岔口驿马产区马腺疫和马鼻肺炎血清学调查

为明确岔口驿马产区内马腺疫(equine strangles)和马鼻肺炎(equine rhinopneumonitis, ER)流行情况，保障岔口驿马产业健康稳定发展，特进行血清学调查。按随机采样方式，采集甘肃省天祝县16个乡镇的岔口驿马血清510份，用ELISA方法进行马链球菌(Streptococcus equi,S.equi)和马疱疹病毒(Equine herpesviruse, EHV)抗体检测。结果显示，510份马血清中检测出S.equi抗体阳性血清73份，总阳性率为14.31%;检测出EHV抗体阳性血清66份，总阳性率为12.94%。其中，1岁龄以内马匹S.equi和EHV抗体阳性率分别为1.04%、8.33%,1岁至3岁龄马匹抗体阳性率分别为27.19%、14.04%,3岁至5岁马匹抗体阳性率分别为17.33%、14.67%,5岁以上马匹抗体阳性率分别为10.00%、13.33%,且存在同时检测出S.equi和EHV抗体阳性的情况，混合抗体阳性率为6.27%。岔口驿马产区应针对马腺疫和马鼻肺炎，因地制宜，科学制定防控措施。     

青海省马属小巴贝斯原虫和马巴贝斯原虫感染的血清流行病学检测

用重组蛋白作为ELISA抗原对青海地区马的上属小巴贝斯原虫[b(.Th.)equi]和马巴贝斯原虫(B.caballi)感染的流行情况进行了调查。经过对所收集的317份马属动物血清抗体的检测,共检出B(.Th.)equi阳性血清16份,B.caballi阳性血清11份。结果初步说明我省的马属动物群中存在马巴贝斯原虫病的流行。     

青海省乌兰县马小巴贝西亚原虫病的ELISA诊断

用重组的截短的马焦虫(Babesia equi)裂殖子表面抗原2(GST-EMA-2t),作为ELISA诊断抗原,对来自青海省乌兰县的116份马血清进行抗B.equi抗体的检测,共检出15份抗B.equi阳性血清,阳性率为12.93%。结果初步说明我省乌兰县的马群中存在B.equi的感染。     

马泰勒虫病致死孕马报道

<正>马泰勒虫(Theileia equi,旧称马巴贝斯虫)和马驽巴贝斯虫(Babesia caballi)是寄生于马属动物红细胞内,是马梨形虫病的主要病原。据报道马泰勒虫病比驽巴贝斯虫病有更强的致病性和传播能力[1]。马泰勒虫(Theileria equi)隶属于泰勒科(Theileriidae Levine)泰勒属(Theileria),是寄生于马属动物红细胞体内,临床以稽留热、贫血、黄疸等为     

乌鲁木齐米东区某马场驽巴贝斯虫病的初报

<正>马梨形虫病又称马焦虫病,是媒介蜱传播的一种马属动物血液原虫病,病原包括马泰勒虫(Theileia equi,旧称马巴贝斯虫Babesia equi)和马驽巴贝斯虫(Babesia caballi)。主要特征为高热,贫血,黄疽,肝肿大、水肿、溶血,血红蛋白尿,严重时导致死亡。该病严重影响世界各地的养马业和相关马术比赛,造成极大的经济损失。马梨形虫病在世界各地呈广泛分布,伊朗、委内瑞拉、土耳其、以色列、意大     

马驽巴贝斯虫Bc48蛋白的纯化及其应用

为了解新疆南北疆部分疫区马匹携带驽巴贝斯虫(Babesia caballi)抗体情况,运用实验室已构建保存的地方虫株重组Bc48为靶抗原,将重组原核表达质粒pGEX4T-1-Bc48转化至BL21表达系统中,诱导表达出36 KDa的重组蛋白。经KCl法切胶纯化重组蛋白后作为rELISA包被抗原,对阿克苏、伊犁、和硕等7个区域的随机采集样品(n=256)进行马驽巴贝斯虫抗体检测。结果显示,Bc48重组抗原能够精确识别马驽巴贝斯虫标准阳性和阴性血清;所检测的临床样品中,驽巴贝斯虫抗体阳性率为19.5%,其中,南疆2个地区(和硕、阿克苏)马驽巴贝斯虫病阳性率分别为30%、9%;北疆5个地区(昭苏种马场、伊犁卡拉苏、洪纳海乡、阿尕什敖包乡和富蕴县区域)马驽巴贝斯虫抗体阳性率分别为17%、12.5%、17%、5%和35%。本次调查结果为新疆驽巴贝斯虫防控措施及疫苗和驱虫药的使用提供必要的理论依据。     

马驽巴贝斯虫ddPCR检测方法的建立

马驽巴贝斯虫(Babesia caballi)病是马属动物的一种血液原虫病,被农业农村部列为二类动物疫病.本研究旨在建立一种针对马驽巴贝斯虫病的ddPCR检测技术.利用马驽巴贝斯虫特异性引物及探针对反应体系进行优化,测试了方法的特异性、稳定性及灵敏性,对30份可疑样品进行了初步检测.结果显示,该方法具有较好的稳定性,最...     

南北疆部分地区马驽巴贝斯虫病血清学调查

为了解南北疆养殖马区域马匹感染驽巴贝斯虫情况,笔者采用竞争性酶联免疫吸附试验(eELISA)与血涂片镜检法相结合的试验法,对伊犁和巴州两地区马匹随机抽样(N--454),进行驽巴贝斯虫病血清学调查。经c-Elisa调查发现,驽巴贝斯虫状况(呈抗体阳性)总感染率为33.2%;其中北疆4县马驽巴贝斯虫感染率分别15.8%、7.9%、5.7%和2.6%;南疆和静县感染率为O.4%。经血液涂片检查发现极少部分抗体阳性全血发现虫体,其总阳性率6.6%。无临床症状的马匹血清抗体阳性率高说明该地区存在‘传染源'、传播蜱虫,故加以防范。     

青海省乌兰地区马焦虫病的血清学调查

由驽巴贝虫和马巴贝虫引起中国北方地区的马焦虫病的流行情况仍然不清楚,在本研究中我们调查了青海省乌兰地区马焦虫病的流行情况。从乌兰县的铜普地区的牧户中收集了97份马血清样品,并分别用重组P48蛋白作为ELISA诊断抗原,进行马巴贝斯原虫的诊断检查,调查青海省乌兰地区马焦虫病的流行情况。1材料和方法1.1通过载体pGEX大肠杆菌表达的P48作为ELISA诊断抗原来诊断驽巴贝虫(Babesia caballi),方法简述如下:重组P48蛋白用谷胱苷肽琼脂糖4B球珠纯化,作为ELISA诊断抗原,检测巴贝虫抗体。巴贝虫阴、阳性标准血清,均为日本国家原虫中心…     

新疆和静县和吐鲁番地区牛感染巴贝斯虫病的血清学调查

为了解双芽巴贝斯虫和牛巴贝斯虫在新疆疫区牛感染的状况,从吐鲁番市周边散养户、和静县部分散养户采集了273份牛(牦牛)血清。采用间接ELISA方法对血清样本进行牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫抗体检测。结果显示:和静县部分散养户被检牦牛血清抗牛巴贝斯虫(B.bovis)抗体阳性率为18.68%(17/91);被检牦牛血清抗双芽巴贝斯虫(B.bigemina)抗体阳性率为9.89%(9/91)。吐鲁番市周边散养户被检奶牛血清抗牛巴贝斯虫(B.bovis)抗体阳性率为15.38%(28/182);被检奶牛血清抗双芽巴贝斯虫(B.bigemina)抗体阳性率为9.34%(17/182)。通过调查发现牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫均有混合感染的现象,其中和静牦牛混合感染率为6.59%(6/91);吐鲁番奶牛混合感染率为8.24%(15/182);不同品种牛均可感染牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫,其感染程度及感染率具有一定的差异。本次试验结果可为有效防治新疆疫区牛梨形虫病提供重要依据。     

驽巴贝斯虫病PCR检测方法的建立和应用

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6个巴贝斯虫株中,仅驽巴贝斯虫株能扩增出特异性片段,马泰勒虫、双芽巴贝斯虫、莫氏巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫、大巴贝斯虫的扩增结果均为阴性。对45份马属动物血样进行检测,本研究建立的PCR方法测得驽巴贝斯虫病的阳性率为26.67%(12/45),与显微镜检测方法进行了比较,结果显示PCR检测方法可显著提高驽巴贝斯虫的检出率。     

驽巴贝斯虫病巢式POR检测方法的研究

针对驽巴贝斯虫(Babesia caballi)rap-1基因序列设计内外两对引物,从实验室感染驽巴贝斯虫的马匹上采集全血提取DNA,采取两次扩增的方法,获得222bp基因片段,经测试此靶序列为驽巴贝斯虫特异性基因片段.采用本研究方法对已知的阳性马匹和阴性马匹进行检测,准确率为100%.     

岔口驿马消化道寄生虫感染动态调查分析

岔口驿马是我国著名的走马品种。为加强岔口驿马疫病防控，促进岔口驿马的保种选育和马产业健康稳定发展，特进行了岔口驿马消化道寄生虫感染动态调查分析。采用饱和盐水漂浮法、麦克马斯特计数法等方法，动态观察全年消化道寄生虫感染情况，并分析不同因素对岔口驿马消化道寄生虫感染的影响。结果显示，岔口驿马消化道寄生虫一年四季均有感染，平均感染率为77.57%,马圆线虫(S.equinus)、马副蛔虫(P.equorum)、马尖尾线虫(O.equi)、裸头绦虫(A.perfoliata)、细颈三齿线虫(T.minor)、韦氏类圆线虫(S.westeri)和马胃蝇蛆(Gasterophilus)等寄生虫均有检出，其中以马圆线虫(S.equinus)为优势虫种，感染率为71.67%,消化道寄生虫混合感染率达94.45%,未发现马球虫(Eimeria spp.)感染性卵囊。平均感染强度(EPG值)为366个，其中以3月和10月感染强度最高，6月和11月感染强度最低。2岁以内、3～5岁、6～9岁和10岁及以上年龄段的感染率分别为87.50%、81.41%、72.06%、67.06%,差异显著(P<0.05)...     

驽巴贝斯虫病巢式POR检测方法的研究

针对驽巴贝斯虫(Babesia caballi)rap-1基因序列设计内外两对引物,从实验室感染驽巴贝斯虫的马匹上采集全血提取DNA,采取两次扩增的方法,获得222bp基因片段,经测试此靶序列为驽巴贝斯虫特异性基因片段。采用本研究方法对已知的阳性马匹和阴性马匹进行检测,准确率为100%。     

驽巴贝斯虫病巢式PCR检测方法的研究

针对驽巴贝斯虫（Babesia caballi）rap—1基因序列设计内外两对引物，从实验室感染驽巴贝斯虫的马匹上采集全血提取DNA，采取两次扩增的方法，获得222bp基因片段，经测试此靶序列为驽巴贝斯虫特异性基因片段。采用本研究方法对已知的阳性马匹和阴性马匹进行检测，准确率为100％。     

马巴贝西虫EMA-1蛋白基因在杆状病毒系统中的表达

马巴贝西虫 (Babesia equi)是一种蜱传播的血液寄生原虫。马巴贝西虫裂殖子抗原 EMA- 1,是 B.equi的一种主要的表面蛋白 ,基因长度为 816 bp,由 2 72个氨基酸组成 ,分子量为 34k Da,具有较强的免疫原性和特异性 ,被认为具有广泛的开发前景。本文利用杆状病毒真核表达系统对 B.equi的 EMA- 1基因进行了体外表达 ,为进一步研究 EMA- 1的结构和功能 ,研制重组诊断抗原奠定基础。1　材料与方法1.1　虫体　马巴贝西虫 ,由日本带广畜产大学原虫病分子免疫研究所提供。1.2　体外培养　按 Avarzed等人的方法进行。当红细胞的染虫率达 10 %～ 2…     

伊犁部分地区马泰勒虫抗体的检测

为了解伊犁部分地区马场感染马泰勒虫(Theileria equi)的情况,试验将重组原核表达质粒pGEX4T-1/EMA1转化至大肠杆菌菌株BL21表达系统中,诱导表达56 ku的重组蛋白(EMA1);经KCl方法切胶纯化后作为间接ELISA包被抗原,对伊犁州六个不同地区随机采集的样品(n=352)进行马泰勒虫抗体的检测。结果表明:以GST-EMA1蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA法可明显区分马泰勒虫阳性血清和健康马血清。在所检测的血清样品中,马泰勒虫血清抗体阳性率为7.4%(26/352),其中乌尊布拉克乡的马泰勒虫血清抗体阳性率为7.3%(4/55)、昭苏镇的马泰勒虫血清抗体阳性率为13.2%(10/76)、萨尔阔布乡的马泰勒虫血清抗体阳性率为8.2%(6/73)、察汗乌苏乡的马泰勒虫血清抗体阳性率为6.5%(4/62)、喀拉苏乡的马泰勒虫血清抗体阳性率为2.0%(1/49)、喀夏加尔乡的马泰勒虫血清抗体阳性率为2.7%(1/37);伊犁州等六个地区马场马泰勒虫血清抗体阳性率随年龄而改变,其中7岁马匹的马泰勒虫的血清抗体阳性率最高。说明马泰勒虫在伊犁地区马匹中普遍存在,应该加强对该病的检测、监控。     

新疆昭苏地区马梨形虫病病原及抗体检测

马梨形虫病是由马驽巴贝斯虫和马泰勒虫寄生于马属动物的红细胞内所引起的一类血液原虫病,呈全球性分布,尤其在新疆发病率更高,处于逐年上升趋势,对区域性马产业的发展影响极大。为了解2018年新疆昭苏养马区域马梨形虫的感染情况,随机采集昭苏县18个乡镇的马全血及血清各858份,采用PCR和间接ELISA分别进行检测,对两种方法检测的18个地区、不同年龄阶段的马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染情况进行统计学分析。结果显示,PCR检测马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的阳性率分别为12.12%、13.87%和2.80%;间接ELISA检测马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的抗体阳性率分别为15.50%、10.14%和2.56%;不同年龄阶段筛查结果显示,在6岁以下的马匹感染马驽巴贝斯虫、马泰勒虫及混合感染的阳性率较高,并且不同地区的不同年龄阶段马匹的马梨形虫感染率存在不同程度的差异。此次获得的昭苏县马梨形虫感染情况的一线数据,可为当地养马区域马梨形虫病的综合防控提供技术支撑。     

新疆伊犁地区马鼻肺炎、马腺疫、马流产沙门菌病的血清学调查

为了解新疆伊犁地区的马鼻肺炎、马腺疫及马流产沙门菌病的流行现状和特点,本研究从新疆伊犁地区养马最为集中的10个乡镇和3个国有马场采集了818份血清样品。分别采用ELISA法和微量凝集法进行马疱疹病毒(EHV)、马腺疫链球菌(S.equi)和马流产沙门菌(S.abortus)的抗体检测,并应用统计学方法从年龄、性别、地域及养殖规模等方面对影响这3种病感染的风险因素进行了分析。检测结果显示该地区EHV抗体阳性率为28.85%,S.equi抗体阳性率为24.69%,S.abortus抗体阳性率为25.31%。性别和年龄对马鼻肺炎感染影响显著(p0.05)。地域和年龄对马链球菌抗体阳性率的影响显著(p0.05);地域对马流产沙门菌抗体阳性率的影响显著(p0.05)。马疱疹病毒(EHV)和马腺疫链球菌(S.equi)的混合感染率较高。本研究为新疆地区马的这3种传染病有效防控提供了调查数据。     

套式PCR检测马巴贝斯虫

根据GenBank中马巴贝斯虫(Babesia equi)ema-1基因序列,设计合成内外2对引物,其中外引物扩增ema-1基因60～627nt间567 bp片段,内引物扩增ema-1基因259～488nt间229bp片段。从实验室感染马巴贝斯虫阳性马匹全血样本中提取DNA,采取2次扩增的方法,扩增到229bp特异性条带,建立了适合马巴贝斯虫快速检测的套式PCR方法。经重复性试验和特异性试验,结果显示,马巴贝斯虫阳性样本在229bp均出现条带,而驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫扩增结果为阴性。采用该方法对已知阴、阳性的16份马匹全血样品进行检测,有8份为阳性,与实际结果的符合率为100%。表明,所建立的方法具有较高的重复性和特异性,可用于马巴贝斯虫病的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查。