纸片法药敏试验失败的原因分析及解决措施

<正>兽医临床常用的药敏试验方法主要有两种,即扩散法和稀释法。扩散法属手工测试方法,通过测试药物纸片或者牛津杯在固体培养基上的抑菌圈的大小,判断细菌对该种药物是否敏感。稀释法包括试管稀释法和微量稀释法,通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况,判断其最低抑菌浓度(MIC)。由于扩散法操作简单,成本低,已经被大多数兽医临床实验室和基层单位所采用。扩散法又包括纸片法、牛津杯法和打孔法,目前兽医临床应用较多的方法是纸片法,以下针对该法进行分析。     

猪链球菌和猪大肠杆菌对19种药物的敏感性分析

选取19种临床常用抗菌药物,采用纸片扩散法及试管二倍稀释法分别对猪链球菌和猪大肠杆菌韶关分离株进行药物敏感性分析,旨在为兽医临床用药提供参考。结果表明,猪链球菌和猪大肠杆菌对所选药物呈多重耐药,且耐药谱广。其中,猪链球菌对环丙沙星、呋喃妥因、菌必治、氨苄青霉素、青霉素G等高度敏感,对阿奇霉素、罗红霉素、先锋霉素Ⅴ、氯霉素、林可霉素耐药,耐药率为26.3%;猪大肠杆菌对先锋霉素Ⅴ、菌必治、阿米卡星、复达欣高度敏感,对罗红霉素、氨苄青霉素、青霉素G、羧苄青霉素、林可霉素、氯霉素和阿莫西林耐药,耐药率为36.8%。     

犊牛腹泻性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

文章为了解甘肃某规模化牛场导致犊牛腹泻发生的致病菌并对其临床常规用药的耐药性,试验采用常规培养、革兰染色镜检和生化试验等方法对致病菌进行分离鉴定,利用药物纸片琼脂扩散法对分离的菌株进行药敏试验。试验结果表明,引起牛场犊牛腹泻的主要致病菌为大肠杆菌;对头孢哌酮和头孢呋辛药物中度敏感;对头孢他啶、米诺环素、头孢曲松和头孢唑林药物敏感;对红霉素、氨苄西林、强力霉素等药物产生耐药性。     

中药"止泻散"防治仔猪腹泻病的试验研究--单味中药及复方的体外抑菌试验

本试验采用纸片法和试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,观察复方制剂中药“止泻散”及其组成成分中的五味中药:白头翁、秦皮、黄柏、苦参、马齿苋,对引起仔猪腹泻的常见细菌大肠杆菌及沙门氏菌的抑菌圈大小及其最小抑菌浓度(MIC)。     

中药“止泻散”防治仔猪腹泻病的试验研究——单味中药及复方的体外抑菌试验

本试验采用纸片法和试管二倍稀释法进行体外抑菌试验，观察复方制剂中药“止泻散”及其组成成分中的五味中药：白头翁，秦皮、黄柏、苦参、马齿苋，对引起仔猪腹泻的常见细菌大肠杆菌及沙门氏菌的抑菌圈大小及其最小抑菌浓度(MIC)。     

浅谈纸片扩散法药敏试验

纸片扩散法药敏试验主要是观察兽医临床用药中抗生素的抑菌效果的一种检测方法，是基层单位选择药物治疗经常进行的工作之一。药敏试验的方法很多，常用的方法有纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法、Etest法、自动化药敏仪测定等。目前正在研制和推广的方法还有DNA异源双链分析法、     

乙酰甲喹对畜禽常见致病菌的体外抗菌活性研究

利用纸片扩散法和试管二倍稀释法验证了乙酰甲喹注射液对畜禽常见致病菌的体外抗菌效果。纸片扩散法结果表明,乙酰甲喹注射液对禽大肠杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、鸡巴氏杆菌、链球菌、绿脓杆菌高度敏感,对金黄色葡萄球菌中度敏感。试管二倍稀释法结果表明,乙酰甲喹注射液对畜禽主要致病菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.004～0.036μL/mL,最小杀菌浓度为(MBC)为0.009～0.036μL/mL。该研究结果表明,乙酰甲喹注射液对常见的病原菌有较好的抗菌效果,适合临床使用。     

中药"肤螨灭"治疗犬皮肤病体外抑菌试验及临床疗效观察

采用药敏纸片法和试管二倍稀释法对犬蠕形螨皮肤病分离细菌进行体外抑菌试验,观察复方中药制剂肤螨灭、庆大霉素、青霉素等对犬蠕形螨皮肤主要致病菌（中间型葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌）的抑菌效果及肤螨灭的最小抑菌浓度（HIC）。通过肤螨灭对犬蠕形螨皮肤病的临床疗效试验,     

中药“肤螨灭”治疗犬皮肤病体外抑菌试验及临床疗效观察

采用药敏纸片法和试管二倍稀释法对犬蠕形螨皮肤病分离细菌进行体外抑菌试验,观察复方中药制剂肤螨灭、庆大霉素、青霉素等对犬蠕形螨皮肤主要致病菌（中间型葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌）的抑菌效果及肤螨灭的最小抑菌浓度（HIC）。通过肤螨灭对犬蠕形螨皮肤病的临床疗效试验,     

沙枣水提物体外抗菌作用研究

目的:探讨新疆沙枣水提取物在体外抗菌作用。方法:采用纸片琼脂扩散法(KB法)和试管连续(对倍)稀释法对新疆沙枣水提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、铜绿假单胞菌等菌株的抑菌圈直径,抗菌活性,最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)进行实验研究。结果:新疆沙枣水提取物在体外对对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、铜绿假单胞菌等其他菌种都没有抑菌效果,只对褔氏痢疾杆菌有轻微的抑菌作用。结论:新疆沙枣水提取物对褔氏痢疾杆菌有一定的抑制作用。     

犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为确定引起湘西北地区某肉牛养殖场犊牛腹泻发生的致病菌种类并分析其耐药性,采用常规培养、革兰染色镜检和生化试验等方法对致病菌进行分离鉴定,利用药物纸片琼脂扩散法(Kirby-Bauer)对分离菌进行药敏试验。结果表明,引起犊牛腹泻的主要致病菌为大肠杆菌;临床分离的大肠杆菌对头孢哌酮、头孢唑林、米诺环素、头孢曲松4种抗生素敏感;对头孢呋辛和头孢他啶2种抗生素中度敏感;对头孢氨苄、哌拉西林、红霉素、万古霉素、强力霉素、青霉素、氨苄西林、羧苄西林、麦迪霉素、环丙沙星、链霉素、丁胺卡那霉素、头孢拉定、庆大霉素、卡那霉素、苯唑西林、复方新诺明、诺氟沙星、奥复酸、四环素、多西环素、林可霉素22种抗菌药物产生耐药性。分离出的大肠杆菌对多种抗菌药物产生耐药性,研究结果为养殖场科学诊断和治疗犊牛腹泻提供了有效依据。     

皖西地区部分养殖场户畜禽大肠杆菌耐药性调查

通过对2012-2013年临床接诊动物病料的细菌培养、染色镜检和生化鉴定,分离出不同畜禽源大肠杆菌133株,包括鹅源57株,鸡源29株、鸭源17株、猪源21株、羊源9株。试验采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法对不同畜禽源大肠杆菌进行药物敏感试验。结果显示:试验菌株对14种临床常用药物耐药现象严重,且多表现为多重耐药性。     

中草药对肉鸡源大肠杆菌的体外抑菌试验报告

选用25种不同的中草药,煎制后,以平板稀释法对肉鸡源大肠杆菌进行定性抑菌试验,以纸片法进行定量抑菌试验。结果表明,有16种中草药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。     

利用三种不同抑菌方法研究中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响

本试验以地榆水煎液为试验药物,以标准金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌为试验菌株,采用琼脂平板扩散法（打孔法）、液体培养基连续稀释法（试管法）和固体培养基连续稀释法,观察中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响。结果表明,药物固体培养基连续稀释法比其他两种方法敏感性高,重复性好,能直接定量测出抗菌药物对奶牛乳房炎常见病原菌的最低MIC值,更适于中药体外抑菌作用的研究。     

苦豆子碱对产β-内酰胺酶动物源性菌株的药敏分析

目的:了解40株动物源性大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌对β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,在此基础上探讨苦豆子总碱对产β-内酰胺酶动物源性阴性菌株的抗菌活性,目的筛选出能够逆转耐药菌株的中药。方法:以肉汤稀释法和纸片扩散法筛选产超光谱β-内酰胺酶耐药菌株。以琼脂稀释培养法、试管稀释法、活菌计数法检测苦豆子总碱对大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌的体外最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:40株大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌共有16株为产超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药菌株,苦豆子总碱在体外对抗生素敏感株、产β-内酰胺酶(ESBLs)耐药菌株和产超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药菌株均有较好的抑菌作用。     

西藏牦牛大肠杆菌耐药性调查

对西藏部分牧区牛源大肠杆菌进行耐药性考察,在对发病牦牛进行致病性大肠杆菌分离鉴定、纯化培养的基础上,采用美国NCCLS规定的纸片扩散法进行药敏试验,结果表明,分离培养的10株牛源大肠杆菌对头孢氨苄、头孢唑林、卡那霉素、阿米卡星、磷霉素、喹诺酮类药物的敏感率均为100%,可为临床合理选药、有效治疗牦牛大肠杆菌病提供依据。     

不同地区鸡大肠杆菌菌株分离与耐药性试验

对来自不同地区的10株鸡大肠杆菌分离株，用纸片扩散法进行了药敏试验，结果表明，丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素，庆大霉素等对鸡大肠杆菌为最敏感药。     

上海市猪丹毒杆菌流行株耐药性分析

为了解上海市猪丹毒杆菌流行株的耐药状况,对上海市2011—2017年分离到的猪丹毒杆菌采用纸片扩散法(K-B法)和微量肉汤稀释法(MIC法)进行药敏试验,同时对临床分离株与健康带毒株的MIC结果进行比较.结果显示:所有菌株对β-内酰胺类和大环内酯类药物敏感,而对林可霉素、四环素类、氯霉素类、喹诺酮类等原本敏感的药物,已...     

鸡大肠杆菌TTC快速菊敏试验方法研究

细菌药敏试验结果是临床治疗细菌性感染时合理选用药物、提高疗效和避免滥用抗菌药物的重要依据。目前，兽因临床上进行药敏试验通常采用纸片扩散法（K—B法）和试管稀释法，但这两种方法均需16～18h才能报告试验结果。几十年来，医学界不断对体外药敏试验方法进行探索、研究，希望能找到更加快速、实用的方法。经过我国兽医工作者的不懈努力，最终找到了一种试验成本低、报告时间不及K—B法1／3的鸡大肠杆菌TTC显色快速药敏试验方法。     

万菌杀星对畜禽致病菌的敏感性试验

用试管稀释法进行了万菌杀星对十余种畜禽致病菌的敏感试验，结果表明万力杀星对鸡沙虫氏菌、金葡萄球菌、猪彤毒杆菌、乳房链球菌等细胞高度敏感，对大肠杆菌、变形杆菌、克雷伯氏菌、诺卡氏菌等也较为敏感，是一种广谱高效的抗菌新兽药。