思茅松成熟胚的胚性愈伤组织诱导与增殖1）

以思茅松（Pinus kesiya var．langbianensis）成熟合子胚为外植体,1／2MSG培养基为基本成分,采用正交试验设计研究2,4－D、6－BA和TRIA 3种植物生长调节剂对其胚性愈伤组织诱导的影响并获得最优诱导培养基,通过改变生长调节剂种类和降低其质量浓度的方式研究胚性愈伤组织增殖效果,筛选适宜的增殖培养基。结果表明：1／2MSG＋2,4－D 5．000 mg· L－1＋6－BA 4．000 mg· L－1＋TRIA 0．005 mg· L－1为最佳诱导培养基;2,4－D对思茅松成熟胚诱导胚性愈伤组织的影响最大,其次是TRIA,6－BA的影响最小;最佳的增殖培养基为P6＋NAA 2．0 mg· L－1＋6－BA 0．6 mg· L－1。     

毛泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

以毛泡桐(Paulowniatomentosa)无菌苗叶片和茎段为外植体,在附加NAA0.3mg·L-1或2,4 D0.3mg·L-1与6 BA5～20mg·L-1植物生长调节物质组合的MS培养基上进行体细胞胚胎发生及植株再生的研究.结果表明,毛泡桐叶片和茎段在不同植物生长调节物质组合的12种培养基上愈伤组织诱导率可达100%,但在2,4 D与6 BA植物生长调节物质组合的MS培养基上,叶片和茎段胚性愈伤组织诱导率为0,而在MS+NAA0.3mg·L-1+6 BA17mg·L-1培养基上,叶片和茎段的胚性愈伤组织诱导率分别达到88.3%和46.7%.胚性愈伤组织在该培养基上可发育为成熟的体细胞胚胎,进而成为完整植株.     

银杏胚愈伤组织的继代培养及其生理特性研究

以银杏的胚为材料诱导愈伤组织产生,研究愈伤组织生长量及其培养过程中过氧化物酶(POD)活性和ATP含量的变化,结果表明,2,4-D与BA组合比NAA和KT有利于各种外植体愈伤组织的诱导,NAA与KT组合更利于愈伤的继代培养。未成熟胚子叶愈伤组织的生长曲线大致为"S"型,在含BA的培养基上,愈伤组织前期生长较快,而在后期(24~28 d)鲜重有所下降,POD活性和ATP含量在20 d时达到最大;在含KT培养基上,愈伤组织在24~28 d期间仍有增长,其POD活性和ATP含量在28 d时最大,且有继续上升的趋势。这表明POD活性和ATP含量与银杏愈伤组织的生长有一定的相关性。     

通过体细胞胚发生快繁优良刺五加植株的技术

以刺五加合子胚及无菌实生幼苗为试验材料,研究通过直接和间接体细胞胚发生方式,快速获得大量再生植株的技术。结果表明:直接诱导体细胞胚的培养基为MS+2,4-D1.0 mg.L-1,以胚根或子叶为外植体诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg.L-1+BA1.0 mg.L-1,下胚轴为外植体诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg.L-1+BA2.0 mg.L-1。胚性愈伤组织经悬浮培养可发育成成熟体胚,快速获得刺五加幼苗。     

香蕉、大蕉、粉蕉胚性愈伤组织的诱导

本文分别以大蕉、香蕉、粉蕉的未成熟雄花为材料,取其幼嫩花序和花序轴薄片作外植体,研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、KT、IAA、NAA对其胚性愈伤组织的诱导和增殖的影响及诱导过程的一系列反应。结果表明,前胚性性愈伤的诱导难易程度为:大蕉难于香蕉,粉蕉最难,胚性愈伤组织相似。诱导前胚性愈伤组织适宜的培养基配方,大蕉为:MS 6-BA4.0 2,4-D1.;香蕉为:MS BA6.0 2,4-D2.0;粉蕉的配方和香蕉一样。诱导胚性愈伤组织适宜的培养基配方MA IAA1.0 2,4-D4.0 NAA1.0。增殖适宜的培养基,大蕉为:MS 6-BA3.0 2,4-D0.5。香蕉为:MA IAA1.0 2,4-D4.0 NAA1.0粉蕉的配方和香蕉一样。     

白皮松胚性愈伤组织诱导因素的研究

以不同发育时期的未成熟合子胚为外植体,对白皮松胚性愈伤组织诱导因素进行了研究。结果表明,DCR1培养基为白皮松胚性愈伤组织诱导的最适培养基;6 mg·L-12,4D和2 mg·L-16BA是最优激素组合,诱导率高达97.22％;最佳采样时期为6月30日前后。第2期李 茜等白皮松胚性愈伤组织诱导因素的研究     

白皮松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导研究

[目的]建立白皮松体细胞胚胎发生快速繁殖体系,诱导出胚性愈伤组织。[方法]以白皮松成熟合子胚为外植体,以DCR作为基本培养基,研究不同浓度激素对外植体发育和胚性愈伤组织得率的影响。同时在不同激素浓度下对培养4周的外植体外形以及胚性愈伤组织进行了观察与分析。[结果]培养基中加入2,4-D可以使得外植体生长减慢,并出现愈伤组织,6-BA则使外植体的子叶变长,膨大并玻璃化。当2,4-D浓度为8mg/L、6-BA浓度为2mg/L时,胚性愈伤组织的诱导效果较好,诱导率平均为40.625%,该愈伤组织为白色半透明状,细胞小而细胞质浓,说明高浓度2,4-D和低浓度6-BA有利于白皮松成熟胚的胚性愈伤组织的获得。[结论]合适的激素种类和浓度是诱导白皮松成熟胚产生胚性愈伤组织的关键因素。     

樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究

以樟树未成熟合子胚为外植体,探讨了外植体取材时间、植物生长调节剂配比、附加有机物等因素对胚性愈伤组织诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的影响。结果表明:不同采集时期的合子胚愈伤组织诱导率差异显著,只有心形胚时期的合子胚才能诱导胚性愈伤组织;在改良MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基初诱导情况下,后接入改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D培养基中,胚性愈伤组织诱导率可达77.78%;外加添加200 mg/L水解络蛋白和200 mg/L环糊精可保持胚性愈伤组织增殖和体细胞胚诱导,胚性愈伤组织增殖系数达3.86,每克愈伤组织平均分化116.67个体细胞胚,胚性愈伤组织继代周期以25～30 d为宜。在改良MS+200 mg/L环糊精+1.0 mg/L ABA+0.5 mg/L IAA中可以促使体胚成熟萌发,萌发率可达52.78%。将萌发的芽体转接到MS+0.1 mg/L BA+0.5 mg/L IAA+0.2 g/L AC生根培养可获得完整植株。     

抗松材线虫病黑松胚性愈伤组织诱导

以抗松材线虫病黑松(Pinus thunbergii)(以下简称抗性黑松)未成熟合子胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。对影响胚性愈伤组织诱导的因素进行研究发现,在南京地区,6月下旬至7月上旬是采集抗性黑松未成熟球果诱导胚性愈伤组织的最佳时期;抗性黑松未成熟球果在冰箱4℃冷藏7~14 d,能有效地提高胚性愈伤组织的诱导率;麦芽糖更适合抗性黑松胚性愈伤组织诱导;KT质量浓度变化对抗性黑松胚性愈伤组织诱导影响比6-BA显著,诱导抗性黑松胚性愈伤组织最佳激素组合为2,4-D 4 mg·L-1+6-BA 2 mg·L-1或2,4-D 4 mg·L-1+KT 1 mg·L-1。     

荻幼穗愈伤组织诱导及无性系的建立

以获幼穗为外植体诱导出愈伤组织,并建立了体细胞无性系,获得了大量试管苗。幼穗愈伤组织诱导率与发育时期及转管培养降低紫色分泌物浓度有密切关系。BA和2,4-D配合使用有利于胚性愈伤组织的形成,在2,4-D 2mg/L+BA(或KT)0.1mg/L的培养基上。从愈伤组织表面产生浅黄色、质地致密的胚性愈伤组织。愈伤组织转入无激素培养基上培养,也有利于胚性愈伤组织的形成。为了形成大量试管苗,进行了愈伤组织的继代培养和试管苗的增殖研究,再生能力通过无性系得到保持。     

不同激素配比对红掌叶片愈伤组织诱导的影响

以红掌幼嫩叶片为外植体,采用MS培养基,研究了4种激素(生长素2,4-D、NAA和细胞分裂素6-BA、KT)对愈伤组织诱导的影响。结果表明:生长素2,4-D效果优于NAA,细胞分裂素6-BA优于KT,2,4-D是主要的诱导因子。在几种激素组合中,以MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的诱导效果较好。     

外源激素对丹参愈伤组织诱导和有效成分含量的影响

以丹参(S a lv ia m iltiorrh iza)无菌苗的叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的M S固体培养基上,研究了外源激素对愈伤组织的诱导及有效成分含量的影响。结果表明:单独使用3种外源激素在一定浓度范围内均能诱导外植体产生愈伤组织;2,4-D对丹参愈伤组织的生长有促进作用,但当2,4-D的浓度在4 m g/L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;外源激素的适宜组合为2,4-D 2.0 m g/L 6-BA 1.0 m g/L;愈伤组织中丹酚酸B的含量随培养时间的延长呈下降趋势。     

刺嫩芽快繁体系的建立

[目的]研究刺嫩芽快速繁殖技术。[方法]以刺嫩芽的叶片、叶柄和幼茎为外植体进行组织培养,建立刺嫩芽快繁体系。[结果]3种刺嫩芽外植体中,叶片的愈伤组织诱导效果最好,在4种不同激素浓度的MS培养基上均能诱导出愈伤组织;MS培养基中适当增加2,4-D和少量的6-BA,可显著提高愈伤组织诱导率;最适诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,叶片诱导率高达36.7%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.5mg/L;最适分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,平均诱导分化率达85.0%;琼脂加入量控制在7.5～8.0g/L及适当降低6-BA的含量时,可有效防止外殖体玻璃化的产生。[结论]该研究建立的刺嫩芽快繁体系,试管苗驯化率可达85.0%,具有一定的推广与应用价值。     

甘蓝型油菜新不育系恢复材料花药培养影响因素的研究（英文）

Some influential factors of anther culture were studied preliminarily by conducting anther culture of the restorers of new cytoplasmic male sterile(NER).Several results were obtain from this experiment and they were listed as follow:① MS cultrure medium with such hormones as 2,4-D 2 mg/L,6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.5 mg/L was the best suitable for callus induction of NER.②The difference of induction rate was significantly different between different plant age groups.From the 110th day to 141th day,the induction rate was increased with the increase of age and the difference of induction rate reached 0.01 significant difference level.The induction rate reached the highest value in the 141th day then it declined gradually.③The combined use of 2,4-D and 6-BA with proper increase of 2,4-D was good for inducing callus.④The green plantlet induction rate of NER was increased when the concentration of 6-BA increased from 2 mg/L to 4 mg/L.Adding ZT from 0.5 mg/L to 2 mg/L,6-BA would led 2.47% increase of green plantlet induction rate.     

激素对花生根愈伤组织诱导的影响

【目的】通过试验优化激素配比,获得花生根愈伤组织诱导率高的激素组合。【方法】以花生根组织为原料,采用三元二次通用旋转方法设计试验,将花生根组织接种在含不同配比的激素培养基中进行诱导,并统计其诱导率。【结果】三元二次通用旋转方法分析结果表明,回归模型R^2为0．9521,所获回归模型可较好拟合愈伤组织诱导率与各参试因子之间的关系,并达到极显著水平,二次回归数学模型为：y=83．399-1．335x1-2．156x2＋5．469x3-1．844x1x2-1．259x1^2-1．940x2^2-3．557x3^2。单因子分析结果表明,诱导率与2,4-D、KT、6-BA之间均呈抛物线关系,随着激素浓度水平的增加,诱导率表现为先增加后下降的趋势;2,4-D、KT、6-BA的最佳诱导浓度分别为2．04、1．67、3．05mg／L。2,4-D、KT和6-BA的交互作用明显,当2,4-D、KT和6-BA3种激素组合浓度分别为2．50、1．80、3．00mg／L时,花生愈伤组织诱导率达最高值,为87．55％。【结论】不同激素种类对花生根愈伤组织诱导率的影响程度为6-BA〉KT〉2,4-D。以MS为基本培养基,附加30g／L蔗糖、9g／L琼脂及不同浓度配比的2．50mg／L2,4-D、1．80mg／LKT、3．00mg/L6-BA,对花生根愈伤组织诱导具有明显促进效果。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

2，4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

1材料与方法 1．1材料供试材料为12个籼稻品种的成熟种子（籽实）。其中,籼小粘、嘉育948、中二软占、湘晚籼1号、遵籼3号、中鉴1006个品种由国家水稻种质资源中期库提供,扬稻6号、扬籼6547、盐恢559、镇恢084、广恢998、明恢86六个品种由江苏太湖农业科学研究所提供。     

药用植物草麻黄细胞的悬浮培养

[目的]对草麻黄的子叶诱导出的愈伤组织,进行悬浮培养。[方法]采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织继代和悬浮培养研究。[结果]MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA为诱导子叶形成愈伤组织的理想培养基;MS+1.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L6-BA是愈伤组织的适宜继代培养基;2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+300 mg/L水解酪蛋白(CH)是愈伤组织悬浮培养的适宜培养基,愈伤组织干重增加量为0.80 g。[结论]初步选择出草麻黄愈伤组织细胞的悬浮培养条件,为麻黄细胞扩大培养及有效成分提取奠定基础。     

不同激素配比对南非叶叶片愈伤组织诱导的影响

南非叶是热带地区一种重要的中草药材,主要以扦插繁殖为主,为拓宽繁殖途径,实验以南非叶外植体叶为材料,以不同激素浓度配比诱导其愈伤组织,筛选最佳诱导浓度组合。结果表明:(1)NAA和6-BA各5个浓度梯度组合中,1.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA+0.5 g/L活性碳愈伤组织诱导率最高,为88.3%。即当6-BA为定量时,随着NAA浓度的增加,诱导率也逐渐提高;当NAA浓度为1.5 mg/L时,诱导率达到最佳效果,如继续增加NAA的浓度反而会下降。如单独使用6-BA时,则外植体不分化。(2)在NAA和2,4-D组合中,1.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 g/L活性碳愈伤组织诱导率最高,达95%。当2,4-D浓度大于0.5 mg/L,单独使用时,外植体也可诱导分化,增殖效果随着2,4-D浓度的增加而增加。     

灰毡毛忍冬愈伤组织诱导和增殖的研究

将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS 2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA 0.5 mg/L。