红刺玫愈伤组织诱导再生体系的建立

红刺玫(Rosa multiflora Thunb.var.cathayensis)为蔷薇科蔷薇属野蔷薇的一个变种,半常绿灌木,花色粉红。红刺玫以花期长、耐受高温和高湿气候等特性成为园林绿化的新宠[1]。但红刺玫的单瓣花和花色单一的缺陷限制了其广泛的应用,改良红刺玫花色引起园艺工作者的极大兴趣。然     

亚麻愈伤组织诱导和遗传转化体系建立

为了建立高效亚麻愈伤组织诱导体系,对亚麻的无菌苗培养、外植体愈伤组织诱导、愈伤组织继代扩增3个方面进行了研究。同时对农杆菌介导亚麻愈伤组织遗传转化条件进行了初步探索。结果表明,亚麻无菌苗接种培养基为MSB+1 mg/L 6-BA时有利于亚麻愈伤组织出愈,适合亚麻愈伤组织诱导的培养基为MSB+0.1 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA,或在此基础上添加1.0 mg/L 2,4-D,2种培养基在愈伤组织诱导阶段差别不大。愈伤组织继代扩增培养基为MSB+0.1 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA,在此培养基上,愈伤组织量在25 d时达到顶峰。由抗生素抗性试验得出亚麻愈伤组织卡那霉素抗性临界值为100 mg/L。亚麻愈伤组织转化的方式为浸泡材料15 min后抽真空5 min较好,遗传转化率为3.1%。经PCR分析验证,证明阿朴脂蛋白米兰突变体外源基因已经整合至亚麻抗性愈伤组织基因组中。     

小麦愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以普通小麦的成熟胚为试验材料,研究不同激素组合对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,小麦愈伤组织诱导效果最好的培养基为W5[MS+0.5 g/L水解络蛋白(CH)+2.0 mg/L 2,4-D+0.15 g/L天冬酰胺(Asn)],在此培养基中,成熟胚产生的愈伤组织质量最好,诱导率最高。对于不定芽诱导,最适培养基为WF8(MS+0.5 g/L CH+4.0 mg/L KT+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA),在此培养基中,愈伤组织分化产生的不定芽数量最多,速度最快,分化率最高。比较适宜诱导生根的培养基为WR4(1/2MS+0.5 g/L CH+0.5 mg/L NAA),在此培养基中,不定芽生根速度最快,数量最多,并且较为粗壮。本试验旨在探索小麦组织培养的最适条件,为今后通过基因工程手段改良小麦的品质奠定基础。     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

日本厚朴愈伤组织诱导的研究

本试验以B5培养基为基本培养基,采用正交试验比较了不同外植体和激素配比对日本厚朴愈伤组织的诱导影响,同时研究了光培养和暗培养对愈伤组织诱导的影响,结果表明:日本厚朴愈伤组织诱导的最佳外植体是顶芽、最佳愈伤组织诱导培养基为B5+2,4-D 4.0 mg/L+NAA 1.0mg/L,最佳的培养方式为暗培养.     

超甜玉米胚性愈伤组织诱导体系的建立

以超甜玉米自交系S1和品种粤甜3号为材料研究了影响愈伤组织诱导和胚性形成的几个关键因素。结果表明,2种基因型都是高诱导力的材料,自交系S1能够诱导出高质量的Ⅱ型胚性愈伤,是理想的基因转化材料。2,4-D浓度为2 m g/L时,2种基因型出愈率和胚性愈伤率达到最高,胚性愈伤率分别达到45.88%和35.00%;在培养基中添加9 m g/L的A gNO3极显著地提高了胚性愈伤率,比对照提高了31.25%;添加700 m g/L的脯氨酸,胚性愈伤率显著地提高了12.41%。据此建立了高效稳定的超甜玉米转基因胚性愈伤组织诱导体系。     

剑麻叶片愈伤组织诱导及再生体系的建立

以剑麻幼叶为外植体,进行愈伤组织的诱导试验,建立从愈伤组织到再生植株的培养体系。结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是N6＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L,而后愈伤组织转入MS＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L的培养基中48d便可诱导出芽,在生根培养基MS中生根率可达90％。     

本生烟草愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以本生烟草为材料,研究了不同激素组合对本生烟草愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明:当本生烟草叶片在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT培养基中培养时,其出愈率最高,愈伤组织生长状况最好;在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基中不定芽生长最快,但存在一定程度的玻璃化现象;MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基中不定芽长势较慢,但玻璃化程度较轻;对于生根诱导,MS、1/2MS培养基都可诱导不定根的产生,但NAA对根的生长更有效。     

苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。     

中国粗榧愈伤组织诱导及再生体系的建立

以中国粗榧(Chinesecephalotaxussinensis)茎尖、幼叶为外植体材料进行愈伤组织诱导,分化及再生苗的生根、移栽的主要影响因素,建立了中国粗榧的再生体系。结果表明,培养基以MS 6BA NAA 2,4D为佳,培养温度为28℃,相对湿度为70%,光照时间8h/d,3周后开始形成愈伤组织。0.1mg/L2,4-D在SH培养基上诱导愈伤组织分化成芽,分化率平均每块愈伤可达6.1±0.33个芽,最适生根条件为1/2MS 1.0mg/LNAA。     

玉竹愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系的建立

以玉竹叶片和根状茎为外植体,研究植物生长调节剂、碳源和pH对玉竹愈伤组织诱导的影响以及植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响,通过正交试验初步建立并优化玉竹愈伤细胞的悬浮培养体系。结果表明,叶片和根状茎愈伤组织诱导的最佳培养基均为MS+1.0mg·L~(-1)?6-BA+0.5mg·L~(-1)?NAA+30%蔗糖,培养基最佳pH5.6,叶片和根状茎愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合均为2.0mg·L~(-1)?6-BA+0.8mg·L~(-1)NAA,且根状茎愈伤组织的诱导率和增殖倍数均明显高于叶片。根状茎愈伤细胞悬浮培养的最佳接种量80g·L-1,最佳植物生长调节剂组合1.5mg·L~(-1)6-BA+0.6mg·L~(-1)?NAA,细胞生长曲线与多糖含量变化曲线均呈"S"形,细胞最佳继代周期16d,多糖含量在培养14d时最高,培养基pH呈先下降后上升然后趋于稳定趋势。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

栓皮栎胚性愈伤组织诱导及增殖体系的建立

由栓皮栎1个月生的实生苗上采集幼叶和茎段做为外植体诱导胚性愈伤组织.结果表明,NAA和BA结合使用(茎段和带叶柄的叶片:1.0～2.0 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1BA;不带叶柄的叶片:2.0～4.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-1BA)诱导的愈伤组织质量好,胚性愈伤组织较多,增殖能力强.2,4-D和KT结合使用(最适配比为:1.0 mg·L-1 2,4-D+1.0 mg·L-1 KT),虽然诱导时间短,诱导率高,但是愈伤组织质量差,多呈水煮样组织,胚性愈伤组织少并且增殖能力差.最优     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小（1.0、1.5和2.0 mm）的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明：以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为：将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基（N6＋24-D 1.5 mg/L＋L-脯氨酸0.7 g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L＋硝酸银5μmol/L）,在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖60 g/L＋gelrite 3 g/L）,继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖30 g/L＋gelrite3 g/L）进行光培养,2～3 d即可分化出苗;待幼苗长到4～5 cm高时,移至生根培养基（1/2 MS＋IBA0.8 mg/L＋蔗糖30 g/L）,14～21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。     

日本红枫愈伤组织诱导分化的研究

针对日本红枫的不同外植体部位、基础培养基类型以及不同浓度比例激素组合,进行愈伤组织诱导及增殖分化培养的研究。结果表明：以日本红枫嫩茎为外植体,愈伤组织启动诱导效果优于叶片;获得的愈伤组织增殖,最佳培养基组合为wPM培养基＋IAA（0．2mg／L）＋6-BA（0．6mg／L）;愈伤组织分化培养,WPM培养基＋IAA（0．1mg／L）＋6-BA（2．0mg／L）有不定芽发生。     

跳舞草愈伤组织的诱导及无性系建立

研究了跳舞草嫩茎愈伤组织的诱导、分化、生根及生根苗的移栽和扦插等,成功诱导出不定芽,使试管苗生根并移栽成活。试验证明:诱导跳舞草下胚轴愈伤组织的理想培养基是MS BA 0.5mg/l;诱导愈伤组织分化的理想培养基是MS BA 0.5mg/l NAA 0.1mg/l;诱导试管苗生根的理想培养基是1/2MS IAA 0.6mg/l,移栽和扦插的理想基质为炉灰渣。     

青钱柳愈伤组织诱导

为获得优质的愈伤组织,以青钱柳嫩茎和叶片作为外植体诱导愈伤组织,研究了不同的消毒方法、基本培养基和植物生长调节剂对青钱柳叶片和茎段愈伤组织诱导的影响.结果表明,以青钱柳茎段为外植体诱导愈伤组织,最佳的消毒组合为70％酒精10 s+0.1％升汞4min,污染和死亡率最低(18.0％),诱导率最高(95.0％).以青钱柳叶...     

茶树愈伤组织诱导

以茶树[Camellia sinensis (L.) O. Ktze.]种子在无菌条件下萌发的根和叶为外植体,探究在MS培养基中不同种类植物生长调节剂对茶树根和叶愈伤组织诱导的影响。结果表明,以幼根为外植体诱导愈伤组织的最适培养基为NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L,诱导率为85.1%;培养基NAA1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L为幼叶诱导愈伤组织的最适培养基,诱导率为87.0%。     

长春花愈伤组织诱导

长春花(Catharanthus roseus (L.)G.Don.)是夹竹桃科植物,全草入药,据报道有抗癌作用,其主要抗癌成分为长春碱和长春新碱[1].由于含量甚微[2],价格昂贵,人工栽培远远满足不了人们的需要.诱导愈伤组织是组织培养的第一步,是进行工业化生产的基础.曾有人先后在B5[3]、White[4]、Wo-L[5]、WoNiKo5-L[6]培养基上诱导出长春花愈伤组织,且在其上的继代培养也获成功.笔者在MS培养基上对于是否能诱导出长春花茎的愈伤组织进行了的探索.     

甜荞愈伤组织的诱导和离体再生体系的建立

以甜荞品种北早生为材料,以无菌苗的子叶和胚轴为外植体,研究荞麦愈伤诱导和分化再生植株的培养条件,建立荞麦组织培养再生体系。结果表明,人工去皮种子培养于1/2MS培养基,25℃恒温光照条件下可以得到大量健壮无菌苗;胚轴在附加2mg/L 2,4-D、1mg/L 6-BA的MS培养基中愈伤组织诱导率为100%,子叶在该培养基上诱导率也在90%以上;子叶来源的愈伤在2mg/L 6-BA、1.5mg/L KT培养基中分化效率为(64.0±6.9)%,胚轴来源的愈伤在2mg/L 6-BA、0.5mg/L KT培养基中的分化效率为(47.5±4.8)%;不定芽接种于0.6mg/L NAA的1/2MS培养基中生根率100%,经炼苗后移栽存活率可达70%以上。