白花蛇舌草多糖体外免疫活性研究

目的:探讨白花蛇舌草多糖对小鼠胸腺和脾脏体外免疫功能的影响。方法:采用MTT法研究不同浓度(500μg/m L、250μg/m L、200μg/m L、150μg/m L、100μg/m L、50μg/m L、25μg/m L)的白花蛇舌草多糖对体外培养的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用、小鼠胸腺和脾脏巨噬细胞吞噬活性及自然杀伤细胞活性的影响。结果:白花蛇舌草多糖可显著提高脾脏巨噬细胞吞噬功能(P0.01),促进脾脏淋巴细胞代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用(P0.01),但对小鼠胸腺淋巴细胞代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用、小鼠胸腺巨噬细胞吞噬功能无显著性影响(P0.05);白花蛇舌草多糖能够显著增强小鼠胸腺和脾脏NK细胞活性(P0.01),并呈现明显的量效双向作用关系。结论:一定浓度范围内的白花蛇舌草多糖可提高小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞、巨噬细胞和NK细胞的体外免疫活性。     

白术、灵芝、黄芪多糖对鸡脾淋巴细胞增殖的影响

为探讨白术多糖(PAM)、灵芝多糖(GLP)及黄芪多糖(APS)对雏鸡脾脏淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的3种多糖培养液体外培养雏鸡脾脏淋巴细胞,选出适合的多糖浓度,分别在37℃和47℃环境下培养淋巴细胞,并用MTS法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明:3种多糖对淋巴细胞增殖的影响与浓度之间并无线性关系,高浓度的多糖会抑制淋巴细胞的增殖,PAM、GLP和APS的最适添加浓度分别为12.5 mg/L、25 mg/L、6.25 mg/L;在热应激环境下,12.5 mg/L的PAM可显著提高淋巴细胞的增殖能力,与热应激对照组OD490值相比,提高了38.00%,而25 mg/L的GLP和6.25 mg/L的APS分别提高32.67%和36.67%。说明白术多糖抗应激能力最好,可提高淋巴细胞在热应激环境继续增殖的能力。     

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。     

白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响

为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1~3组分别以50、100和150 mg/kg 体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7 d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12 h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21 d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。     

酵母多糖对鲤鱼脾脏淋巴细胞分泌功能的影响

为了研究酵母多糖对鲤鱼脾脏淋巴细胞的分泌功能是否有影响,试验用淋巴细胞分离液从鲤鱼脾脏中分离淋巴细胞,向淋巴细胞悬液中加入刀豆蛋白A,然后加入不同浓度的酵母多糖,培养48 h后,对酵母多糖是否影响淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)进行了研究。结果表明:50 mg/L酵母多糖组与对照组相比,IL-2和IFN-γ的分泌差异不显著(P 0. 05);500 mg/L酵母多糖和100 mg/L酵母多糖组与对照组相比,差异极显著(P0. 01)。说明添加合适浓度的酵母多糖,可以促进体外培养的鲤鱼脾脏淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ。     

黄芪多糖和白花蛇舌草多糖对猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫的影响

以黄芪多糖和白花蛇舌草多糖作为免疫增强剂联合猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫26日龄断奶仔猪,免疫后7,14,24,34,44,54,69 d前腔静脉采血,检测外周血淋巴细胞增殖,并用ELISA法检测血清中抗猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体及IL-2水平.结果表明,与生理盐水组比较,黄芪多糖和白花蛇舌草多糖均能极显著促进外周血淋巴细胞的增殖,使抗体提早产生并提高抗体滴度和IL-2表达水平;因此,黄芪多糖和白花蛇舌草多糖能增强猪对高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的免疫应答能力.     

黄芪多糖和白花蛇舌草多糖对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体水平的影响

为探讨黄芪多糖和白花蛇舌草多糖对猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体的影响,以黄芪多糖和白花蛇舌草多糖作为免疫增强剂联合猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫仔猪,通过流式细胞仪检测猪外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞百分比,并用ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体水平。结果表明,黄芪多糖和白花蛇舌草多糖均能显著提高仔猪的CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞的百分比和特异性抗体滴度,即黄芪多糖和白花蛇舌草多糖均能提高猪高致病性繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的免疫水平,且白花蛇舌草多糖提高免疫的效力与剂量有关。     

黄芪多糖对鸡体液免疫增强作用

为研究提高体液免疫效果和有效降低免疫原剂量的可行性,本研究将黄芪多糖、灭活新城疫病毒及油乳剂按不同比例配制疫苗后分别免疫鸡,以无佐剂苗和油乳苗为对照,分别于免疫后第7、14、21、28、35和48天时,在各免疫组随机抽取10只鸡进行ND-HI抗体效价的检测;将黄芪多糖分成5个浓度加入体外培养的鸡脾脏淋巴细胞中,以MTT法检测其对脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果显示,加入不同剂量黄芪多糖的油苗组在一些时间点均能显著提高抗体效价,其中中等剂量组效果最好;加入黄芪多糖0.375 mg/只而疫苗减半组的抗体效价与单纯油苗组相当;黄芪多糖在300 mg/L时能显著促进鸡脾脏淋巴细胞的增殖.黄芪多糖可以作为体液免疫增强剂.     

赤灵芝多糖对鸡淋巴细胞增殖的影响

为探讨赤灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)对体外培养鸡外周血淋巴细胞、脾脏淋巴细胞增殖的影响,将不同浓度的GLP单独或协同伴刀豆素球蛋白(Con A)刺激仔鸡外周血淋巴细胞、脾脏淋巴细胞,采用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明,单独刺激外周血淋巴细胞时,GLP在0.070~2.25 mg/m L的剂量范围内,其吸光度值均显著大于细胞对照组(P0.05),协同Con A刺激外周血淋巴细胞时,GLP+Con A组在0.141~2.25 mg/m L吸光度值显著大于Con A对照组(P0.05)。单独刺激脾脏淋巴细胞时,GLP在0.035~2.25 mg/m L浓度时的吸光度值显著大于细胞对照组(P0.05),协同Con A刺激脾脏淋巴细胞时,GLP+Con A组在0.035~2.25 mg/m L吸光度值显著大于Con A对照组(P0.05)。提示,GLP在体外不仅能单独刺激鸡淋巴细胞增殖,与Con A具有协同刺激作用,且在一定范围内呈现明显的量效关系。     

硫酸化酵母葡聚糖对鸡淋巴细胞的影响

为研究硫酸化酵母葡聚糖(SCG)对鸡细胞免疫的影响,将7种浓度SCG单独或与Con A、LPS加入到鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化;将5种浓度的SCG分别与Con A加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定IL-2和IFN-γ的含量。结果显示,SCG浓度在在250~2 000μg/m L时,SCG+Con A、SCG各剂量组随着多糖浓度的增加其A570值先增加后降低(P0.05);SCG+LPS各剂量组的A570随着多糖浓度的增加而降低,2 000μg/m L剂量组显著低于其他三组(P0.05);均具有显著的量效关系。SCG浓度在62.25~1 000μg/m L时,多糖组脾脏淋巴细胞体外培养上清液中IL-2与IFN-γ浓度,随着多糖浓度的增加其促进淋巴细胞分泌细胞因子的能力先增加后降低,具有明显量效关系;且均在250μg/m L时效果最好。结果表明,SCG在合适剂量能单独或协同Con A、LPS刺激鸡T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫。     

常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在10mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在10～200mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。常山乙素质量浓度达到0．1mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在0．001～0．01mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）,质量浓度在0．0001mg／L时具有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在0．0001～0．005mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。     

Effects of Polysaccharides from Ferula sinkiangensis Root on Proliferation of Chicken Peripheral Lymphocyte and Spleen Lymphocyte in vitro

To investigate the effects of Ferula sinkiangensis polysaccharides (FSP) on cell proliferation of chicken splenic lymphocytes and peripheral lymphocyte in vitro. By the method of water extract-alcohol precipitation,total Ferula sinkiangensis polysaccharide (FSP_t) and 30%,50%,70% gradient alcohol precipitation of polysaccharides (FSP₃₀,FSP₅₀ and FSP₇₀) were extracted, and detected by phenol-sulfuric acid method and infrared spectroscopy method. The safe concentration of all classifications of polysaccharide were detected and the effect of FSP on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood were measured by MTT method. The results showed that the absorption peak of FSP were conformed to belong by polysaccharide compounds. Peripheral blood T lymphocyte proliferation test indicated that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with PHA could stimulate T lymphocyte proliferation under a certain concentration,and FSP_t showed a better proliferation effect. Spleen B lymphocyte proliferation test showed that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with LPS could stimulate B lymphocyte proliferation under a certain concentration,FSP_t and FSP₇₀ showed a better proliferation effect. In conclusion,FSP showed the strong effect on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood in vitro,and that would be the materials for further research.     

阿魏根粗多糖对鸡脾脏和外周血淋巴细胞体外增殖作用的影响

为研究新疆阿魏多糖（FSP）对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞增殖作用的影响。本研究用水提醇沉法得到阿魏总多糖（FSP_t）和3种分级多糖（FSP₃₀、FSP₅₀、FSP₇₀）,并通过苯酚-硫酸法和红外光谱对FSP进行检测。通过MTT法测定各级FSP的安全浓度及其对鸡外周血T淋巴细胞及脾脏B淋巴细胞的增殖能力。结果显示,提取的FSP均具有多糖的特征峰,为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同PHA刺激T淋巴细胞增殖,其中FSP_t的增殖作用较强。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同LPS刺激B淋巴细胞增殖,其中FSP₇₀和FSP_t增殖作用较强。综上所述,各级FSP中,FSP_t对脾脏B淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强,可以作为进一步研究的材料。     

鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为观察鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响,以Gal-13为研究对象,在体外培养雏鸡淋巴细胞,运用MTT法首先研究不同质量浓度的Gal-13对抗原刺激的雏鸡外周血淋巴细胞增殖功能的影响,然后选取1mg/L的Gal-13饲喂雏鸡,观察其各免疫器官和外周血淋巴细胞增殖功能的变化.结果发现:体外Gal-13(0.625～1.250 mg/L)提高淋巴细胞的增殖功能,但过高剂量的Gal-13(5～10 mg/L)抑制淋巴细胞的增殖.1 mg/L的Gal-13能够提高雏鸡中枢免疫器官淋巴细胞增殖功能,抑制脾脏淋巴细胞的增殖功能.结果表明,Gal-13能够提高中枢免疫器官的免疫反应,对免疫器官的作用具有一定选择性.     

紫外-可见分光光度法测定枫蓼水煎液中总黄酮含量

本试验旨在建立测定枫蓼水煎液中总黄酮含量的紫外-可见分光光度法。以芦丁为对照品,用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色体系,采用紫外-可见分光光度法于510 nm波长处测定其吸光度。结果表明总黄酮浓度在0.008～0.048 mg/mL范围内,芦丁浓度与吸光度的线性关系良好。总黄酮加样平均回收率为100.97%,RSD=1.66%。本试验结果表明所用的方法简便、准确,可用于牛耳枫、辣蓼药材的半成品及成品中总黄酮含量的检测。     

人参总皂苷及其衍生物对小鼠淋巴细胞和NK细胞免疫活性的影响

为了提高人参总皂苷的生物学活性,对其进行了硫酸化修饰,并探讨总皂苷及其衍生物对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖（MTT法）和NK细胞杀伤活性（乳酸脱氢酶释放法）的影响。结果表明,2种衍生物质量浓度在50～500 mg/L时可以促进小鼠脾T、B淋巴细胞的分化增殖和NK细胞对YAC-1的杀伤作用,质量浓度较高时促进作用明显优于总皂苷;衍生物质量浓度达到1 400 mg/L时,仍然可以显著促进T淋巴细胞的增殖。试验结果提示,人参皂苷的这种衍生物有可能成为一种毒副作用较小、免疫活性更强的药物。     

新疆一枝蒿口服液的制备工艺优化研究

为了探究新疆一枝蒿口服液的最佳制备工艺,采用水提醇沉法提取新疆一枝蒿中的总黄酮,经单因素、响应面试验获取最佳的制备工艺参数,并通过薄层层析与含量限度测定对新疆一枝蒿口服液建立初步的质量控制。结果表明：新疆一枝蒿最佳制备工艺为料液比1:14,煎煮时间为1.5 h,醇沉浓度为50%。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,含量限度测定黄酮含量范围在28.67～29.59 mg/mL,平均值为29.10 mg/mL,最低限度为23.28 mg/mL。     

3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞体外增殖作用的影响

本试验旨在比较3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞体外增强免疫活性的研究.通过酶学检测法测定3种植物多糖对鸡胚成纤维细胞的安全浓度,MTT法比较3种植物多糖单独刺激和PHA协同刺激对鸡外周血T淋巴细胞增殖指数的影响,同时比较3种植物多糖单独刺激及与LPS协同刺激对鸡脾脏B淋巴细胞增殖率的影响.结果显示,黄芪多糖和桑叶多糖具有较高的细胞安全浓度,在64~512 μg/mL时,3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞的增殖作用较强.结果表明,3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞都有不同程度的体外增殖作用,其中黄芪多糖的增殖作用最强,桑叶多糖其次,山药多糖最差.     

Identification of positive cells to interleukin-4 in bovine haemal nodes

The bovine haemal nodes are lymphatic organs located in the haemal circulation. Their parenchyma is represented by plasma cells, macrophages and B and T lymphocytes. The T helper type 2 (Th2) CD4 lymphocyte can be found within the T lymphocytes. The activated Th2 CD4 lymphocyte produces interleukin-4 (IL-4), a peptidic hormone involved in the acute-phase immune response. This interleukin can promote either B-lymphocyte differentiation and T-lymphocyte proliferation or it can promote the type of immunoglobulin that can be liberated. Our results have shown, by immunostaining with anti-IL-4, not only the presence and localization of these lymphocytes in bovine haemal nodes but also the participation of polymorphonuclear cells (neutrophils) in the storage of IL-4. These results give value to the humoral and cellular immunological importance of haemal nodes in bovines and they can serve as a contribution to determine the cross-reactivity of bovine IL-4 with the human anti-serum used in this work.     

不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖影响

目的：研究中药复方多糖分级组分及不同纯度对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖作用。方法：用ConA诱导T淋巴细胞增殖,用MTT法测定淋巴细胞的增殖能力。结果：水煎剂、总多糖、分级组分2、纯化组分2均可极显著促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并能增加ConA诱导T淋巴细胞增殖。结论：中药复方的不同活性部位具有不同的免疫调节活性。