罗氏沼虾同工酶表达组织差异性及遗传多样性分析

【目的】从生化遗传角度分析罗氏沼虾群体的同工酶基因座及其酶谱表型,明确不同群体的遗传多样性,为其种质资源鉴定及遗传育种研究等提供基础数据。【方法】采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）对罗氏沼虾肌肉、复眼、鳃、心脏和肝胰腺等5种组织中的苹果酸脱氢酶（MDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、山梨醇脱氢酶（SDH）、苹果酸酶（ME）、磷酸葡萄糖变位酶（PGM）、乙醇脱氢酶（ADH）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷氨酸脱氢酶（GDH）、天冬氨酸脱氢酶（AAT）和酯酶（EST）等11种同工酶进行电泳分析,并选取肌肉同工酶对申漕群体、野生群体、抗病群体、生长群体和浙江群体（2017年引进种虾）等5个罗氏沼虾群体进行遗传学研究。【结果】同种同工酶在罗氏沼虾不同组织间所表现出的酶谱总数和酶带颜色（酶活性）存在明显差异,即罗氏沼虾同工酶具有明显的组织差异性;11种同工酶在罗氏沼虾5种组织中存在26个基因座。其中,EST在肌肉中未表达,但在肝胰腺中表达较多;ME在肌肉、复眼、鳃、心脏和肝胰腺等5种组织中均有表达;SOD-2只在肝胰腺中表达;PGM在肝胰腺和心脏中表达较多。罗氏沼虾肌肉中的7种同工酶存在11个基因座,有3个基因座（SDH-1、PGM-3和LDH-1）呈多态性,多态位点比例为27.27%。5个罗氏沼虾群体的平均预期杂合度在0.1006~0.1416,平均观测杂合度在0.1143~0.1762,Hardy-Weinberg遗传偏离指数（0.1362~0.2444）均为正值,即偏离Hardy-Weinberg平衡。【结论】罗氏沼虾同工酶具有明显的组织差异性,表现为不同组织间的酶谱总数和酶带颜色（酶活性）存在明显差异,因此同工酶可作为研究罗氏沼虾遗传多样性的一种生化遗传标志。5个罗氏沼虾群体均处于杂合子过剩状态,其遗传变异水平较高。     

中国鲎同工酶组织器官特异性表达

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了中国鲎6种组织器官（肝胰腺、心脏、肠、鳃、肌肉和黄色结缔组织）的乙醇脱氢酶（ADH）、山梨醇脱氢酶（SDH）、酯酶（EST）、过氧化氢酶（CAT）、天冬氨酸转化酶（AAT）、苹果酸脱氢酶（MDH）和苹果酸酶（ME）等7种同工酶的活性和分布,并对其酶谱的表型进行了分析.结果表明,中国鲎的同工酶系统存在不同程度的组织特异性.乙醇脱氢酶在鳃和黄色结缔组织中不表达;山梨醇脱氢酶在鳃中不表达;酯酶、过氧化氢酶和苹果酸脱氢酶在6种组织器官中均有表达,但表达活性存在差异;而天冬氨酸转化酶Aat-1位点在鳃中不表达.     

橄榄蛏蚌不同组织乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的电泳分析

为了解橄榄蛏蚌的生化遗传特性,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳,研究了橄榄蛏蚌闭壳肌、斧足、鳃、肠道、外套膜中乳酸脱氢酶（LDH）和苹果酸脱氢酶（MDH）同工酶的电泳酶谱和活性。结果表明,橄榄蛏蚌5种组织乳酸脱氢酶共检测到5条酶带,5种同工酶在闭壳肌中均有表达,在肠道和鳃中只检测到2种,在外套膜中检测到1条酶带;苹果酸脱氢酶检测到4条酶带,其中闭壳肌含有4条谱带,鳃、斧足和盲肠具有3条谱带,而外套膜具有2条染色很浅的微弱带。可见2种同工酶的分布均具有组织特异性。     

4种鳗鲡同工酶的比较研究

以日本鳗鲡（Anguilla japonica）、澳洲鳗鲡（A．australis）、欧洲鳗鲡（A．anguilla）和美洲鳗鲡（A．rostrata）成体为试验材料,应用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对4种鳗鲡的眼球、肌肉、肝脏、心脏和。肾脏5种组织的8种同工酶（酯酶EST、乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、葡萄糖脱氢酶GCDH、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD、醇脱氢酶ADH、超氧化物歧化酶SOD和谷氨酸脱氢酶GDH）进行比较研究。结果表明：GDH在5种组织中均没有表达,7种同工酶（EST、LDH、MDH、GCDH、G6PD、ADH、SOD）在4种鳗鲡均表现出很强的组织特异性。4种鳗鲡的同工酶谱表型非常相似,在同一组织中同工酶的存在位点、表达形态、活性等方面是类似的,但也表现出一定的种间差异性。应用酶谱差异指数D对4种鳗鲡进行聚类分析,结果提示日本鳗鲡和澳洲鳗鲡有较近的亲缘关系、而欧洲鳗鲡和美洲鳗鲡有较近的亲缘关系,这与4种鳗鲡的形态特征和生物学特征相吻合。     

抗柑桔细菌溃疡病的柑桔叶组织内一些酶活性的研究

本试验测定了对柑桔溃疡病草胞菌（Xanthomonas campestris pv.citri,Xcc)敏感性不同的柑桔品种叶组织内过氧化氢酶（CAT）、过氧化酶（PPO）葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PDH）、6－磷酸葡萄糖酸脱氢酶96PGDH）、异柠酸脱氢酶（ICDH）的活性及总酚含量。结果表明，抗病品种CAT、POD、PPO、G5PDH、6PGDH活性及总酚含量均高于敏感品种；而ICDH活性则低于敏感品种。这显示了柑桔叶组织中氧化酶（CAT、POD、PPO），戊糖磷酸途径酶（G7PDH、7PGDH）、三羧酸循环酶（ICDH）的活性及总酚含量与柑桔抗Xcc感染能力密切相关。     

长丝鲈5种组织中相关酶的测定

[目的]测定了长丝鲈5种组织中与免疫学和病理学相关酶的活性。[方法]以购自小汤山水产养殖基地的17尾健康长丝鲈为试材,鲈鱼体重194.42-295.74g,体长19.24-21.10cm,检测了长丝鲈脑、肝、肌肉、肠和鳃5种组织中的谷胱甘肽硫转移酶（GST）、过氧化氢酶（CAT）、转氨酶（GOT、GPT）、乳酸脱氢酶（LDH）和磷酸酶（ACP、AKP）的活性以及脂质氧化产物（MDA）的含量。[结果]长丝鲈脑组织中7种酶的活性大小为LDH〉GST〉GPT〉GOT〉CAT〉AKP〉ACP;肝组织LDH〉CAT〉GST〉GPT〉GOT〉AKP〉ACP;肌肉组织LDH〉GST〉GPT〉GOT〉CAT〉AKP〉ACP;肠组织LDH〉GST〉AKP〉ACP〉GPT〉GOT〉CAT;鳃组织LDH〉GST〉AKP〉ACP〉CAT〉GPT〉GOT。长丝鲈5种组织中,丙二醛的含量高低依次为鳃〉脑〉肠〉肌肉〉肝。[结论]该研究为长丝鲈免疫学和病理学等方面的研究提供基础理论数据。     

刺五加的同工酶与遗传分化的研究（Ⅰ）——花丝长度不同的刺五加 …

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对花丝长度不同的刺五加植株进行了６种同工酶比较分析,结果显示,花丝长度不同的刺五加在酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、莱果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）,细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）等６种同工酶酶谱上表现出不同程度的差异,由此对花丝长度不同的刺五加的遗传分化做出准则。     

柠檬醛对黄曲霉细胞内两个氧化还原酶的影响

柠檬醛（citral）是单萜类小分子芳香醛，研究发现它能有效地抑制黄曲霉细胞内苹果酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶2种酶的活力，其中苹果酸脱氢酶的活力降低了29．2％（以NADP^ 为辅酸）和23．8％（以NAD^ 为辅酶），琥珀酸脱氢酶的活力降低了27．1％。     

鸡肝NADPH生成酶与腹脂关系的研究

利用育成的黄羽鸡－－新扬州鸡，研究了鸡肝内ＮＡＤＰＨ生成酶与腹脂、屠体性状的关系，结果表明。１７周龄３种ＮＡＤＰＨ生成酶中，苹果酸脱氢酶（ＭＤ）活性最高，６－磷酸葡萄糖脱氢酶（ＧＰ）次之，异柠檬酸脱氢酶（ＩＳ）最小。苹果酸脱氢酶可能是脂肪合成过程中提供氢的最主要的酶，３种酶与腹脂重、腹脂率均呈正相关，与屠体性于正或负的弱相关，说明３种ＮＡＫＰＨ生成酶活性低时，鸡的腹脂重（率）降低，产肉性能提高，表     

鸡肝NADPH生成酶与腹脂关系的研究

利用育成的黄羽鸡新扬州鸡，研究了鸡肝内ＮＡＤＰＨ生成酶与腹脂、屠体性状的关系，结果表明，１７周龄３种ＮＡＤＰＨ生成酶中，苹果酸脱氢酶（ＭＤ）活性最高，６－磷酸葡萄糖脱氢酶（ＧＰ）次之，异柠檬酸脱氢酶（ＩＳ）最小。苹果酸脱氢酶可能是脂肪合成过程中提供氢的最主要的酶，３种酶与腹脂重、腹脂率均呈正相关，与屠体性状呈正或负的弱相关，说明３种ＮＡＤＰＨ生成酶活性低时，鸡的腹脂重（率）降低，产肉性能提高，表明此酶的活性有可能作为选择低脂以鸡的辅助手段     

草鱼免疫器官和血液的六种同工酶生化与遗传特性分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对草鱼(Ctenopharyngodon idellus Cuvier et Valencinnes)血液及不同免疫器官中六种同工酶系统（乳酸脱氢酶、醇脱氢酶、苹果酸脱氢酶、3-磷酸甘油脱氢酶、酯酶和过氧化物酶）的分布特性、活性含量、酶谱表型及迁移特征进行了分析,并就不同酶谱特征及其相应基因座的组合表达方式及特点作了讨论。结果表明,对同一种遗传型的草鱼来说,不同免疫器官的同工酶区带的表达与免疫器官的遗传多样性和组织特异性有关,这进一步证实了其特征性表达的同工酶机能的专一性。     

绒白乳菇发酵液提取物对杨树叶枯病菌几种重要酶活性的影响

为进一步明确绒白乳菇发酵液提取物对杨树叶枯病菌生长的抑制机理,研究了该提取物对叶 枯病菌糖酵解途径中己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）与乳酸脱氢酶（LDH）及TCA循环中琥珀酸脱氢酶（SDH）与苹果酸脱氢酶（MDH）活性的影响。结果表明:对照组菌体代谢旺盛,随处理时间的延长,5种酶活性总体呈上升趋势;提取物处理组菌体5种酶活性呈显著的下降趋势,其中处理24 h的SDH活性与处理48 h的HK、PK、MDH活性均已降至为零,而处理48 h 的LDH活性仅为对照组的14.09%。绒白乳菇发酵液提取物对5种酶的活性均具有较强的抑制作用,严重干扰了叶枯病菌菌体糖酵解途径与TCA循环的顺利进行。      

中华倒刺鲃同工酶组织特异性研究

运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对中华倒刺鲃的6种组织(脑、眼睛、心脏、肝脏、肾脏、肌肉)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)进行了初步研究,并对这3种酶在各组织中的同工酶位点及酶谱表型进行了分析。结果表明,中华倒刺鲃的3种同工酶系统具有组织特异性。LDH检测到经典的5条谱带,由3个基因位点编码,C位点仅在肝脏组织中表达;MDH在5种组织(除肌肉外)中检测到3条酶带,仅为细胞质型,肌肉组织中同时表达了细胞质型和线粒体型;EST至少由5个基因位点编码,同工酶酶谱复杂,肝和肾的活性表达较强。     

猪组织中乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定

为了探讨猪各组织器官中乳酸脱氢酶同工酶酶谱特征，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法比较分析了12头三元杂交猪的心、肝、脾、肺等组织中乳酸脱氢酶同工酶酶谱的分布特征．结果表明，肺、脾两组织中乳酸脱氢酶有5条酶带，分别为LDH1，LDH2，LDH3，LDH4，LDH5，其中LDH3最宽，着色最明显；肝组织中只有4条酶带，分别为LDH1，LDH2，LDH3，LDH5；心肌组织中只含3条酶带，分别为LDH1，LDH2，LDH3。     

淹水对玉米根系几种酶活性的影响

研究了淹水后不同耐涝性玉米自交系根中几种酶的活性变化,结果表明：乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）活性显著增加,而谷氨酸脱氢酶（ＧＤＨ）与过氧化物酶（ＰＯＸ）活性下降,淹水后,所有自交系ＮＡＤＰ－苹果酸酶（ＭＥ）活性在两个耐涝性强的自交系中下降,但在耐涝性差的自交系中增加。同时讨论了玉米耐涝性与这４种酶之间的关系。     

洞庭湖区不同体色鲇不同组织同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术(PAGE),对洞庭湖区两种体色(灰色、黄色)鲇的肝脏和肌肉组织中的苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)和乳酸脱氢酶(LDH)等3种同工酶进行研究。结果表明,在MDH同工酶中,两种鲇肝脏各有5条酶带,肌肉均有4条酶带表达;两种体色鲇鱼的同种组织中EST同工酶的酶谱不相同,黄色鲇鱼的EST同工酶检测出8条酶带,而灰色鲇鱼只有4条酶带;EST同工酶在不同组织中也表现出明显的组织特异性。在LDH同工酶中,黄色鲇肝脏有2条酶带,肌肉有1条酶带;而灰色鲇肝脏和肌肉中各有1条酶带。     

口虾蛄乳酸脱氢酶同工酶组织特异性的研究

以口虾蛄为材料进行研究,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对其肌肉、心脏、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究分析.结果表明:不同组织中乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶谱带存在差异,具有明显的组织特异性.肌肉、腹鳃、肝胰腺和心脏中有2条酶带,眼球中只有1条酶带,心脏中的谱带表达最浓,而腹鳃中的酶带表达最弱.     

口虾蛄乳酸脱氢酶同工酶组织特异性的研究

以口虾蛄为材料进行研究,用聚丙烯酰胶凝胶电泳法,对其肌肉、心胜、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究分析。结果表明：不同组织中乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶谱带存在差异,具有明显的组织特异性。肌肉、腹鳃、肝胰腺和心脏中有2条酶带,眼球中只有1条酶带,心脏中的谱带表达最浓,而腹鳃中的酶带表达最弱。     

月鳢和乌鳢同工酶的比较研究

[目的]了解月鳢和乌鳢的生化遗传特性,为其品种鉴定提供理论依据。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直梯度电泳法对月鳢和乌鳢的眼、肌肉、心脏、脾、脑和肾中的2种同工酶进行分析。[结果]月鳢肾脏、脾脏、脑和心脏的苹果酸脱氢酶（MDH）图谱有很清晰的4条带,且带型相同、活性相当;其眼组织的MDH图谱有5条带,肌肉组织的MDH带型分布表现出明显活性区。鸟鳢肾脏、脾脏、脑、肌肉和心脏的MDH图谱有很清晰的4条带;其眼组织的MDH图谱有5条带。月鳢和鸟鳢不同组织中酶的图谱数量一样,但类型不同。在鸟鳢6种组织中,眼睛的MDH表达量最大,而月鳢各组织的MDH表达量差异不大。乳酸脱氢酶（LDH）在乌鳢中的表达量高于月鳢。[结论]硬骨鱼类同工酶系统具有明显的组织特异性和物种特异性,其变化可更直接、正确地反映生物体的差异。     

怀头鲶的同工酶

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合酶的特异性染色方法,分析了46尾怀头鲶(Silurus soldatovi)的乳酸脱氢酶(LDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和酯酶(EST)7种同工酶在肌肉(M)、肝(L)、眼(E)、心(H)、肾(K)5种组织中的表达情况。结果表明,除乳酸脱氢酶,其它6种同工酶都有不同程度的组织特异性。同工酶表型种群遗传学研究发现,7种同工酶共记录17个基因座位,多态座位百分数(P=47．06%)与位点有效等位基因数(Ne=1．470 6)都较大,说明怀头鲶种群遗传多样性偏高。