腈水合酶研究进展

从腈水合酶的结构、分布、酶学性质及其基因克隆和生产中的利用形式等方面简要阐述了腈水合酶的研究进展。     

腈水合酶研究进展

该文简要阐述了腈水合酶的结构、分布、酶学性质及其基因克隆和生产中的利用形式。     

丙烯腈水合酶产生菌光滑型菌落对丙烯酰胺生产的影响

从丙烯腈水合酶产生菌Nocardia .sp 16 3中分离到光滑型 (S)和粗糙型 (R)两种不同形态的菌落 ,经分析测定 ,两种菌落都能产生丙烯腈水合酶。其中光滑型 (S)菌落酶活力达 85 5 μmol/mL ,h高于粗糙型 (R)菌落酶活性的 14 % ,经t测验 ,当t0 .0 5=2 .36时 ,t=3.16 ,光滑型菌落的产酶特性达到显著效果。在催化腈水合生成丙烯酰胺的反应中 ,产生的杂质成分丙烯酸的含量低于粗糙型 (R)菌落的 5 1% ,对生产中提高丙烯酰胺的收率和纯度有重要意义     

腈水合酶产生菌发酵条件的优化及其酶学性质研究

通过腈水合酶生产菌Rhodococcus sp．SHZ-1菌株的发酵过程研究，阐明了发酵液pH、葡萄糖含量以及细胞浓度变化与酶活之间的关系。在发酵过程中调节pH以及补加葡萄糖，使酶活从2294U／mL，增加到5226U／mL，提高了1．28倍。腈水合酶的酶学性质研究表明，温度30℃，反应体系在pH中性范围酶活达到最高。该酶对于底物有很强的耐受性，丙烯腈浓度为7．2％时，酶活最高；产物丙烯酰胺浓度过高，则会严重抑制酶的活性。     

腈水合酶产生菌的分离筛选和酶反应条件的优化

从化工废水处理厂的活性污泥中分离和筛选到一株腈水合酶产生菌HUST-1。经初步鉴定,菌株HUST-1属于红球菌属(Rhodococcus sp.)。对菌株(Rhodococcus sp.)HUST-1所产腈水合酶的反应条件进行研究,结果表明,该菌株的最优酶反应条件:丙烯腈加入量为5%,反应温度为28℃,pH值为7.0,反应时间为15min。在最优酶反应条件下,菌株(Rhodococcus sp.)HUST-1的最高比酶活可达119U·mg-1,比优化前提高24.5%。     

复合诱变选育腈水合酶高产菌株

[目的]选择有效的方法选育稳定的腈水合酶高产菌株。[方法]以Rhodococcus sp．HUST为出发菌株,采用紫外线和硫酸二乙酯对其进行复合诱变处理,选育出酶活力高的突变株进行培养并测定腈水合酶活性。[结果]菌株HUST复合诱变的条件为：出发菌株在距离为15cm时紫外诱变45s后再经1．1％的硫酸二乙酯诱变处理20min,然后进行有利突变株的筛选,通过初筛、复筛和遗传稳定性试验,获得1株遗传性状稳定的腈水合酶高产菌株HUST-1,其酶活高达698．6U,比诱变前提高了68．3％。[结论]通过紫外线和硫酸二乙酯复合诱变能选育出有较高腈水合酶活力的菌株。     

三重诱变选育腈水合酶高产菌株

[目的]获取高产的腈水合酶产生菌。[方法]以腈水合酶产生菌诺卡氏菌（Nocardia sp.）为出发菌株,采用加热、紫外线（UV）照射、硫酸二乙酯（DES）处理三重复合诱变,研究不同诱变剂量对致死率和正突变率的影响,选育腈水合酶高产菌株,并研究底物类似物乙腈对该菌株腈水合酶活性的影响。[结果]从中筛选出1株稳定、高活力的腈水合酶生产菌,所产腈水合酶最高活性提高到1 238万U。在一定浓度下,随着底物类似物乙腈浓度的增大,菌株正突变率和所产腈水合酶最高酶活增大,但超过一定浓度后正突变率和最高酶活反而下降。[结论]获得了1株稳定的腈水合酶高产菌株,所产腈水合酶活性高达1 238万U。底物类似物乙腈对该菌株的正突变率和所产腈水合酶最高酶活性有一定的影响。     

诺卡氏菌产高活力腈水合酶补料分批发酵工艺的优化

[目的]优化诺卡氏菌产腈水合酶的发酵工艺,获得高活力的腈水合酶。[方法]对诺卡氏菌(Nocardiasp.)发酵产腈水合酶过程中菌体生长、pH变化以及葡萄糖消耗对腈水合酶合成的影响进行了分析。[结果]在分批补糖工艺中,使发酵液的葡萄糖浓度维持在1.5～6 g/L,发酵结束时,发酵液酶活达到2 814.3 U/ml,是优化前的8.7倍。[结论]分批补糖工艺增加了菌生长的生物量,大大提高了诺卡氏菌的产酶水平。     

腈水合酶产生菌株的固定化载体选择

[目的]筛选适合腈水合酶产生菌株Rhodococcussp.HUST-3的最佳固定化载体。[方法]采用海藻酸钠、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、壳聚糖、琼脂进行腈水合酶产生菌株Rhodococcussp.HUST-3固定化载体研究,并进行海藻酸钠-聚乙烯醇、海藻酸钠-聚丙烯酰胺和海藻酸钠-壳聚糖复合固定化研究。[结果]结果表明,海藻酸钠-聚乙烯醇复合载体固定化腈水合酶产生菌株的相对酶活为93.1%,具有较好的机械强度,但固定化载体的反应批次较少,仅为7次;海藻酸钠-聚丙烯酰胺复合固定化载体具有较好的机械强度和耐磷酸盐程度,但是酶活相对较低,只有92.7%;海藻酸钠-壳聚糖复合固定化菌株的机械强度和耐磷酸盐性能都较高,相对酶活可达97.6%,能够进行12批次连续水合反应。[结论]海藻酸钠-壳聚糖为腈水合酶产生菌株的最适固定化载体。     

一株产几丁质酶菌株的筛选及产酶条件研究

用几丁质作为唯一碳源,从水稻田土中成功分离筛选出一株具有较强几丁质分泌能力的菌株JDZ1。通过单因素法对此菌株生长条件进行优化,结果表明最佳理化条件为:温度35℃、pH7.6,转速250rpm,发酵28h。同时,采用酶活力测定优化研究,结果显示,在温度为35℃、pH7.5条件下,酶活力最强。     

TMPD降解菌Klebsiella oxytoca的鉴定

从疯草生长的土壤环境中分离并筛选出一株TMPD降解菌LF-1,通过形态学观察、生理生化特征测定和16S rDNA序列同源性分析对其进行了鉴定.结果表明:LF-1的形态及主要生理生化特征与产酸克雷伯氏杆菌一致,而且与产酸克雷伯氏杆菌(DQ226215)的16S rDNA序列同处于一个最小的分支,同源性达到99.52%.由此确定TMPD降解菌LF-1属于产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca).     

苹果黄色叶螨(Eotetranychus Sp.)生物学特性的研究

苹果黄色叶螨是近年四川省三州苹果产区发生的一种害螨。该螨在雅安一年发生8～9代。以部分第8代和第9代雌成螨越冬。越冬雌成螨于次年3月上、中旬开始活动,以两性生殖及孤雌生殖繁殖后代。全年中越冬代历期长约5个多月,其余各代约1.5个月。各虫态历期因世代不同而异。各代雌螨寿命及产卵量,以越冬代及春、秋代寿命长,产卵量高。     

香椿皂苷的提取及抑菌活性的研究

用工业酒精作为溶剂对香椿皂苷进行了提取,并用石油醚、乙酸乙酯、饱和正丁醇依次萃取,再用甲醇-乙醚混合液对香椿皂苷进行了纯化,用颜色反应对香椿皂苷进行了检识,采用抑菌圈法探讨了香椿皂苷的抑菌浓度及效果.结果表明:香椿老叶中含有三萜皂苷和甾体皂苷,香椿皂苷对大肠杆菌、变形杆菌、产气杆菌都具有一定的抑菌作用,而且抑菌活性在浓度为1.0mg/ml时最大,香椿皂苷溶液对苹果褐腐、黄瓜炭疽、黑曲霉、青霉则无抑菌作用.     

产几丁质酶链霉菌SO1菌株的筛选及培养条件

从土样中分离获得的链霉菌ＳＯ１菌株在产酶培养基中，２８℃振荡培养７天，其胞外几丁质酶活力可达１８０９ｕ／ｍｌ。实验表明，不同碳、氮源及诱导物对ＳＯ１菌株产几丁质酶有不同的影响，以酵母粉对产酶的促进作用最为明显，比对照提高了７５．２％。部分脱乙酰几丁质、胶体几丁质及几丁质均可作为ＳＯ１菌株产几丁质酶的诱导物，其中以几丁质诱导产酶的效果最好。     

宜昌泡桐雌雄配子体发育及其生殖过程的研究

本文系统的研究了宜昌泡桐(Paulownia sp.)雌雄配子体发育过程,并着重探讨了与育性有关的机制。结果表明,宜昌泡桐雌雄配子体形成过程中都存在着大量败育现象。雌配子体的败育和大量落蕾是宜昌泡桐不结实或少结实的直接原因。还探讨了宜昌泡桐种群内存在着明显育性差异的原因。     

粉白金龟幼虫空间分布型及抽样技术的研究

<正>研究昆虫在自然环境中的空间分布型,对阐明其种群特征具有一定的意义。通过研究,不仅可以揭示出种群的空间型特征,有助于进行精确而有效的抽样设计,而且可以通过种群分布的各种信息,分析害虫的生物学特性和对环境条件的适应程度,同时亦可对研究资料提出适当的数理统计方法,有助于提高测报质量和防治技术。     

梅花鹿多杀性巴氏杆菌病病原体的分离鉴定及其荚膜分型的研究

以疑似巴氏杆菌病死亡鹿的肝、脾及心血经改良马丁琼脂平板分离培养后,进行染色、镜检、多种糖发酵试验、吲哚试验、硝酸盐还原试验、甲基红试验、V.P.试验及硫化氢试验、小白鼠接种、间接血球凝集荚膜分型试验,确定该病的病原体为多杀性巴氏杆菌。该株多杀性巴氏杆菌革兰氏阴性,发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、甘露醇、半乳糖,产酸不产气;不分解乳糖、麦芽糖、菊糖、甜醇、山梨醇、肌醇、棉子糖、产生吲哚,还原硝酸盐,甲基红及V.P.试验阴性,不产生硫化氢,荚膜型为B型。     

苹果黄色叶螨(Eotetranychus sp.)种群空间分布型的研究

本文根据田间调查资料,用7种检验分布型的方法进行检定,得出苹果黄色叶螨的分布型呈聚集分布。聚集程度是卵>若螨>成螨。成、若螨是以松散个体群存在,卵是以紧密个体群存在。以各虫态平均密度横向看,中部显著高于其它方位。从纵向看,各方位都显示出若螨>卵>成螨的规律。     

黄芪多糖和香菇多糖对雏鸡SOD活性的影响

１日龄肉用ＡＡ雏鸡１０５只随机分成健康对照（Ｃ）、黄芪多糖（Ａ）和香菇多糖（Ｌ）３组，经５６日临床观察并测定脾脏、胸腺、法氏囊、心脏、肝脏、肾脏和性腺超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性．与健康对照组相比，黄芪多糖组雏鸡和香菇多糖组雏鸡的ＳＯＤ活性于７日龄显著降低（Ｐ＜０．０５），并于２８日龄后升高和显著升高（Ｐ＞０．０５，Ｐ＜０．０５）．香菇多糖初期使用优于黄芪多糖，而黄芪多糖中后期使用优于香菇多糖．     

西瓜枯萎病田间症状类型及侵染来源的研究

西瓜枯萎病(Fusarium axysporum f.sp.nuveum)在田间的症状表现有猝倒型、侏儒型和萎蔫型三种类型。此病的初侵染来源是土壤,病残体、种子及未经腐熟的农家肥。通过土壤、种子及粪肥蒂菌和灌水进行远、近距离的传播。种子表面和内、外部均可带菌。病残体内可带有大量的分生孢子和菌丝体。一株死病株体内约含六千万至一亿多个分生孢子。因此西瓜枯萎病是一种侵染来源广的维管束病害。