白腐菌漆酶特性及其应用前景

木质素是第二天然聚合物，木质素的降解是碳素循环中的关键一步。自然界中木质素的降解主要是通过丝状真菌，尤其是白腐菌的分解作用来完成的。漆酶是一种含铜多酚氧化酶，按其主要来源分为漆树漆酶和真菌漆酶两大类，研究表明，漆酶可作用的底物范围广泛。本文综述了白腐菌漆酶的结构特性、催化氧化性质，以及漆酶在环境保护、造纸工业、食品工业、生物检测及其它领域中的应用前景。     

抗营养阻遏产酶白腐菌pc5305对萘酚绿-B染料的脱色效果

利用白腐菌处理染料废水,可通过其分泌的特殊降解酶系达到良好的脱色效果.主要研究了白腐菌pc5305对300mg/L萘酚绿-B染料的脱色效应.通过脱色率比较,可以从4种不同白腐菌中筛选出对萘酚绿-B具最佳脱色作用的pc5305,并对pc5305处理萘酚绿-B的脱色条件进行了优化.结果显示:白腐菌静置培养4天后用于染料脱色效果最好;在染料溶液初始pH 4.4、处理过程振荡且接种量大于2.0×107个孢子/L条件下,pc5305可在8h内使浓度高达300mg/L的萘酚绿-B脱色90%以上.     

白腐真菌XX-3对苯胺蓝染料的脱色条件优化

采用静置开放式培养法研究碳源、氮源、盐度、金属离子对白腐真菌降解苯胺蓝的影响.结果表明,菌株脱色最适降解条件为丙二酸2.0 g/L,氯化铵4.0 g/L,Cd2+ 0.10 mmol/L,盐浓度≤4.0 g/L,在上述培养条件下,对浓度为100 mg/L不灭菌的苯胺蓝溶液静止培养5d,降解率达80％以上.因此,该菌对处...     

白腐菌产漆酶活化木粉制备纤维板的力学性能

利用白腐菌产漆酶的特性,优化连续培养高活漆酶,使得大量培养漆酶成为可能。结果表明:在连续培养和直接培养两种情况下,第11天时漆酶的酶活最高;利用连续培养白腐菌得到的大量的粗漆酶来处理木粉,活化其木质素成分,使其能够替代一部分的脲醛树脂胶制备纤维板。静曲强度上升了18.95%,弹性模量上升了35.49%,内结合强度上升了44.11%。漆酶催化氧化了木质素,增加了木质纤维中化学键的数量,使木质纤维之间的胶结点增多。与此同时,经过漆酶处理的木粉增强了脲醛树脂胶黏剂在纤维表面的渗透和扩散能力,提高了纤维板的力学性能。     

白腐菌产漆酶处理木屑对生产刨花板用胶量的影响

将木屑与试验制备的粗酶液混合,烘干后加入脲醛树脂胶,热压制成刨花板,与未经漆酶处理过的木屑热压成的刨花板进行比较。结果表明:用粗酶液处理过的木屑热压成的刨花板,与未经漆酶处理过的木屑热压成的刨花板相比,达到同等物理力学性能时所需脲醛树脂的用量,减少了42.9%;热压成板的物理力学性能并优于不经处理的木屑热压制成的刨花板。     

白腐菌TP21液体培养产漆酶条件的研究

研究了碳源、氮源、各种理化因素以及培养条件对白腐菌TP21漆酶分泌的影响.结果表明:木糖和多糖作碳源、酵母膏作氮源有利于漆酶的分泌,pH在4.0～6.0的范围内对漆酶的分泌影响不大,培养温度、接种量、通气量对漆酶的分泌有较大影响,培养基中添加诱导物对漆酶的产生有促进作用,特别是玉米秸秆价格低廉,是较好的选择.     

白腐菌Trametes pubescens MB89产漆酶发酵条件的优化及其部分酶学性质的研究

以白腐菌T.pubescens MB89为漆酶培养菌.研究培养方式、温度和Cu2+等因素对发酵产生漆酶的影响.在漆酶性质研究中,研究了温度、pH值、底物种类、金属离子等因素对漆酶催化活性的影响.结果表明,T.pubescens MB89产漆酶的最佳培养温度为25℃,最适Cu2+浓度1.0μmol/L,120 r/min振荡培养优于静止培养.T.pubescens MB89漆酶氧化底物的最适作用温度为25℃,最适pH随底物的不同而不同.Cu2+、Co2+、K+、Ag+对漆酶活性有促进作用,Fe2+、Fe2+、ca2+等离子对漆酶活性有抑制作用.Na+、Mg2+、Zn2+、Mn2+等离子对漆酶酶活性影响不大.由此说明,振荡培养T pubescens MB89生产漆酶的过程中Cu2+的存在可以加速漆酶的产生.T pubescens MB89漆酶酶活性受温度、pH值、金属离子、底物等因素的影响.     

白腐菌(Trametes pubescens MB89)漆酶的培养与纯化

【目的】通过培养白腐菌Trametes pubescens提取胞外漆酶。【方法】以白腐菌T.pubescensMB89为漆酶培养菌,在25℃120 r/min条件下用基础GP液体培养基(300 mL培养基中含40 g/L丙三醇、15 g/L蛋白胨和1 g/LMgSO4.7 H2O)进行胞外漆酶的震荡培养,培养10 d后,添加CuSO4.5 H2O使培养基中Cu2+的最终浓度达1 mmol/L。定时测定漆酶活力,于漆酶活力开始下降时终止培养。将菌体破碎、离心后,用DEAE-Ssepharose对获得的漆酶进行分离和纯化。【结果】在以葡萄糖为碳源的培养基中添加一定浓度的Cu2+,可促进菌体的生长和漆酶活力的增加。培养前10 d,漆酶活力增加缓慢,培养10 d后添加CuSO4.5 H2O,漆酶活力快速增加,并于培养的第19天达到最大,为51.70 U/mL。用超滤方法分离纯化漆酶,可使漆酶纯度达53%。【结论】T.pubescensMB89可作为生产漆酶的菌种,在漆酶培养过程中,Cu2+对漆酶活力的增加有促进作用。     

菌株Bacillus sp.CLb芽孢漆酶对染料、模拟染料废水脱色的研究

[目的]研究芽孢杆菌菌株CLb的芽孢漆酶在介体的互作下对不同类型的染料及模拟染料废水的脱色效果。[方法]制备芽孢粗酶液,在介体的互作下,测定具有漆酶活性的粗酶液对活性亮蓝、活性黑、靛红和结晶紫的脱色效果,筛选出对染料脱色有促进作用的漆酶介体,并且研究芽孢漆酶在不同pH条件下对染料和模拟染料废水脱色的影响。[结果]菌株CLb的芽孢漆酶在无介体参与下只能使活性亮蓝和结晶紫脱色。在介体乙酰丁香酮（ACE）的作用下,芽孢漆酶对4种染料的脱色率均超过70%。在pH 7.0条件下,芽孢漆酶浓度为44.74 U/L和介体ACE浓度为1 mmol/L时对模拟染料废水的脱色效果最好,6 h脱色率超过80%。在介体乙酰丁香酮存在,pH 7.0的条件下,菌株CLb的芽孢漆酶对合成染料脱色效率高于pH 9.0时的脱色率。[结论]在介体乙酰丁香酮的存在下,芽孢漆酶对染料和模拟染料废水均具有较好的脱色效果。     

响应面分析法优化白腐菌Y10产漆酶培养基研究

利用Design Expert软件、采用Plackett-Burman(PB)实验设计和响应面分析法,对白腐菌Y10产漆酶的培养基进行了优化研究,结果表明:大量元素、氨三乙酸(NTA)和藜芦醇(VA)是影响漆酶酶活的3个主要因素;在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并利用Box-Behnken实验设计及响应面分析法确定了主要影响因素的最佳条件,即白腐菌Y10产漆酶最佳培养基组分为葡萄糖10.00 g,L、酒石酸铵0.50 g/L、大量元素296.50 ml/L、微量元素100.00 ml/L、NTA1.40g/L、VA 5.00 mm01/L、吐温-80加入量为0.10%,在该优化培养基中漆酶酶活达5 282.56 U/L,约为优化前的23倍,其实验值与理论值基本相符.     

基材物理性质对白腐真菌菌丝体生长的影响

[目的]研究基材物理性质对白腐真菌菌丝体生长的影响,为进一步扩大白腐真菌的应用范围提供理论基础。[方法]将粒度范围在〈0．25mm、0．25～1．00mm和〉1．00mm的3种木粉分别与鸡粪（粒度0．25～1．00mm）按质量比1：3的比例混合,用蒸馏水将含水率分别调整至50％、55％、60％、65％、70％、75％和80％,制成木粉鸡粪培养基。在平面和试管木粉鸡粪培养基中培养4种常见白腐真菌（黄孢原毛平革菌、香菇、平菇、凤尾菇）,研究白腐真菌菌丝体生长与培养基材物理性质的相互关系。木粉的比重、空隙率、保水度和透水性根据Sakae Horisawa等的方法进行测定。木粉鸡粪培养基脱水率根据Sadatoshi Meguro等的方法进行测定。[结果]培养基材粒度越大,比重越小,空隙率越大,基材保水能力越弱,配制成培养基后,在相同水分条件下,培养基脱水率越大。培养基材物理性质的差异首先影响的是培养基保持水分的能力,同时由于不同白腐真菌对于水分多寡的敏感程度的差异（黄孢原毛平革菌和香菇利用水分的能力较强,对于培养基水分的多寡较为敏感;而凤尾菇和平菇利用水分的能力较弱,需要较为优越的培养基水分条件）,最终培养基材的物理性质对白腐真菌菌丝体的生长产生了显著影响。培养基材的各物理性质,包括粒度、比重、空隙率、保水度、透水性等通过影响培养基的水分和通气条件,与白腐真菌菌丝体生长之间形成反馈关系。培养基水分条件和通气条件分别与白腐真菌菌丝体生长存在正反馈关系,但是培养基水分条件与通气条件之间形成的却是负反馈的关系。三者共同构成了影响白腐真菌菌丝体生长的核心负反馈。培养基的含水率和木粉粒度在培养基材物理性质与白腐真菌菌丝体生长的反馈关系中只是作为外在辅助变量产生间接的影响。[结论]该试验确认了培养基材各种物理性质对白腐真菌菌丝体生长产生了显著的影响,并初步推断了其影响方式和途径。     

白腐真菌降解生物质秸秆效果的研究

[目的]探讨不同发酵时间白腐真菌对玉米和油菜秸秆的降解效果。[方法]设置6个时间点（0、20、25、30、35和40 d）,测定油菜和玉米秸秆的木质素含量和降解率变化。[结果]随着发酵时间的延长,玉米和油菜秸秆的木质素降解率均呈下降—上升—再下降的趋势。在发酵培养20 d时,油菜秸秆的木质素降解率达到最大,为58.07%;在发酵培养35 d时,玉米秸秆的木质素降解率达到最大,为33.62%。[结论]白腐真菌对玉米和油菜秸秆的降解效果显著,其中对油菜秸秆的降解效果尤为突出。     

基材物理性质对白腐真菌菌丝体生长的影响

[目的]研究基材物理性质对白腐真菌菌丝体生长的影响,为扩大白腐真菌的应用范围提供理论基础。[方法]在平面和试管木粉鸡粪培养基中培养了4种常见白腐真菌,研究了白腐真菌菌丝体生长与培养基材物理性质的相互关系。[结果]培养基材粒度越大,比重越小,空隙率越大,基材保水能力越弱,配制成培养基后,在相同水分条件下,培养基脱水率越大。这种与培养基材物理性质直接相关的规律影响了白腐真菌菌丝体的生长。培养基材的各物理性质,包括粒度、比重、空隙率、保水度、透水性等通过影响培养基的水分和通气条件,与白腐真菌菌丝体生长之间形成反馈关系。[结论]培养基材各种物理性质对白腐真菌菌丝体生长产生了显著的影响。     

白腐菌固体发酵稻草传代驯化研究

[目的]研究白腐菌固体发酵稻草的传代驯化。[方法]通过对9株白腐菌(01菌、02号菌、1号菌、3号菌、5号菌、2-5菌、柬兰、姬松茸3-L和华泰菌)稻草固体发酵进行9～10次传代驯化试验,研究其菌丝生长状况、代时及发酵后的稻草降解性能。[结果]01菌和华泰菌经多代传接,生长正常,菌丝粗壮、纯白,抗杂菌能力强;在10.5～11.3 d发酵期内,SI值分别为1.71和1.34,居国内同类试验先进水平,可开发为草浆生产的白腐菌剂。[结论]该研究为研发适应于我国草浆生产的白腐菌剂提供了参考依据。     

培养条件对Trametes versicolor SYBC L3固态发酵产漆酶的影响

对菌株Trametes versicolor SYBC L3产漆酶固态发酵培养基进行优化,确定该菌适宜的发酵条件为豆粕和木屑比例为1∶1,最适碳源是麦芽糖1.0 % (w/w),最佳氮源是硝酸钠2.5% (w/w),硫酸铜浓度为0.02% (w/w).在250 mL三角瓶中装样40 g,含水量为70%(w/w),提取最适pH为6.5,酶曲最适浸泡时间为4 h时,优化后菌株Trametes versicolor SYBC L3固态发酵所产漆酶酶活可达91.057 U/g 干曲.     

云芝漆酶对靛蓝废水脱色降解研究

[目的]探讨云芝漆酶对靛蓝废水的脱色净化作用。[方法]首先研究不同温度、pH、靛蓝浓度、HBT添加量、漆酶用量对漆酶/HBT脱色作用的影响,然后分析漆酶和酸性纤维素的酶协同水洗。[结果]当以1-羟基苯并三唑(简称HBT)为介体时,云芝漆酶/HBT对靛蓝作用的动力学参数Km和Vmax分别为0.318 mmol/L和0.035 5 mmol/(L.min)。在温度50℃,pH 4.5,靛蓝浓度100 mg/L,介体HBT用量0.1%,漆酶用量100 IU/L条件下,作用40 min时,靛蓝脱色率高达96.5%。牛仔布生物整理中采用漆酶与酸性纤维素酶协同作用,当漆酶用量为15 000 IU/kg牛仔布时,牛仔布的返沾程度减少85%,同时水洗废水中靛蓝含量减少83.8%。[结论]漆酶在牛仔服的生物整理及染整废水的脱色净化处理中具有良好的应用前景。     

白腐真菌降解木质素酶系特性及其应用

木质素是潜在的可再生资源．近年来利用白腐真菌对其进行降解已成为研究的热点。简述了白腐菌降解木质素酶系及催化作用以及白腐真菌的降解机理,介绍了白腐真菌在农作物秸秆、造纸工业、食品工业以及生物堆肥中的应用。     

丝状真菌的混合菌群降解原油的条件与效果

[目的]优化丝状真菌混合菌群降解原油的环境条件。[方法]从原油污染的土壤和海水中分离并筛选到对原油降解率较高的丝状真菌菌株,由S-3（HyphochytriumZopf）、T-1（Dictyuchus leitgeb）和T-2（Pythiwm pringsheim）构建混合菌群X3,通过单因素试验和正交试验确定菌群降解原油的最佳环境条件以及3种菌株不同接种比例对原油降解的影响效果。[结果]单因素试验结果表明,菌群X3的最适氮源为（NH4）2SO4,最适磷源为K2HPO4,最适pH值范围为6.0～7.0,最适摇床转速130～195 r/min。正交试验表明,S-3、T-1和T-2菌株的最适接种比例为1∶0.4∶1,优化后的最佳原油降解条件为：（NH4）2SO41.0 g/L、K2HPO41.5 g/L、pH值6.0、接种量0.5%,原油浓度1.25 g/L。在对原油污染的土壤和海水进行的室内修复试验中,X3菌群对原油的降解率分别达到72%和66%。[结论]混合菌群X3在石油污染生物修复中具有实际应用价值。