大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药性的水平传播机制研究

产β-内酰胺酶是大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药的主要原因.其中,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpCβ-内酰胺酶具有重要的临床意义.     

生鲜乳中“解抗剂”β-内酰胺酶研究进展

β-内酰胺类抗生素在奶牛养殖业中的广泛应用导致了生鲜乳中抗生素的大量残留.不法人员将“解抗剂”β-内酰胺酶非法掺入生鲜乳,以掩盖残留的抗生素.而β-内酰胺酶属于违禁食品添加物,是管理机构及有关检测部门关注和打击的重点.笔者等就β-内酰胺酶的危害、现状及检测等方面进行阐述,并提出应对非法添加β-内酰胺酶的措施.     

牛乳中A2β-酪蛋白功效特点及其检测方法研究进展

牛乳总蛋白中酪蛋白约占80％,其中36％是β-酪蛋白.A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白是β-酪蛋白遗传变体中最常见的两种类型,A2β-酪蛋白为天然原型.A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白消化酶解后会产生不同的生物活性肽,来源于A1β-酪蛋白的BCM-7可能与1型糖尿病、心血管疾病、自闭症、精神分裂症、消化功能紊乱等人体慢性非...     

鸭IL-1β基因实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

为了建立鸭白细胞介素-1β(IL-1β)基因的实时荧光定量PCR检测方法,并检测鸭机体器官/组织中IL-1β基因转录水平,试验根据GenBank上鸭IL-1β基因序列设计特异性引物,以鸭IL-1β基因克隆质粒为模板,SYBR GreenⅠ为荧光染料,建立鸭IL-1β基因实时荧光定量PCR检测方法,并用该方法检测鸭机体器官/组织中IL-1β基因的转录水平。结果表明:建立的鸭IL-1β基因实时荧光定量PCR方法的熔解曲线为特异性单峰,标准曲线方程为y=-3. 329x+39. 731,扩增效率为99. 7%,相关系数为1,批内重复变异系数小于1. 00%,批间重复变异系数小于2. 00%;实时荧光定量PCR方法的检测敏感性是普通PCR方法检测敏感性的1 000倍;以该方法进行检测发现,鸭的法氏囊、肺脏、肝脏、肌肉、脑、脾脏、肾脏、十二指肠、心脏和胸腺中IL-1β基因mRNA含量分别为428. 45,973. 43,1 394. 19,568. 22,551. 54,839. 91,2 586. 22,1 161. 92,459. 17,3 276. 16 copies/μL,其中胸腺中含量最高,而法氏囊中含量最低。说明试验建立的鸭IL-1β基因实时荧光定量PCR检测方法具有重复性好和敏感性高等特点,可用于鸭机体器官/组织中IL-1β基因转录水平的检测分析。     

水貂IFN-β基因的克隆与原核表达

从水貂基因组中通过PCR方法克隆得到β干扰素基因(IFN-β),将IFN-β成熟肽插入原核表达栽体pET32a,在E.coli BL21(DE3)工程菌中表达重组蛋白.结果表明,IFN-β片段长561 bp,与已报道的水貂IFN-β基因相比较同源性为100%,IFN-β成熟肽可编码179个氨基酸.重组质粒经ITPG诱导6 h后蛋白表达产物较高,表达量占菌体表达量的50%,分子质量约为34 ku,与预期结果相符.     

饲料中使用β—兴奋剂的安全性评述

β-肾上腺素能兴奋剂,简称β-兴奋剂或激动剂,是一类苯乙醇胺类衍生物,其结构和生理功能类似于肾上腺素和去甲肾上腺素.80年代以来,关于日粮中添加β-兴奋剂能提高胴体瘦肉率,改善畜禽饲料利用率的报道很多.但是有关β-兴奋剂的药物动力学特性、体内代谢和临床上或生产中非法使用β-兴奋剂导致药物残留的报道很少.     

转化生长因子受体Ⅱ在绒山羊皮肤中的表达

选择在转化生长因子(TGF-β)信号转导中起关键作用的转化生长因子受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)为切入点来研究TGF-β信号通路在绒毛周期性生长中的作用.试验通过提取内蒙古绒山羊皮肤总RNA并采用RT-PCR技术对内蒙古绒山羊不同时期皮肤中TGF-βRⅡ基因表达进行测定.结果表明,TGF-βRⅡ在1月份(退行期)、3月份(休止期)、5月份(兴盛前期)和9月份(兴盛期)均有表达.由此推测TGF-βRⅡ可能通过与TGF-β结合对绒山羊绒毛的周期循环起调控作用.     

蛋鸡日粮中添加β—胡萝卜素及牛磺酸对产蛋性能的影响

β-胡萝卜素及牛磺酸(2-氨基乙磺酸)作为营养强化剂已在人类食品中广泛添加应用.β-胡萝卜素及牛磺酸对家禽的影响,已有报道在蛋鸭日粮中添加β－胡萝卜素,显著地提高了蛋鸭产蛋率.为了探讨β－胡萝卜素及牛磺酸对蛋鸡产蛋性能的影响,我们组织了以下对比试验.     

鸡IFN-β启动子荧光素酶报告载体的构建与活性检测

构建并鉴定鸡β干扰素(IFN-β)基因启动子荧光素酶报告基因载体并进行转录活性分析.通过PCR方法从鸡基因组DNA中克隆鸡IFN-β基因启动子,亚克隆到含萤火虫荧光素酶报告基因pGL3-basic载体上,构建鸡IFN-β基因启动子荧光素酶报告基因载体pChIFN-β-luc;用脂质体法将构建的报告基因载体瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,并设置空白对照组和poly(I:C)处理组,检测荧光素酶的活性.经PCR扩增出鸡IFN-β基因启动子序列,双酶切及测序鉴定各重组体构建正确;转染后检测,pChIFN-β-luc具有转录活性,并且在poly(I:C)的刺激下其荧光素酶活性显著升高.本试验为进一步研究鸡IFN-β基因转录调控机制奠定了基础.     

水牛乳β-酪蛋白基因多态性与消化性能及抗氧化性能的关联研究

本研究以水牛乳β-酪蛋白(β-CN)基因多态性分析结果为依据,从水牛乳中分离并纯化出具有活性的β-酪蛋白亚型.采用体外消化模型分析其在胃肠道中的消化性能;根据水解液的抗氧化活性来分析生物活性肽的释放.高效液相色谱法(HPLC)结果显示,水牛乳中β-CN有A和B两种等位基因.消化性能结果显示A等位基因更利于β-酪蛋白在肠...     

PRLR和FSHβ基因对晋阳白猪繁殖性能的影响

用PCR-RFLP和PCR方法对60头晋阳白猪的PRLR和FSHβ基因进行研究,分析了PRLR和FSHβ不同基因型繁殖性状的差异.结果表明,在所检测的猪群中,PRLR和FSHβ基因位点上优势等位基因为B.PRLR基因型繁殖性状呈现出AA＞AB＞BB的趋势,FSHβ基因型繁殖性状呈现出BB＞AB＞AA的趋势.本研究可为今后繁殖性状基因的应用提供基础数据.     

噻环乙胺及小型猪复合麻醉剂(XFM)对大鼠不同脑区β-内啡肽含量的影响

对噻环乙胺及XFM麻醉下,大鼠不同脑区β-EP含量的变化进行研究,以探讨噻环乙胺及XFM中枢麻醉作用可能的机理.选择Wista大鼠84只,先随机抽取12只为对照组.其余随机均分为噻环乙胺组和XFM组,每组又随机均分为麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组3个亚组.用ELISA测定各脑区内β-EP的含量.结果,ip噻环乙胺2mL/kg后,麻醉组大脑皮层、海马、丘脑和脑干内β-EP含量显著增加(P＜0.05或P＜0.01);恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组上述各脑区内β-EP含量显著恢复(P＞0.05);麻醉全过程中小脑内β-EP含量无显著变化.ip XFM 2mL/kg后,麻醉组大脑皮层、海马和丘脑内β-EP含量显著增加(P＜O.01);恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组上述各脑区内β-EP含量显著恢复(P＞0.05);麻醉全过程中小脑和脑干内β-EP含量无显著变化.结果表明,噻环乙胺和XFM对不同脑区β-EP的影响可能是其产生全麻作用的重要机理之一.噻环乙胺麻醉中枢作用可能与增加大脑皮层、海马、丘脑及脑干内β-EP含量有关;而XFM则可能与增加大脑皮层、海马和丘脑内β-EP含量有关.     

广义部分线性模型基于似然距离的局部影响分析

1.似然距离 为了对广义部分线性模型作统计推断,假设:对于响应变量Y密度函数的积分,可以关于参数β在积分号下求倒数.可进一步得到响应变量Y关于兴趣参数β的得分函数(l)(β)、观察信息阵-(l)(α)和Fisher信息阵J(β)的表达式.     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达

为探究TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ对小鼠乳腺组织纤维化的作用,本研究采用奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染小鼠乳腺后,分别于感染后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d采集小鼠乳腺组织,应用免疫组化染色检测TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺组织细胞中的表达与分布,应用荧光定量PCR和western blot方法检测小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和这些蛋白的相对表达水平。结果显示,小鼠感染S.aureus前期(1 d~5 d) TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ主要在其炎性细胞和乳腺上皮细胞中表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和蛋白表达极显著高于对照组(p0.001),感染S.aureus后期(7 d~21 d),细胞外基质较多,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺成纤维细胞和乳腺上皮细胞中均有表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达极显著高于对照组(p0.001)。研究表明,S.aureus感染小鼠后,能够促进乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达,从而促进小鼠乳腺纤维化。本研究为深入探究生长因子受体在乳腺纤维化的分子作用机制奠定了基础。     

β-葡聚糖酶对马岗鹅T淋巴细胞ANAE+及免疫器官的影响

本试验研究了β-葡聚糖酶对马岗鹅的免疫器官及T淋巴细胞ANAE+的影响.试验组马岗鹅用β-葡聚糖酶拌料饲喂,对照组不添加β-葡聚糖酶.于不同日龄检测各免疫器官的器官指数,应用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色法检测T淋巴细胞数目.结果表明,β-葡聚糖酶能显著增加T淋巴细胞数量,对免疫器官没有明显影响.     

牛β-酪蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

以牛β-酪蛋白标准品为免疫原,免疫健康的新西兰大白兔,制备了兔抗牛β-酪蛋白的多克隆抗体.经亲和层析纯化后,用SDS-PAGE电泳及考马斯亮蓝染色检测抗体的纯度,经ELISA法测定β-酪蛋白抗体的效价为1∶1600.Westernblot分析发现,制备的抗体与β-酪蛋白可以发生特异性结合,表明成功制备了纯度较高和特异性较好的牛β-酪蛋白多克隆抗体,为乳腺生物反应器的研究提供了有效的工具.     

β-葡聚糖酶活力及稳定性研究

从确认β-葡聚糖是大麦中的抗营养因子以来,以β-葡聚糖酶为主体的粗酶制剂被用来提高大麦的营养价值.酶制剂中β-葡聚精酶活力高低,以及耐热、耐酸、耐保存、耐蛋白酶分解等特性是衡量这一类酶制剂质量的重要指标.β-葡聚糖酶主要由细菌或霉菌产生,各厂家使用不同菌株及不同的生产加工技术,使酶制剂的质量差别很大.本试验对不同来源酶制剂的β-葡聚糖     

蒙古绵羊β-防御素基因相对表达水平实时定量PCR方法的建立

为了利用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术对蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素基因表达水平进行相对定量测定,建立蒙古绵羊β-防御素基因相对表达水平的实时荧光定量PCR方法,试验根据GenBank中羊β-防御素基因序列设计合成引物,进行实时荧光定量PCR,同时以β-Actin为内参基因对β-防御素基因进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算β-防御素基因的相对表达量.结果表明:扩增产物为β-防御素;利用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术可以测定蒙古绵羊β-防御素基因表达水平相对含量.     

滩羊β-防御素基因的克隆和表达

选取滩羊β-防御素分布较多的气管、食道和口腔等部位的黏膜组织,提取组织总RNA,RT-PCR获得滩羊β-防御素基因全序列.构建逆转录病毒表达载体,实现滩羊β-防御素基因的表达.经测序后得到滩羊β-防御素编码区的核苷酸序列(64个氨基酸).成功构建了带有滩羊β-防御素基因的逆转录病毒载体pLEGFP-SBD,在蓝光激发光下能观察到绿色荧光蛋白,并用SDS-PAGE方法检测到分子量约为8 kD的目的蛋白.该蛋白具有抗细菌和抑制VSV病毒增殖的活性.     

How to improve the nutrition value of poultry feed

包被谷物胚乳的细胞壁是由复杂的被公认为非淀粉多糖(Non-starch polysaccharides,NSP)的碳水化合物组成.谷物以及其它常用饲料原料的细胞壁结构都很复杂,根据所评价的原料种类不同,其NSP的组成差异极大(表1). 阿拉伯木聚糖是小麦、黑麦和黑小麦中的主要NSP.它们是由β-(1-4)-糖苷键接连的木糖作线性主链、β-L-呋喃阿拉伯糖为侧链残基而构成的. β-葡聚糖是大麦和燕麦中主要的NSP.它们是由葡萄糖通过β -(1-3)和β-(1-4)糖苷键连接成直链而构成的.在其它饲料原料中,如大豆粕、葵花籽粕或菜籽粕,还含有其它类型的NSP,如果胶、β-半乳糖和β-半乳甘露聚糖,不过含量很低.