牛发情周期卵泡发育及其研究方法进展

牛发情周期内排卵卵泡的数量和质量与其繁殖性能直接相关。本文就牛发情周期内有关卵泡发育的概念提出、理论建立、研究技术进展进行综述,并对研究前景进行展望。可以确定,随着新技术、新方法的应用,对牛卵泡生长和闭锁机理的进一步研究将会极大改善牛的繁殖性能。     

激素对家禽卵泡发育的调节

从家禽的生殖生理特点出发，根据近年来有关研究资料，系统地综述了促进性腺激素释放激素，促性腺激素，孕激素，肾上腺皮质激素、性腺激素、细胞因子、褪黑素和前列腺素对家禽卵泡发育和排卵的调节机理，对于促进家禽卵泡发育，提高家禽繁殖性能提供了科学的参考。     

能量对家畜卵泡发育的影响及调控

家畜卵泡发育是被众多因素精确调控的生理过程。日粮能量可能通过不同的机制影响卵泡发育。胰岛素、瘦素和IGF-Ⅰ可能作为代谢信号而介导能量对卵泡发育的影响,即通过下丘脑-垂体-卵巢轴调节促性腺激素释放或直接作用于卵巢。各种代谢信号之间的相互作用也是其介导作用发挥的一个重要方面。     

卵泡发育的激素调节研究进展

卵泡的发育经历了早期的发育、有腔卵泡的生长、优势卵泡的选择以及卵泡成熟排卵等过程。在一个发情周期中，数以万计的原始卵泡发育到排卵阶段时排卵数仅占原始卵泡总数的0.1%-0.2%，绝大数与产仔率有着极大的正相关，要提高产仔率就要防止卵泡闭锁，增加排卵数。而激素调节伴随着卵泡发育的始终，其中垂体促性腺激素和甾体激素可促进卵母细胞的生长、卵母细胞的增殖和卵泡腔的形成，在卵泡发育的过程中起着至关重要的作用。本文主要就促性腺激素、甾体激素和抑制素在卵泡发育中调节作一综述。     

牛卵泡发育及其调控

扼要介绍了牛卵泡发育的一般规律,总结了近年来牛卵泡发育及其调控方面的研究成果,为进一步的研究工作提供了参考资料。     

牛卵泡卵母细胞体外受精和发育的研究

利用屠宰黄牛卵巢作为供试材料 ,对卵巢表面 2～8mm卵泡卵母细胞体外受精(IVF) -受精卵的体外发育 (IVD)进行了系列研究 ,采用上游法、Percoll法和本实验室沿用的直接洗涤法处理牛冻精 ,观察 3种精子处理方法处理牛冷冻精子对卵母细胞体外受精胚胎发育的影响。实验结果 ,就卵裂率指标 ,采用Percoll法处理的精子进行卵母细胞体外受精 ,和上游法及洗涤法分别比较 ,差异均不显著 (P >0 .0 5 ) ;桑囊率指标 ,只有上游法比洗涤法高 ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ,其余差异均不显著。以FERT -TALP液作为受精液采用常规培养方法 ,精卵作用 18～ 2 0h后分开 ,与精卵作用 6～ 8h后分开卵母细胞受精后的 8-细胞发育率及桑囊率变化不大 (P >0 .0 5 ) ;卵裂率指标 ,18～ 2 0h处理组高于 6～ 8h处理组 ,但两组之间差异也不显著。表明 ,在生产中采用FERT -TALP液做为受精液 ,应用上游法处理精子 ,不需要另购试剂 ,精卵孵育时间由 18～ 2 4h缩短至 6～ 8h是可行的 ,其现实意义是可以简化胚胎体外生产的程序 ,节省人力 ,降低成本     

新生犊牛营养代谢和激素调节的特点及其在围产期内的发育变化

选用5头黑白花新生公犊,生后12小时内装置固定式颈静脉血管导管,从出生至2周龄每天采血样测定血浆中几种主要代谢成分和代谢激素的含量,以研究围产期内营养代谢和激素调节的生理特点及其发育变化。结果表明:新生公犊血浆葡萄糖(G)、游离脂肪酸(FFA)、a-氨基氮(a-NH_2·N)、乳酸(LA)的含量生后第1天均处于较高水平,2～3天内明显降低,5日龄后趋于稳定。尿素氮(UN)生后1～4天逐渐升高,5日龄后逐渐降低,10日龄后相对稳定。血浆甲状腺素(T_4)、三碘甲腺原氨酸(T_3)、皮质醇(Cort)的浓度生后变动较大,5日龄内呈下降趋势,约1周龄后相对稳定。胰岛素(Ins)水平在出生喂初乳后无明显的年龄性变化特点,改变食物成分可能对其有显著影响。     

Leptin对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后早期胚胎发育的影响

为了探讨瘦素(Leptin)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎早期发育的影响,研究选择在Earle's盐缓冲的TCM199中添加10IU/mLeCG,10IU/mLhCG,10ng/mLEGF配制成化学限定的基础液,以添加不同浓度Leptin设定各试验组,对猪卵母细胞进行体外成熟培养。以未添加Leptin的基础液为对照组1,而添加5%的胎牛血清(FBS)、10%猪卵泡液为对照组2。比较分析各组卵母细胞核成熟效率,孤雌激活后胚胎的卵裂率,囊胚发育率。结果表明:各添加组卵母细胞成熟率与对照组之间无显著差异(P>0.05);孤雌激活后,各组间的卵裂率和囊胚发育率也无明显差异。同时,在化学限定的猪卵母细胞体外成熟液中添加Leptin对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后早期胚胎的发育无显著效果。     

促卵泡素对鸡等级前卵泡细胞发育的影响

实验研究了鸡等级前卵泡颗粒细胞和膜细胞的发育及促卵泡素(FSH)对其增殖的调控作用。形态学观察显示小白卵泡只有1层颗粒细胞,大白卵泡出现2层颗粒细胞,而小黄卵泡和大黄卵泡中则有多层颗粒细胞。结果表明:卵泡颗粒细胞和膜细胞的密度和细胞层厚度随着卵泡发育的等级而增加。卵泡体外悬浮培养表明,FSH显著刺激小黄卵泡和大黄卵泡中颗粒细胞的增殖,但对膜细胞无显著促增殖作用。由此推测,FSH通过刺激颗粒细胞的增殖促使等级前卵泡进入等级发育。     

育成期营养对皖南牛血液激素变化规律的影响

【目的】本试验研究育成期营养对皖南牛血液激素变化规律的影响。【方法】选择30头去势的体质量相近的7月龄皖南牛,随机分成5组,各组根据体质量的1.9%、1.6%、1.3%、1.0%和0.7%补充育成期精料饲养到24月龄在饲养程序相同条件下育肥3个月,试验过程中每月检测血液生长激素、胰岛素、甲状腺T3和T4的含量。【结果】显示:育成期营养对育成期和育肥期皖南牛血液生长激素、胰岛素、甲状腺T3和T4激素含量变化没有显著影响,年龄和季节(气温)对皖南牛血液四种激素含量有显著影响。【结论】随着年龄的增加,血液生长激素、胰岛素、甲状腺T3和T4的含量降低,高温也能使血液这四种激素含量降低,饲喂高精料的组降低的更加明显。     

体外成熟对牛卵母细胞孤雌激活后发育潜力的影响

本试验在卵母细胞体外成熟的研究基础上,研究了培养用水、卵泡液和成熟时间对卵母细胞体外成熟及孤雌激活后发育潜力的影响.结果表明(1)将卵母细胞分别于蒸馏水和Milli-Q超纯水配制的成熟培养液中培养22～24 h, 孤雌激活后, 卵裂率无显著差异(P>0.05); 但孤雌卵在超纯水配制的胚胎培养液中培养,囊胚发育率为22.3%, 明显高于在蒸馏水配制的培养液中的囊胚发育率14.1%(P<0.05).(2)在成熟培养液中添加10%、20%卵泡液,成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(32.3%, 30.9%)明显高于添加5%和0%卵泡液组的囊胚发育率(21.8%, 22.7%,P<0.05).卵母细胞在添加20%卵泡液的培养液中成熟培养,孤雌激活后囊胚孵化率明显低于添加0、5%、10%卵泡液组的囊胚孵化率(P<0.05).(3)成熟28 h或30 h的卵母细胞孤雌激活后,其囊胚发育率(30.5%或29.4%)明显高于成熟24 h或26 h组的囊胚发育率(20.5%或22.1%,P<0.05).     

哺乳动物卵母细胞发育机理的研究进展

卵母细胞的成熟过程是一个复杂的减数分裂过程，许多分子参与了这个过程的调控，本文就卵母细胞成熟抑制因子（OMI）、成熟促进因子（MPF）、生长分化因子（GDF）、微管辅助蛋白（MAP）、激素、Ca^2 及钙调素等对卵母细胞发育调控机理作一综述。     

卵母细胞激活的信号机制

本文主要阐述精子与卵母细胞质膜相互作用的信号转变,特别是精子启动这些信号途径的机制,并讨论与精子诱导的Ca2 振荡发生反应并在卵母细胞激活中起重要作用的下游信号分子。     

不同激素剂量对幼鼠超数排卵及超排卵质量的影响

应用国产激素制剂对３～８周龄昆明种小白鼠进行了超数排卵处理,重点观察了不同激素剂量对幼龄小鼠的超排效果及超排卵质量的影响。实验结果表明,以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各１０ＩＵ剂量超排３～８周龄小鼠,５周龄小鼠的超排效果（平均获卵８３．８±１０．２个）极显著（Ｐ＜０．０１）好于４～８周龄小鼠的超排效果（平均获卵３９．２～４９．８个）,而３周龄小鼠超排卵受精后体外培养的卵裂率（９７．１％）、桑椹胚率（８６．８％）和囊胚率（６５．１％）与４～８周龄超排卵的（分别为８５．５％～１００．０％、９４．９％～１００．０％和６３．２％～８７．７％）相近;以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各５ＩＵ剂量超排３～５周龄小鼠,３周龄小鼠的超排效果（平均获卵５９．０±６．５个）显著（Ｐ＜０．０５）好于４周龄小鼠的超排效果（平均获卵３１．４±４．９个）,并极显著（Ｐ＜０．０１）好于５周龄小鼠的超排效果（平均获卵２１．４±３．３个）;以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各１５ＩＵ剂量超排３～５周龄小鼠,３周龄小鼠的超排效果（平均获卵４８．６±７．３个）显著（Ｐ＜０．０５）好于５周龄小鼠的超排效果（平均获卵２５．２±５．８个）,也好于４周龄小鼠的超排效果（平均获卵４０．２±５．１个     

玻璃化冷冻对家畜卵母细胞细胞生物学性状影响的研究进展

卵母细胞玻璃化冷冻技术在保存母畜生育力、加速育种过程中发挥重要作用。相较于新鲜卵母细胞,玻璃化冷冻会造成卵母细胞细胞核混乱无序、成熟率降低、细胞质分布变化、脂质结构变化和高活性氧水平、细胞器线粒体分布异常、氧化系统和抗氧化系统异常以及膜电位降低、微管微丝排列混乱、纺锤体结构损坏以及使重要蛋白变化和一些分子发生改变。本文从细胞生物学角度探讨玻璃化冷冻对卵母细胞造成的细胞核紊乱、线粒体膜电位降低、皮质颗粒缺失等损伤,为高效玻璃化冷冻液和冷冻程序的开发、改善玻璃化冷冻卵母细胞后续发育潜力提供参考。     

Effect of Kisspeptin on Regulation of Growth Hormone and Luteinizing Hormone in Lactating Dairy Cows

Kisspeptin (KP),a neuroendocrine regulator of reproduction,is hypothesized to be an integrator of metabolism and hormones critical to the regulation of reproduction.Lactation is associated with enhanced growth hormone (GH) responsiveness and reduced fertility.Our study was designed to determine the effects of lactation on KP-stimulated GH and luteinizing hormone (LH) secretion.Five nonlactating and five lactating dairy cows were used in the study.Experiments were conducted with lactating cows at weeks 1,5 and 11 after parturition.The experimental treatments (saline and KP [ 100 and 400 pmol/kg body weight] ) were given intravenously and blood was collected and plasma was stored until later assay to determine concentrations of GH,LH,progesterone and non-esterified fatty acids.We found that neither dose of KP stimulated an increase in GH secretion.The low dose of KP increased (P ＜0.05)LH concentrations only in lactating cows.The higher dose of KP elicited an increase in circulating LH concentrations in both lactating and non-lactating cows.The lower dose of KP increased ( P ＜ 0.05 ) the area under the curve for LH only in cows during week 5 of lactation,and the area under the curve of LH following the highest dose of KP was greater ( P ＜ 0.05 ) in cows during week 5 of lactation than that for the other groups of cows.In summary,lactation status and stage of lactation did not change the sensitivity of the GH system to KP.However,an effect of stage of lactation on KP-stimulated LH secretion was detected in the dairy cows.Study of the KP system during lactation in dairy cows may provide critical insights into the mechanisms for lactation-associated changes in the reproductive axis.