病毒感染的干扰

干扰素是在病毒及其他诱导剂的作用下,机体细胞所产生的一种可溶性糖蛋白,是动物机体非特异性免疫体系的重要组成部分。干扰素通过激活细胞一系列抗病毒蛋白的表达,多环节阻断病毒的复制,从而使细胞建立起抗病毒状态。利用基因工程表达生产干扰素,为干扰素的临床应用奠定了基础;利用干扰素诱导剂促进机体内源性干扰素水平的提高,是干扰病毒感染的另一重要途径.     

干扰素诱导剂对猪瘟疫苗免疫力的影响试验

鸡新城疫(ND)Ⅰ系苗作为干扰素诱导剂对猪病毒性腹泻的防治作用已有成功的报道.其原理是通过ND-Ⅰ系苗感染猪体后,诱导猪体产生干扰素,从而阻碍了其它病毒在猪体内的增殖,达到防治猪病毒性腹泻的目的.但是,如果ND病毒在猪体内同样干扰猪瘟弱毒苗的增殖,而影响猪瘟疫苗的免疫反应,则它的应用价值不大.为此我们进行了ND-Ⅰ系苗对猪瘟疫苗免疫力影响的试验.     

抗病毒免疫分子IFITMs的研究进展

干扰素诱导跨膜转运蛋白是细胞内具有广谱抗病毒作用的抑制因子.其属于dispanin蛋白家族中的一个亚族并具有多种功能,其中其抗病毒功能是主要的研究热点.由于IFITMs,尤其IFITM3,能抑制禽流感等病毒的早期复制因而近年来得到了广泛的关注.目前研究发现,IFITMS主要通过核内体途径阻止病毒的入侵,从而影响病毒的复制.然而,其具体的抗病毒机制还未完全阐释清楚.本文就近年来IFITMs蛋白抗病毒功能的研究进展对其结构特征、细胞亚定位及其抗病毒机制等方面作一一综述.     

干扰素诱导剂在动物临床上的应用

传染病是造成当今养殖业损失的主要因素之一,在众多传染病中,病毒病可为众病之首,占40%左右。目前,广大畜牧兽医工作者对病毒防治方面还没有很大的进展,在养殖中出现病毒时仅用些清热解毒、消肿散结的中药或抑制病毒酶系统及DNA、RNA复制,减缓病毒在肌体内增殖的药物,如巴韦林、金刚烷胺等。最近几年,广大畜牧兽医工作者又人工合成了新的抗病毒药物——干扰素诱     

Bta-miR-677靶向线粒体抗病毒信号蛋白影响Ⅰ型干扰素的生成

旨在探究bta-miR-677调控Ⅰ型干扰素（IFN）表达的分子机制。将bta-miR-677转染MDBK细胞,检测Ⅰ型IFN和干扰素刺激基因（ISGs）的转录水平;随后通过TargetScan预测bta-miR-677的靶基因,双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot验证bta-miR-677的靶基因;利用siRNA敲减验证靶基因对Ⅰ型IFN转录的影响。结果显示,过表达bta-miR-677组IFN-α/β的转录水平高于对照组2~4倍（P<0.001）,随后检测到6种ISGs（IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2）转录量上调2~16倍（P<0.01或P<0.001）;反之,抑制表达bta-miR-677组IFN-α/β转录量下调（P<0.01或P<0.05）,同时IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2转录量下调（P<0.05或P<0.01）。经TargetScan预测和双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot检测显示,bta-miR-677可靶向结合线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）的3'-UTR,抑制MAVS蛋白的表达;MAVS基因敲减后发现,IFN-α、IFN-β和6种ISGs转录量上调。研究结果表明,bta-miR-677通过靶向MAVS上调IFN-α/β转录水平,进而提高ISGs的表达量,为基于bta-miR-677研制抗病毒药物提供了重要资料。     

奶牛α-干扰素克隆表达和生物学活性分析

提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α-干扰素(BoIFN-α)成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为牛α-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达,表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛α-干扰素对VSV的抗病毒活性为4.26×105U/mL,对IBRV的抗病毒活性为8.91×104U/mL。结果表明,重组奶牛α-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。     

奶牛β-干扰素在大肠杆菌中高效表达和生物活性分析

提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的40%。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛β-干扰素抗病毒活性分别约3.16×105U/mL,7.5×104U/mL。结果表明,重组奶牛β-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。本研究为研制和开发重组奶牛β-干扰素类生物制品研发奠定了基础。     

干扰素诱导剂及其在兽医临床上的应用

在当今养殖业中,传染病是造成养殖业损失的主要因素.在众多传染病中,病毒性疾病可为众病之首,约占40％左右.但在病毒性疾病防治方面还没有很大的进展.在养殖中出现病毒性疾病时仅用些抗病毒药物,如清热解毒、消肿散结的中药或抑制病毒酶系统及DNA、RNA复制,减缓病毒在机体内增殖的药物,如巴韦林、金刚烷胺等.最近几年,人工合成了新的抗病毒药物——干扰素诱导剂.为了让众多的从事临床诊断的工作者更好的了解干扰素诱导剂及其应用,现介绍如下.     

干扰素诱导剂的应用

在当今养殖业中，传染病是造成养殖业损失的主要因素之一,在众多传染病中，病毒病可为众病之首，约占40％。     

Tubacin对蓝舌病毒感染的抑制作用

蓝舌病(bluetongue,BT)是由蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)感染反刍动物,包括山羊、绵羊、水牛和骆驼等,引起的非接触性传染病,以口腔、鼻腔及胃黏膜发生溃疡性炎症病变为主要特征,库蠓是其主要传播媒介。BTV传播相当广泛,除了南极洲外的所有洲都有发现,近20年间在欧洲肆虐传播,造成了巨大的经济损失。目前发现的BTV包含26个血清型,型间没有交叉保护作用,使用传统疫苗只能提供部分保护。虽然目前已经有针对多种血清型BTV重组疫苗的研究,但保护效果并不理想。因此,研究防治BT的药物具有重要的应用价值。本研究发现,组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的特异性抑制剂Tubacin能够抑制13型BTV感染,通过半定量PCR、Western blot、TCID_(50)等试验验证,Tubacin处理后细胞病变减轻,病毒RNA和蛋白表达水平下降,上清中病毒粒子含量减少。结果证明Tubacin可在一定程度上抑制BTV感染,Tubacin是抗BTV的候选药,HDAC6可能是抗BTV感染的靶点之一。     

家禽干扰素的分类及应用

干扰素是一类仅由脊椎动物单核细胞和淋巴细胞在受到病毒或其他诱生剂的作用时产生的一种具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种生物学活性的分泌性可溶糖蛋白。随着基因工程方法的发展,外源表达干扰素已经进入了工业化生产阶段,并且大量投放市场,在医药、生物和农业等多个行业领域中广泛应用。近年来,随着人们对禽类干扰素研究的逐步深入,干扰素在一些禽类病毒性疾病及肿瘤性疾病治疗方面取得的良好进展。本文现就家禽干扰素的分类,家禽干扰素的抗病毒活性以及家禽基因工程重组干扰素的应用做以综述。     

流感等病毒感染过程中STATs蛋白非细胞因子依赖性的早期激活

STATs蛋白在宿主抗病毒应答中具有重要功能,但对其在病毒感染早期的作用研究不多。为确定STATs蛋白在病毒感染早期的激活,本文采用甲型流感病毒H1N1亚型的不同毒株（WSN和PR8）和伪狂犬病毒（PRV）分别感染细胞或基因敲除小鼠,利用Western blotting分析STAT1和STAT3酪氨酸位点的磷酸化水平。结果显示,病毒感染早期阶段的干扰素等细胞因子产生时,可直接诱导STAT1和STAT3的激活。该结果表明非细胞因子依赖性早期抗病毒的天然免疫应答反应的存在,不仅为阐明病毒-宿主互作的分子基础提供新的理论依据,也为筛选新型抗流感病毒药物靶标提供了新思路。     

类泛素蛋白 ISG15研究进展

干扰素刺激基因15蛋白（ISG15）是一种类泛素蛋白,可在干扰素刺激下由 isg15基因编码产生。其在序列、结构和功能上均与泛素类似,能够通过酶级联反应共价修饰靶蛋白。ISG15及其类泛素修饰系统参与免疫应答,是干扰素发挥抗病毒效应的重要途径。目前已证明 ISG15可针对多种病毒发挥抗病毒活性,包括逆转录酶病毒、大 DNA 病毒、正链 RNA 病毒和负链 RNA 病毒等。论文综合近年来的研究成果,对 ISG15及其类泛素修饰系统进行了简要介绍,并重点讨论了 ISG15的抗病毒活性及其机制。     

科普园地

三黄片可治兔细菌性痢疾三黄片是一种价格便宜的常用中成药,由大黄、黄连、黄苓三味药配成,用于治疗兔的急性细菌性痢疾。每只病兔每次口服三黄片1片,幼兔半片,温开水送服。每天3次,连服3d,即有特效。妊娠母兔不能服用。糊米加食醋可治牛腹泻用高粱或稻谷600～800g,食醋1000mL。将高粱或稻谷放入锅内用文火炒成黑色糊米,研成细末,然后倒入食醋中混合调匀,给病牛1次灌服,每天2次,止泻后再治疗2～3次,以巩固其疗效。(李正飞)轮状病毒性肠炎的治疗方法本病是由轮状病毒引起多种幼龄动物的一种病毒性腹泻。临床上表现为患病动物萎顿、厌食、呕…     

γ-干扰素的研究及应用进展

γ-干扰素自被发现以来,由于其广谱抗病毒、抗肿瘤活性及其强大的免疫调节作用而受到研究者们的重视,在其基因结构、作用机理以及体外重组表达等方面都取得了巨大突破。本文综述了γ-干扰素的基本特性、生物学活性和在畜牧业的作用及其研究进展。     

动物干扰素研究概况

随着我国养殖业的迅猛发展,各种疾病的发生和危害日益加重,特别是病毒性疫病,已成为传染病的主体。对于病毒性疾病的治疗仍然缺乏有效的药物,且大多数尚无效果可靠的疫苗,再加上新发和再发病不断出现,使得病毒病危害尤为突出,急待寻找提高机体免疫、抵抗病毒感染的替代药物。干扰素(IFN)作为一种细胞因子具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性,还可以促进机体免疫反应,提高机体抗病毒感染能力,使病毒在机体存活和复制的几率降到最低。目前发现Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型3种类型的IFN,利用3种类型的IFN的抗病毒和调节免疫的功能,研究抑制病毒复制的新型生物制剂,成为人们关注和研究的热点,为病毒性疫病,特别是新发或突发的重大疫病防控提供参考。     

聚肌胞对雏鸡新城疫抗体水平的影响

为研究聚肌胞(polyinosinic-polycytidylic acid,PolyI:C)对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响,在肉仔鸡7日龄免疫的前后注射PolyI:C,并测定各处理组中雏鸡血清抗体水平.结果显示,免疫之前48、24和12h注射Polyl:C,雏鸡血液中抗体效价仅在10日龄明显升高;免疫新城疫疫苗的同时及免疫之后12、24h注射PolyI:C,9～12日龄雏鸡血清抗体滴度均明显提高.PolyI:C可以提高雏鸡免疫抗体滴度,对由弱毒苗刺激的免疫反应具有调理作用.