急性肺损伤动物模型的研究现状

急性肺损伤是现代危重医学的一大难题,发病机制尚未完全阐明,制备动物模型是研究急性肺损伤发病机制的基础,也是其研究的一个热点和难点。作者综述了目前急性肺损伤动物模型的研究现状。     

HIV模型猪建立的可行性

1 HIV的历史与动物模型艾滋病（Acquired immunodefiency syndrome,AIDS）于1981年最早出现在美国的纽约、洛杉矶、旧金山的男同性恋者之间。随后,更多的艾滋病例被发现于美国的其他城市之中,直到20世纪80年     

猪链球菌2型西藏小型猪感染模型的初步建立

选取3个流行病学背景不同的猪链球菌2型菌株人工感染西藏小型猪,探讨西藏小型猪作为猪链球菌2型毒力评价模型动物的可行性.12头西藏小型猪分成4个组,A组为阴性对照组接种肉汤培养基;B、C、D三组分别接种猪链球菌2型分离株GZ06-122B、SH06-21D和HA9801.GZ061-22B株和SH06-21D株分离自华南...     

猪囊虫病实验动物模型的建立

猪带绦虫孕节经酸性胃蛋白酶 ３７℃消化后,离心收集虫卵,加入含胰蛋白酶、 Ｎａ Ｈ Ｃ Ｏ３ 及猪胆汁的孵化液,置 ３７℃孵化,孵化率在 ７５％ 以上。孵化后的六钩蚴经尾静脉感染昆明小鼠,９ 周后剖检,在小鼠的心脏及肺脏见有猪囊虫,感染率为 １００％ 。压片镜检,确认检出的猪囊虫发育成熟,形态结构完整;胆汁孵化试验,见其头节自动外翻。用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法在小鼠血清中检测到囊虫 Ｃ Ａ 抗原和抗体。试验表明,经尾静脉感染昆明小鼠的六钩蚴,可发育成成熟的猪囊虫,从而为猪囊虫病的研究提供了一种制作简便、经济的实验动物模型。     

猪带绦虫实验动物模型的建立

为建立猪带绦虫实验动物模型,本实验通过口服激活、未激活囊尾蚴和尾静脉注射激活的囊尾蚴感染昆明小鼠、BALB/c小鼠、SD大鼠、豚鼠、金黄地鼠、沙鼠,对各种鼠体内的绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性进行研究.在感染45 d的金黄地鼠体内检出可见虫体,检出的虫体多数吸附在小肠.本实验建立了猪带绦虫的实验动物模型,使得解决猪带绦虫实验材料的来源问题成为可能,也为猪带绦虫的深入研究奠定了基础.     

豚鼠副猪嗜血杆菌感染动物模型的建立

为建立副猪嗜血杆菌(Hps)的感染动物模型,本试验用Hps血清5型标准菌株(Nagasaki),以2.0×10~9CFU剂量腹腔感染豚鼠,观察豚鼠发病及死亡情况.取死亡豚鼠的主要器官组织,观察其病理和组织病理变化,与猪Classer's病痛变进行比较.并同时对死亡豚鼠进行细茵分离,分离菌经PCR鉴定.实验结果显示:在接种14 h后试验组豚鼠(5/8)出现死亡,死亡豚鼠剖检时出现了与猪Classer's病相似的病变;主要组织器官组织学变化以炎性细胞浸润、纤维蛋白和红细胞渗出等变化;并通过细茵分离培养,在豚鼠大脑、心血、肺、肝、脾和肾主要器官中分离到Hps血清5型茵.实验结果表明豚鼠可以作为Hps的感染动物模型.这一结果为研究其致病机制、诊断和免疫研究奠定基础.     

猪附红细胞体实验动物模型的建立

为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型，利用摘除脾和／或注射地塞米松的昆明小白鼠，以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体，通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示，猪附红细胞体能够经腹腔注射感染昆明小白鼠，且感染鼠表现出与猪附红细胞体病相似的临床症状。结果表明，猪附红细胞体实验动物模型已成功建立，并证实啮齿类动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重耍作用。     

建立实验室猪发热模型

为建立稳定的实验室发热动物模型,供给临床验证试验应用,使用脱脂牛奶分别皮下注射长白猪、大约克×长白二元杂交猪、大约克×长白×杜络克三元杂交猪等不同品种猪,进行了猪实验室发热试验,并对不同剂量、猪的不同日龄、体重和在不同环境温度等条件进行比较试验.结果表明:注射不同剂量的脱脂牛奶均可使猪产生高热症,注射剂量与发热反应强度不呈正相关;不同日龄、体重和品种的猪反应强度无差异,维持40℃以上体温均在28～32 h.猪对外界环境的变动反应稳定,其发热反应较平稳,是理想的实验室发热动物模型.     

蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全动物模型建立

本试验的目的是建立蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全动物模型及获得其评价指标。试验方法:蕨麻小型猪麻醉后在超声引导下,经右颈总动脉,采用套管插管戳破部分瓣膜建立主动脉瓣关闭不全动物模型;检测建模前,建模后即刻及1个月后动物主动脉弓血流峰值速度;血液生理学指标和血液生化指标,血压变化。试验结果:建模后即刻及1个月后主动脉弓血流峰值速度增加;血压降低;血液生理学指标无显著变化;血液生化指标中ALT、AST、CK、LDH建模1个月后显著升高,其他指标无显著变化。结论:在超声引导下经右颈总动脉套管插管建立蕨麻小型猪主动脉瓣关闭不全模型可行,操作简单、重复性好,效果可靠,建模后1个月不会发生自愈,初步获得主动脉瓣关闭不全动物模型评价指标。     

H9N2亚型猪流感病毒诱导小鼠肺急性损伤模型的研究

本试验采用100 μLA/swine/HeBei/012/2008/(H9N2)猪流感病毒(H9N2 SIV)经鼻腔接种6～8周龄的BALB/c小鼠,通过定时称量小鼠的采食量和体质量、观察肺病理组织学变化以及测量肺系数、肺湿质量/干质量、动脉血气和支气管肺泡灌洗液内炎性细胞等拟建立H9N2 SIV感染诱导小鼠急性肺损伤模型.结果显示:(1)感染后第2天试验组小鼠出现精神沉郁、被毛松乱、采食量和体质量下降.感染后的第3天开始感染小鼠采食量和体质量显著下降(P＜0.01);(2)试验组小鼠在感染后的第3天末出现死亡,死亡率约为62.5%,剖检可见肺部明显水肿、出血,肺泡内有大量的炎性细胞渗出;肺系数和湿质量/干质量比显著增加(P＜0.01);(3)与对照组相比感染组小鼠动脉血中氧分压从第2天开始降低,第4天出现明显的差异(P＜0.01),第6天最低时仅为(6.79士1.27)kPa,呈现严重的低氧血症,同时,二氧化碳分压显著上升;(4)支气管灌洗液(BALF)内炎性细胞在感染后第4-8天增加显著,尤其以肺泡巨噬细胞和多核型白细胞增加最为明显(P＜0.01).本研究证实采用A/Swine/HeBei/012/2008/(H9N2)病毒感染小鼠引起肺组织弥漫性急性渗出性炎症为主的病理过程和严重的低氧血症,表明成功建立了H9N2 SIV诱导小鼠的肺损伤模型,为进一步研究其对哺乳动物肺损伤的致病机理奠定基础.     

犬药物性急性肾损伤模型的建立及评价

[目的]探讨建立犬药物性急性肾损伤模型。[方法]16只健康成年比格犬每8 h皮下注射20 mg/kg庆大霉素,注射前血肌酐浓度(SCr)作为基线,注射后每6 h采集血液检测SCr浓度,于SCr无明显升高、SCr升高临近正常值上限及SCr升高到基线1.5倍时观察肾组织病理形态学改变,确定犬药物性急性肾损伤模型。[结果]SCr在注射庆大霉素后78 h显著升高(P<0.05),实验犬SCr均在120～132 h达到基线的1.5倍;肾组织在SCr升高到基线1.5倍时肾皮质大面积的肾小管变性、坏死,管腔有较多的细胞碎片和颗粒管型,基底膜裸露明显,髓质损伤较轻;与健康对照组相比,注射后肾损伤评分差异有统计学意义(P<0.05),且肾损伤随用药时间延长评分逐渐增加。[结论]庆大霉素每8 h皮下注射20 mg/kg直至SCr浓度升高到基线1.5倍的方法可成功建立犬药物性急性肾损伤模型。     

大鼠肺鳞癌模型的建立

探讨和构建Wistar大鼠肺癌的动物模型,以了解肺癌发生发展的过程.采用Wistar大鼠68只,其中试验组60只大鼠(A组30只:三甲基胆蒽(MCA) 5 mg～7 mg,二乙基亚硝胺(DEN) 0.02 mL;B组30只:MCA 7.5 mg～9.5 mg,DEN 0.03 mL),左肺下叶支气管灌注含MCA和DEN的碘油溶液0.1 mL;另8只灌注0.1 mL碘油,作为对照组.试验的3月和6月末分别进行X线检测,发现3月末已有肺部阴影,6月末有50%出现明显的肺部阴影.组织学观察发现1月末已出现肺部原位癌和早期浸润癌;6月末48只发生癌变,致癌率为80%,癌变的Wistar大鼠肺标本中有多个阶段病变共存;共获取支气管黏膜上皮增生44例,不典型增生29例(含鳞状化生7例),原位癌18例,侵袭癌19例,转移癌11例.结果表明,一次性支气管灌注MCA和DEN可引起大鼠肺鳞癌的发生,并获得癌发生过程中各个阶段的标本,该疾病模型为人类肺癌发生机制的研究提供了基础依据.     

小鼠急性肺损伤造模条件的探究

为探究构建急性肺损伤模型的条件,本试验选用健康昆明小鼠,经腹腔注射递增剂量脂多糖（LPS）（0、2、4、6、8、10 mg/kg）,观察不同条件下小鼠呼吸频率、死亡率、肺脏干湿重比值及组织结构变化,检测炎症因子IL-10、TNF-α、IL-1β及IFN-γ在不同程度肺损伤中的表达量变化。结果显示,4 mg/kg LPS组肺脏干湿重比值显著高于对照组（P<0.05）;6、8和10 m/kg LPS组肺脏干湿重比值极显著高于对照组（P<0.01）。病理切片分析显示,6 mg/kg LPS组小鼠肺脏出现充血,肺泡腔及肺间质出现渗出,肺泡隔增厚,出现少量中性粒细胞浸润;8、10 mg/kg LPS组小鼠肺脏充血明显,肺泡腔及肺间质出现渗出,肺泡明显隔增厚,出现中性粒细胞浸润;与对照组相比,6、8、10 mg/kg LPS组肺组织中胶原纤维大量增多,且多出现在肺气管周围,10 mg/kg LPS组现象最明显。炎症因子检测分析结果显示,与对照组相比,2、4、6、8、10 mg/kg LPS组炎症因子均极显著增加（P<0.01）。结合病理组织切片及相关检测指标表明,昆明小鼠腹腔注射8 mg/kg LPS并作用12 h,可成功构建急性肺损伤模型。     

Study on the Building Conditions of Acute Lung Injury in Mice

In order to explore the building conditions of acute lung injury, healthy Kunming mice were selected, by intraperitoneal injection of cascade dose of LPS (0, 2, 4, 6, 8, 10 mg/kg) to observe the mice respiratory frequency, mortality, lung W/D value and the changes of tissue structure in different conditions, and detect the expression changes of inflammation cytokine, IL-10,TNF-α, IL-1β and IFN-γ. The results showed that compared with control group, lung W/D value in 4 mg/kg LPS group significantly increased (P<0.05) and lung W/D values in 6, 8 and 10 mg/kg LPS groups extremely significantly increased (P<0.01). Pathological analysis showed that 6 mg/kg LPS group appeared lung congestion, alveolar luminal and pulmonary interstitial exudation, alveolar septal thickening, and a small amount of neutrophil infiltration. 8 and 10 mg/kg LPS groups appeared pulmonary congestion, alveolar and pulmonary interstitial exudation, alveolar septal thickening and neutrophil infiltration. Compared with control group, collagen fibers of the lung tissue in 6, 8, 10 mg/kg LPS group increased, and more appeared in the lung around the trachea, 10 mg/kg LPS group was the most obvious. The inflammatory factors in 2, 4, 6, 8 and 10 mg/kg LPS groups had extremely significantly increased compared with control group (P<0.01). Pathological biopsy and related indicators showed that the model of mice could be successfully constructed by intraperitoneal injection of 8 mg/kg LPS for 12 h.     

参麦注射液对大鼠急性肺损伤保护作用及机制的研究

试验旨在探讨参麦注射液对大鼠肺组织的保护作用及可能机制,为临床治疗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)提供理论依据。将Wister大鼠随机分为模型组、参麦治疗组和空白对照组,每组采用经典尾静脉注射油酸方法建立急性肺损伤模型。观察肺体系数、病理切片、超微结构及肺组织匀浆中TNF-α、ICAM-1的含量变化,探讨参麦注射液对大鼠肺组织急性肺损伤的保护作用。结果发现,与模型组相比参麦治疗组可以明显改变大鼠急性肺损伤的肺体系数,减轻肺组织形态学及超微结构的病理改变,同时降低肺组织匀浆中TNF-α、ICAM-1的表达。证实参麦注射液对大鼠急性肺损伤具有保护作用,其机制可能通过降低肺组织匀浆中TNF-α、ICAM-1的含量,而发挥抗炎作用。     

不同体重阶段川藏黑猪和杜长大猪肌肉中氨基酸含量研究

为了研究不同猪种背最长肌中氨基酸沉积规律,试验采用高效液相色谱检测了不同体重梯度（90、110和130 kg）的川藏黑猪和杜长大（DLY）猪背最长肌中氨基酸含量。结果表明,谷氨酸在两猪种肌肉中含量最高,含硫氨基酸总量在90和130 kg体重梯度时表现为川藏黑猪显著高于DLY猪（P〈0.05）,110 kg体重梯度时极显著高于DLY猪（P〈0.01）,而同一猪种不同体重梯度间各种氨基酸组成差异均不显著（P〉0.05）,鲜味氨基酸占总氨基酸比例（FAA/TAA）在90 kg体重梯度表现为川藏黑猪极显著高于DLY猪（P〈0.01）,130 kg体重梯度时显著高于DLY猪（P〈0.05）。本研究说明川藏黑猪肌肉中与风味相关的氨基酸含量高于DLY猪,我们认为这也是川藏黑猪的肌肉风味比DLY猪更浓郁的重要原因之一。我们的研究初步揭示了不同猪种背最长肌中氨基酸的沉积规律及构成差异,为进一步研究猪肉风味形成机理提供数据。     

放射性肺纤维化大鼠动物模型的建立及其病变规律

用 60 Coγ射线对二级雌性 Wistar大鼠 (体重 ( 2 2 0± 2 0 ) g) 2 2 3只进行 30 Gy全胸单次照射 ,其中照射野为 4 .5cm× 4 .0 cm,照距为 3m,剂量率为 2 .7Gy/ min。分别于照后 3、7、1 4、2 1、2 8、4 2、56、70、90、1 80、2 70、36 5d共 1 2个时间点进行了取材观察。结果表明 ,肺脏病变初期呈急性变化 ,以后转为亚急性或慢性进行性发展过程 ,可大致分为 2个阶段 4个期。早期即急性炎症期或渗出期 ,中期为增生期 ,这 2期合为疾病的第 1阶段 ,称为放射性肺炎。后期即纤维化期 ,晚期即胶原化期 ,这 2期共同构成本病的第 2个阶段 ,称为进行性间质纤维化阶段     

山羊隐孢子虫病实验模型的建立

对 1日龄羔羊通过口腔接种 1× 1 0 6个卵囊 ,3 d后粪检开始出现卵囊 ,6～ 9d达高峰 ,1 4日龄停止 ,腹泻同卵囊排出呈正相关。病原学和病理学检查均说明通过口服接种卵囊成功地建立了反刍兽隐孢子虫病动物模型