月季乙烯受体基因的全长克隆及原核表达分析

 利用已构建的月季花朵转录组数据库,筛选得到了22个与乙烯受体同源性较高的UniGene片段,并利用这些片段从月季花瓣中克隆得到了3个乙烯受体基因全长,分别为RhETR1、RhETR3和RhETR5。其中,RhETR1全长为2 814 bp,编码一个595 aa的肽链;RhETR3全长为2 468 bp,编码一个765 aa的肽链;RhETR5全长2740 bp,编码一个742 aa的肽链。这3个基因推定的编码蛋白分别与枣（Ziziphus jujuba）中的ZjETR1、杨树（Populus trichocarpa）中的PtETR2和砂梨（Pyrus pyrifolia）中的PpERS2同源性最高,依次为85.2%、75.8%和80.3%。蛋白同源性及结构分析表明,RhETR1和RhETR5分别与拟南芥中的ERS1和ETR1结构相似,属于第1亚家族成员,RhETR3与ERS2结构相似,属于第2亚家族成员。在花朵自然瓶插过程中,这3个基因分别表现为下调、上调和组成型表达。利用原核表达载体,选择和月季花朵开放最为相关的RhETR3,获得了和理论分子量一致的重组蛋白,表明克隆得到的RhETR3具有完整的读码框。     

切花月季Rh-DREB1基因的克隆及其在乙烯和失水胁迫下的表达

以切花月季Rosa hybrida 'Samantha'为试材,通过简并引物和RACE方法从花瓣中获得了两个逆境诱导转录因子DREB家族基因全长.推定的氨基酸序列分析表明,这两个基因都具有DREB1转录因子的典型特征,因而分别命名为Rh-DREB1A和Rh-DREBIB,GenBank登录号分别为EU784069和EU784070.Rh-DREB1A和Rh-DREB1B分别包含一个编码222和231个氨基酸序列的开放阅读框.半定量RT-PCR分析结果表明,Rh-DREB1A和Rh-DREB1B在月季花瓣中能够被失水胁迫强烈诱导,但是不受乙烯诱导.由所得结果推测,这两个转录因子参与了失水胁迫诱导的信号转导途径.     

切花月季的栽培技术

切花月季的栽培技术刘立波吴琳朱宏（吉林农业大学）（长春市园林处）（吉林市江南公园）现代月季（ＲｏｓａｈｙｂｒｉｄａＨｏｒｔ）是蔷薇科蔷薇属的本本花卉。有“花中皇后”的美誉，深受人们喜爱。在世界花卉园艺中，切花月季已占全部切花总量的第三位，而在我国近几...     

切花月季摘心技术的应用

切花月季俗称玫瑰,为世界四大切花之一。其花型优美,花色丰富,花梗挺立,寓意深刻,具有“花中皇后”美称。在世界花卉中,切花月季已居切花总量的第三位。在福建省切花生产总面积中,切花月季占60％。但是,我省生产切花月季最主要问题是植株生长及切花质量不如昆明,且花期集中,影响效益．究其原因有气候、品种因素,也有栽培技术问题。为了提高切花月季生产技术水平,我们在多年栽培试验基础上总结出摘心技术是提高切花月季产量及质量的措施之一,现将有关技术总结如下,供大家参考。一、切花月季摘心技术的应用价值摘心,也称为“掐…     

切花月季的修剪

(1)小苗期修剪。在月季小苗期及时去掉一切花蕾,当顶端花蕾直径约0.5厘米时摘除花蕾,使植株处于营养生长阶段,促进根系发达,叶片发育良好。等嫁接苗由嫁接点、扦插苗由基部发出的枝条直径达0.6～0.8厘米时可留作开花母枝,若母枝粗度达不到,则继续摘除花蕾,使枝条生长至开     

切花月季的栽培技术

切花月季是鲜切花最主要的种类之一,本文阐述了鲜切月季花栽培定植前的土壤准备、定植密度、定植后的肥水管理、修剪、采收等一系列技术要点。     

切花月季栽培技术探究

切花月季是鲜切花最主要的种类之一,在美化环境、装点生活等方面发挥了重要作用。本文主要探讨了切花月季栽培前期准备要点以及具体栽培方法,以供参考。     

切花月季在日光温室栽培的研究

以切花月季为试材,比较了不同栽培基质对切花月季产量、品质的影响,探讨了与日光温室配套的栽培技术。结果表明:在日光温室环境条件下,Black Beauty、Frisco、Pretty Girl、Dream、Golden Gate 5个品种的综合性状表现较好。Black Beauty的产量最高,泥炭是切花月季的最适栽培基质。     

切花月季新品种‘菲韵’

‘菲韵’是由现代月季品种‘好莱坞’与‘卡罗拉’杂交选育出来的新品种。花瓣复色,正面淡紫色,背面灰白色,花径7～9 cm,花瓣数45～60枚,切枝长度70～85 cm,生长势强,设施切花栽培年产量18～20枝·株^-1,花朵乙烯欠敏感,失水后复水能力强,瓶插寿命14～16 d。     

切花月季的丰产技术

针对嘉兴市目前正在大力发展高效现代都市农业的现状,依据嘉兴的地理区位及气候条件,从生产实践出发,经过严格试验,提出设施栽培切花月季的丰产化技术要点及配套管理措施。     

抗坏血酸提高月季切花失水胁迫耐性与增加APX活性的关系

 以‘Samantha’品种为试材, 确定了适宜的抗坏血酸(AsA) 预处理浓度, 探讨了AsA和抗坏血酸过氧化物酶(APX) 抑制剂(对氨基酚, β-aminophenol) 预处理对花瓣中相对电导率、AsA含量以及APX活性的影响。与未经失水胁迫的切花月季相比较, 失水胁迫处理抑制切花的开放进程, 缩短了瓶插寿命。AsA 1 000 mg·L ^{- 1}预处理可有效地改善花朵的开放状况, 显著降低花瓣中相对电导率的增加, 明显提高花瓣中AsA的含量和APX活性。500 mg·L ^{- 1} β-aminophenol预处理则起到相反的效应。结果说明,AsA对‘Samantha’月季切花失水胁迫耐性的改善与花瓣中APX活性的提高相联系。     

月季CBF 转录因子基因的克隆及表达分析

 根据CBF（C-repeat binding factor）AP2/EREBP 保守区设计1 对简并引物,采用PCR 方法对月季‘寒锦4 号’（Rosa hybrida‘Hanjin 4’）CBF 转录因子基因中间片段进行克隆;再根据中间片段区域设计了两对特异引物,采用反向PCR 方法对该基因的5'和3'端的序列进行克隆,将中间片段与反向PCR 产物拼接得到CBF 基因全长序列,命名为RhCBF,GenBank 注册编号为EF582843;该基因序列长758 bp,ORF 为603 bp,编码200 个氨基酸;同时,根据基因序列设计1 对特异引物,利用荧光定量PCR分析月季CBF 在不同逆境胁迫下的表达情况。结果显示低温和盐均可以诱导RhCBF 的表达,而干旱处理不能诱导其表达。     

节瓜ACC 合酶基因CqACS 的克隆与表达分析

为分析ACC 合酶与节瓜雌性之间的关系，以雌性自交系（A36）和普通雌雄同株自交系（SX）为材料，克隆得 到节瓜ACC 合酶（CqACS）基因，并与葫芦科中已知的ACC 合酶基因进行同源序列比对分析、构建进化树；对A36 幼苗 叶片进行赤霉素（GA3）处理后用qRT-PCR 对CqACS 基因进行表达分析，并统计赤霉素处理前后20 节内的雌花率。结果 表明，CqACS 基因在雌性自交系A36 中的长度为1 318 bp，普通雌雄同株自交系SX 中长度为1 637 bp。经对比分析，SX 比A36 多了91、97、117 bp 3 个片段，除此之外只有2 个碱基的差别。同源序列比对发现，A36 中的CqACS 基因与西瓜中 的Cit-ACS1 基因同源性最高，为95.31%，与黄瓜中的Cs-ACS1 基因同源性为91.13%；SX 中的CqACS 基因与西瓜中Cit- ACS1 基因同源性为78.04%，与黄瓜中的Cs-ACS1 基因同源性为76.06%。GA3 处理后，A36 的平均雌花节率（20 节位内） 为45%，而对照为90%；qRT-PCR 分析发现，与对照相比，CqACS 基因在GA3 处理后的相对表达量显著上调，且在第3 次 处理后4 h 上调最大。     

香蕉ACC氧化酶基因(MAO3)的克隆及其表达特性分析

 根据同源扩增得到香蕉(Musa acuminata) ACC氧化酶基因(MAO3) 的核心部分, 再通过3'和5'RACE扩增上、下游序列以及Genome-Walker的方法得到启动子部分, 共获得3 718 bp长度的序列。将所得结果进行聚类分析, 发现香蕉中ACC氧化酶的氨基酸序列非常保守, 各序列间的同一性高达99% ,与单子叶植物和双子叶植物中ACC氧化酶的氨基酸序列的同源性在66.7%～71.8%之间。组织原位杂交试验表明MAO3基因的表达具有组织特异性, 初步认为是在韧皮部筛管组织中特异表达。运用实时荧光定量PCR技术, 实时监测到了MAO3基因和香蕉乙烯受体基因ERS2受机械伤诱导的定量变化。     

苹果果实成熟过程中ACC 合成酶基因作用机理研究进展

 苹果（Malus × domestica Borkh.）果实贮藏期的长短直接决定着其采后的经济价值,其与果实在室温下的软化率有直接的关系。乙烯能够调控苹果成熟和软化过程,因此,苹果果实软化和乙烯之间的关系得到了广泛的研究。ACC合成酶（1–氨基环丙烷–1–羧酸合成酶,ACS）是植物乙烯合成中的关键酶,通过检索苹果全基因组序列,共发现20个ACC合成酶（ACS）基因,其中MdACS1和MdACS3已经被证明与苹果果实成熟有着直接关系,并在不同的时空点调控果实成熟过程。对ACS基因调控苹果果实成熟过程的最新研究进展进行了综述,并提出了ACS基因调控苹果果实成熟和乙烯合成的分子模型,同时也对本领域今后的研究方向作了展望。     

矮牵牛B-box型锌指蛋白基因PhBBX8的克隆与表达分析

利用矮牵牛（Petunia hybrida）基因表达谱芯片筛选出应答低温胁迫的相关基因,从中发现1个B-box型锌指蛋白基因PhBBX8。通过RT-PCR克隆得到该基因的编码区序列（CDS）,为1 242 bp,预测其编码氨基酸413 aa,N端含有2个B-box盒,C端含有1个CCT结构域。系统进化树分析发现,PhBBX8与拟南芥AtBBX8等聚类为一支。利用半定量RT-PCR检测其在根、茎、叶和花中的表达特性,结果表明该基因在花中表达量较高,其次为根,而在茎和叶中表达较弱;利用实时定量PCR检测了在低温、干旱、ABA、MeJA、高盐和高渗胁迫处理下矮牵牛叶片中PhBBX8的诱导表达情况,结果表明,PhBBX8表现出不同程度的上调,其中除干旱胁迫外,其他胁迫下上调倍数都较高,初步推测该基因与矮牵牛应答低温等非生物逆境相关。     

月季切花乙烯受体ETR1 cDNA克隆及其序列分析*

 根据乙烯受体基因ETR1 保守区设计引物, 分别以瓶插寿命差异显著的月季切花品种‘德克萨斯’和‘维亚蒂’为材料, 通过RT-PCR 从花瓣中扩增出了797 bp 的cDNA 片段, 它编码265 个氨基酸。测序和序列分析表明,‘德克萨斯’重组质粒中插入片段的核苷酸序列之间完全相同, 命名为pRT-ETR1。而‘维亚蒂’所获得的重组质粒中插入片段的核苷酸和氨基酸序列之间存在差异, 同源性分别为85. 2 %和92. 1 % , 分别命名为pRV-ETR1-V4 和pRV-ETR1-V5。pRV2 ETR12V5 的核苷酸和氨基酸序列与‘德克萨斯’pRT2 ETR1 的同源性均达99 %以上; pRV-ETR1-V4 中的核苷酸和氨基酸序列与‘德克萨斯’pRT-ETR1 的同源性分别为85. 0 %和92. 5 %。上述插入片段与桃、苹果、天竺葵、拟南芥等植物的ETR1相应区域高度同源, 其氨基酸同源性均大于90 %。     

哈密瓜ACC合成酶基因cDNA的克隆及全序列分析

 以新疆哈密瓜(Cucumis melo L. ) 幼叶为材料, 根据已报道的甜瓜ACC合成酶3(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase, ACS) 基因片段设计特异引物, 采用RT-PCR和RACE (Rapid Amplification cDNA Ends, cDNA末端快速扩增) 等技术, 克隆得到编码哈密瓜CM e2ACS3基因的全长cDNA 序列,长1 895 bp, 编码482个氨基酸, 分子量约为54.12 kD, 等电点8.45, GenBank登录号为FJ383171。利用软件MEGA4构建进化树, 发现哈密瓜ACS3基因与黄瓜中的同类基因亲缘关系最近。哈密瓜CMe-ACS3基因的克隆及序列分析为认识此基因在甜瓜中的功能研究奠定基础。