南东寨港等样地的木榄Bruguiera gymnorrhiza、海莲B.sexangula、秋茄Kandelia candel、红海榄Rhizophora stylosa、无瓣海桑Sonneratiaapetala和海桑S.caseolaris这6种红树植物根际中分离出固氮菌和解鳞菌共59株.秋茄盆栽接种试验结果表明,上述样地分离出的部分解磷菌和固氮菌对秋茄苗的高生长和生物量增长有明显促进作用,其中1株解磷菌He4#单菌株接种的秋茄苗高、根干质量和总生物量比对照分别增长58.4%、132.1%和133.2%,该菌株比国外引进的1株解磷菌地衣芽孢杆菌Bacillus lichenciformis的促生效果更好,前者接种的秋茄根生物量和总生物量比后者高72.7%和90.2%.7株固氮菌的单接种对秋茄苗表现出不同程度的促进作用,其中菌株Ngqq-R14的促生效果最佳,苗高、地径、茎干质量、根干质量和总生物量分别比对照增长38.36%、16.19%、75.46%、49.97%和59.31%.将7株固氮菌和7株解磷菌交互配对成7个菌株组合并接种到秋茄苗的根部,接种6个月后各菌株组合处理组的苗高、茎干质量、根干质量和总生物量分别比对照增长21.1%～69.4%,70.7%～271.5%,27.1%～111.3%和66.9%～123.8%,表明固氮菌与解磷菌之间存在一定的协同增效作用,促进秋茄生长的最佳接菌组合是Nlqq-Wy4+P12.     

外源丛枝菌根真菌对低温胁迫下蓝莓幼苗抗氧化系统的影响

本研究通过筛选得到4种菌根真菌(硬皮马勃属Scleroderma sp.、牛肝菌属Boletus sp.、鬼伞菌属Coprinus sp.、口蘑属Tricholoma sp.),分别采用菌液浇施的方法接种蓝莓幼苗,接种90 d后进行菌根侵染率调查并进行低温胁迫处理。结果表明,4种菌根真菌均可以侵染蓝莓幼苗,其中以接种Coprinus sp.处理的侵染率最高,接种Tricholoma sp.处理的侵染率最低。2个蓝莓品种的幼苗接种不同菌根真菌后,在低温胁迫下其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性总体高于对照,其中以接种Boletus sp.处理的蓝莓幼苗表现最好,接种Scleroderma sp.处理和接种Coprinus sp.处理也在一定程度上提高了蓝莓幼苗的酶活性,接种Tricholoma sp.处理对蓝莓幼苗酶活性的影响最小。     

接种菌根菌对木麻黄无性系生长初期的影响

在木麻黄无性系水培苗上接种13个外生和内生菌根菌苗株，观察苗根苗对木麻黄无性系苗高生长和造林12个月后树高、胸径和保存率的影响．结果表明；13个外生和内生菌根菌都极显著地促进了木麻黄无性系小苗苗高的生长，最大的比对照苗高增加了68.5％，最小的也比对照增加了14．7％；造林12个月后。多数菌根菌对木麻黄无性系的促生作用明显下降。只有2～3个苗根菌株可以显著或极显著地促进木麻黄的生长。     

杨梅树混合接种VA菌根菌和弗兰克氏菌的生长效应

将VA菌根菌和弗兰克氏菌混合接种于杨梅,研究两者的互作关系及其对杨梅生长发育的促进效应。结果表明,VA菌根菌与弗兰克氏菌之间存在协同效应,混合接种可以显著促进杨梅苗期的生长。进一步研究混合接种对杨梅早期营养生长和生殖生长的影响表明,混合接种能同时促进杨梅果树的营养生长与生殖生长,而且越早接种效果越明显。其中,以当年生幼苗进行混合接种的效果最佳,种植第4年开始结果,第6年进入盛果期,平均单株产量达33.66 kg,平均单果重达25.24 g,分别比对照(未接种)提高26.85%、21.89%。     

土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)菌株筛选及其与油松幼苗合成效应

本文采用菌落形态观察和分子生物学相结合的方法,对11个菌株进行鉴定.并通过土生空团菌菌株筛选及其与油松幼苗合成试验,探讨土生空团菌菌根形态及其对宿主的作用.结果表明:(1)从菌落颜色形态特征和rDNAITS序列的Blast比对结果来看,本文所选的11个菌株均为土生空团菌的菌种.(2)优良土生空团菌与油松幼苗的根系共生,形成典型的外生菌根,菌根感染率达20.1%,而对照苗无菌根感染现象.(3)土生空团菌对油松幼苗生长的影响:菌根苗总生物量比对照提高186.7%;叶干重增加152%;根干重增加294.3%;根茎比提高189.4%;苗高增加56.5%;侧根数增多166.7%,对促进油松幼苗生长作用明显.     

干旱胁迫对马尾松菌根化苗木生长的影响

为了研究干旱胁迫下,不同菌根化苗木在生长形态方面的抗旱作用。以接种5种外生菌根真菌的马尾松苗木为材料,在温室内采用盆栽方法人工模拟自然干旱。结果表明：干旱胁迫下,外生菌根真菌能促进苗木的高、地径、根系生长及生物量积累,且不同菌种、相对含水量以及菌种与含水量间交互项均差异极显著( P<0.01)。中度胁迫时,接种土生空团菌苗木的高和地径生长最好,比对照分别增加了27.8%和52.9%;不同胁迫条件下,均以接种褐环乳牛肝菌1的苗木生物量积累最大,较对照增加了230%;干旱胁迫下,菌根菌能促进苗木地上和地下部分生长,尤其对根系作用明显,使菌根化苗木的根冠比显著高于对照,但不同菌种对宿主的亲和力大小有差异,且苗木对各菌根菌的依赖性也不相同。     

丛枝菌根真菌对温室有机土栽培黄瓜的作用研究

研究了2种丛枝菌根真菌在有机土基质和普通土壤中对温室黄瓜生长、产量及营养品质的影响。结果表明:接种GM后黄瓜的光合速率,叶片可溶性糖都显著高于对照;接菌可显著提高黄瓜产量,在有机土中接种Glomous mosseae(GM)和Glomous versiforme(GV)可使黄瓜产量分别比对照提高28.5%和25.4%,而土壤中接种GM和GV亦可使其产量分别比对照提高58.1%和31.3%,同时接种菌根菌后瓜条中的总糖、VC、干物重均明显提高,营养品质得到明显改善。因此可以认为在黄瓜生产中应用菌根苗可以明显提高黄瓜的产量品质。     

云杉菌根化育苗技术的研究

以云杉外生菌根菌种为试材,比较了各外生菌根菌与云杉形成菌根的能力以及不同菌根感染率,并探讨了外生菌根菌对云杉苗木生长的影响.结果表明:褐粘盖牛杆菌的最佳培养温度是20~25℃,最适pH值是6.0;播种时接种外生菌根菌可提高种子的出苗率,并使出苗时间提前.菌根菌能显著提高云杉幼苗的苗高、地径和侧根数,经褐粘盖牛肝菌、微甜乳菇和土生空团菌液体菌剂处理的种子出苗率比对照提高了26.8%、23.9%、22.0%;就各种菌根菌而言,以微甜乳菇菌株的接种效果最好,其次为褐粘盖牛肝菌和土生空团;黑紫红菇和白乳菇对云杉苗促生效果相对较差.     

基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选

【目的】筛选用于菌根苗接种的高质量红汁乳菇菌株,为提高红汁乳菇产量提供支持。【方法】以10个红汁乳菇菌株（JH1、JH2、JH4、JH5、JH7、JH8、JH10、JH11、JH12、JH13）为研究对象,将菌株分别在PDA和BAF培养基上培养后,测定菌株生长势指标（菌丝生长速度、菌丝生物量）;将红汁乳菇液体菌种接种于马尾松幼苗根部合成菌根苗,以不接种为对照（CK）,培养210 d后对菌根合成能力（菌根数量、菌根侵染率、菌根化率）和宿主植物生长量（苗高、主根长、地径、干质量）进行测定。对上述9个参数进行相关性分析,并用隶属函数法对菌株性状进行综合评价。【结果】①在PDA固体培养基上,以菌株JH1菌丝生长速度最快,达到3.17 mm/d;在BAF液体培养基上,以菌株JH5的菌丝生物量最大,为3.28 g/L。②所有菌株均能与马尾松根系形成外生菌根,但菌根形态并不相同。接种红汁乳菇菌株JH5的马尾松苗的菌根数量为45.65个/株,菌根化率为90.67%,菌根侵染率为79.60%,显著高于其他9个菌株,表现出较强的合成菌根苗能力。③接种不同红汁乳菇菌株的马尾松苗,在苗高、主根长、地径和干质量等指标上表现各异。接种菌株JH4的马尾松苗高、主根长和干质量表现最优,较对照分别提高24.45%,16.72%和53.33%;接种菌株JH5的马尾松苗地径生长量表现最优,较对照提高5.19%。④相关性分析表明,菌丝生物量与菌根化率和菌根苗干质量呈极显著正相关（P＜0.01）,菌根数量与菌根化率和菌根苗地径呈极显著正相关（P＜0.01）。⑤基于隶属函数法的综合评价结果表明,红汁乳菇JH5为适合培育菌根苗的最佳菌株,JH4和JH7为次优菌株。【结论】筛选出1个优良红汁乳菇菌株JH5,该菌株的生长势和菌根苗品质整体表现较好。     

春兰菌根真菌的筛选

地生兰组织培养存在移栽无菌苗成活率低、生长缓慢、开花迟缓、花小甚至不开花等问题,这些与缺少共生的菌根真菌有关。用分离自云南保山、大理等地野生春兰菌根中的内生真菌19个菌株接种春兰组培幼苗,经4.5个月的共生培养,兰苗叶色正常,根系生长良好。测定植物生长量,从长势有明显提高的接菌苗进行重分离及菌根的显微结构观察,确定春兰菌根的形成,并筛选出春兰的有效共生菌根真菌为CLB111,CLB113和MLX102。通过接种处理后春兰苗的鲜重增长率分别为70.6%、70.2%、68.6%,而不接菌的对照仅为45.6%,与对照差异达0.01极显著水平。结果表明这3个菌株均为春兰的菌根真菌的优良菌株.     

蓝莓根毛缺失的机制及内生菌根真菌的促生作用

为探究蓝莓根毛缺失机制,以‘布里吉塔’蓝莓根系为材料,对6个根毛发生关键基因进行分离鉴定;同时,为筛选蓝莓促生内生菌根真菌并研究其促生机制,从地栽‘夏普蓝’和‘奥尼尔’蓝莓根系中分离并纯化了12株蓝莓内生菌根真菌,并回接到‘海岸’蓝莓苗进行接种试验。结果表明:根毛发生负调控基因GL2、WER、TTG均有表达,而正调控基因TRY、CPC、ETC1未见表达,这可能是蓝莓根毛缺失的主要原因。分离得到的菌根真菌主要来自于镰刀菌属(Fusarium)、踝节菌属(Talaromyces)、赤霉属(Gibberella)、青霉属(Penicillium)和曲霉属(Aspergillus),其中:A1、A4、X2及X22真菌接种显著促进了蓝莓株高增长;同时,A1、A4和X22接种显著提高了蓝莓的根系活力;A4、X2和X22接种对根际的酸化效果显著。对根际栽培基质及叶片中磷素含量分析表明,A4、X22处理组叶片总磷含量显著提高,而根际栽培基质中速效磷含量并未见降低,推断A4、X22形成的菌根可促进磷元素有效化。此外,在X22分泌物中检测到维生素B2的存在,而维生素B2与植物生长及抗逆性有关,暗示维生素B2的分泌或是杜鹃花类菌根的另一促生机制。     

陕北采煤沉陷区接种菌根对豌豆生长与品质的影响

选择陕北张家峁矿区黄土地,田间接种丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF),种植豆科作物豌豆(Pisum sativum L.),监测其生长、品质、产量和土壤理化特性。结果表明,接种菌根豌豆的菌根侵染率提高了16.11个百分点,菌根与豌豆可形成较好的共生关系。接种菌根后豌豆株高和SPAD比对照分别显著提高了52.34%和29.35%(P0.05),秸秆生物量和产量分别提高了22.69%、20.61%,菌根植株全氮和全钾含量比对照分别提高了12.72%和22.19%(P0.05),豌豆植株氮和钾总吸收量分别提高了38.74%和51.89%。接菌植物的品质改善,豌豆可溶性蛋白和可溶性糖分别提高了20.09%和47.99%。接种菌根对土壤电导率、速效磷、速效钾、有机质、全钾、全磷和全氮有增高的作用,对pH有降低的作用,但差异均未达显著水平。接种菌根对黄土农田植物生产力有较好的促进作用,微生物复垦对黄土高原农田生产力改良提供了一种较好的应用潜力。     

干旱胁迫对桃叶杜鹃菌根苗生长的影响

通过设置4个水分胁迫处理和3个接种处理,测定菌根苗木的根系形态、苗高、生物量、根冠比等指标,分析在干旱胁迫下不同菌根真菌对桃叶杜鹃生长效应的影响。结果表明:在正常水分条件下,接种ERM菌株显著提高了幼苗的苗高、叶面积,增加了幼苗地上部分与地下部分的生物量积累,促进了桃叶杜鹃幼苗的生长。在轻度水分胁迫下,桃叶杜鹃各处理苗的根系总根长、表面积及苗高均较其他处理高。但随着胁迫加剧,对照处理的苗高、叶面积逐渐降低,菌根苗的苗高在轻度胁迫时有所升高,而后随之下降,菌根苗叶面积下降幅度均小于对照。接种不同的菌株促生效果也不同,接种TY35比接种TY29对桃叶杜鹃幼苗在受到干旱胁迫时的缓解效果好。     

人参内生真菌培养基筛选及其代谢产物对玉米生长的影响

通过测定人参内生真菌RS在4种培养基上生长情况,结果发现:PDMA培养基最适合RS菌生长,并确定了种子液转接时间为48 h和发酵周期为96 h。通过发芽和盆栽试验对RS菌代谢产物活性进行了检测,结果发现,RS菌代谢产物能够促进玉米生长,每粒浓度为50 ng促生效果最佳,其中芽长、根长分别比对照高出25.13%、15.18%;株高、茎粗、苗鲜重、苗干重、根鲜重、根干重分别比对照高出10.57%、30.12%、17.94%、5.76%、34.22%、14.40%,可见RS菌具有较好的应用前景。     

IBA对蓝莓组培苗瓶内生根的影响

以斯巴坦(Spartan)及北陆(Northland)2个蓝莓品种试管苗为试材,研究外源激素IBA不同使用方法和使用浓度对蓝莓组培苗瓶内生根的影响,旨在提高其瓶内生根速度、质量,缩短瓶内生根时间。研究结果表明:将蓝莓苗浸蘸200 mg/L IBA中5 s后再接种到基本培养基中生根的方法,比将蓝莓苗直接接种到预先添加IBA的基本培养基中生根的方法好,有效提高了生根速度,缩短了生根时间,使有效苗生根率提高14%以上;2个蓝莓品种在相同的条件下生根无明显差异。     

蓝莓根际土壤真菌多样性及根腐病拮抗菌的筛选

为了解贵州栽培蓝莓根际土壤微生物多样性,筛选对蓝莓根腐病病原菌具有拮抗作用的微生物,采用平板稀释法和对峙培养法研究蓝莓根际土壤真菌多样性及其对蓝莓根腐病病原菌的拮抗作用。结果表明:80株菌株的菌落有明显差异,利用菌株r DNA–ITS序列进行BLAST比对,将80株菌株划分为11个属51个种,相似度为99%～100%。其中子囊菌门真菌共9个属、44个种、65株;接合菌门有2属,分别为孢球托霉属和毛霉属,7个种共15株。青霉属真菌为子囊菌门菌株的优势属,占子囊菌门菌株的33.85%;孢球托霉属真菌为接合菌门菌株的优势属,占接合菌门菌株86.67%。蓝莓根际土壤真菌数量为2.96×105 cfu/g,Shannon-Wiener多样性指数为2.046 1,Pielou均匀度指数为2.282 0,Margalef丰富度指数为0.853 3。在80株蓝莓根际土壤真菌中,对蓝莓根腐病病菌抑制率在50%以上的菌株有22株,抑制率在70%以上的有8株,其中日本曲霉、棘孢木霉和盖姆斯木霉菌株抑制效果最好,表现出良好的生防应用前景。     

滨海木麻黄菌根菌的筛选及其接种效应

利用3个内生菌根菌和10个外生菌根菌接种滨海木麻黄苗．测定小苗的树高、地径、地上千质量、地下干质量、总生物量和保存率．结果表明：接种两种菌根菌后能显著地促进滨海木麻黄苗期的生长；滨海木麻黄对供试的内生菌根菌和外生菌根菌的菌报依赖性都属于中等强度或较弱的依赖性；接种菌根菌后滨海木麻黄苗的保存率比对照显著提高；苏格兰球囊霉90068、地表球囊霉9004、苏格兰球囊霉90036、黄硬皮马勃0207、松茸和彩色豆马勃9705在促进滨海木麻黄苗期生长和提高保存率上都有较好的效果，可在滨海木麻黄苗期接种应用．