四黄止痢颗粒不同组分联合对多杀性巴氏杆菌的体外抑制作用研究

探究四黄止痢颗粒及其组分联合对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果。通过二倍稀释法测定单药、3种中药联合、4种中药联合以及6种中药联合(自配四黄止痢颗粒)、市售四黄止痢颗粒对多杀性巴氏杆菌的MIC和MBC。结果表明,四黄止痢颗粒方剂的6种中药中对多杀性巴氏杆菌的抗菌活性最强是黄连,MIC、MBC均为1.563 mg/mL;板蓝根的MBC大于200 mg/mL,对多杀性巴氏杆菌的抑菌效果最差。3种药物联合应用,其中黄柏+黄连+大黄对多杀性巴氏杆菌的抗菌效果最好,其MIC、MBC均为0.781 mg/mL;4种药物联合应用,其中板蓝根+大黄+黄柏+黄连、黄芩+大黄+黄柏+黄连、黄芩+板蓝根+黄柏+黄连等3组中药联合的抗菌效果最好,其MIC、MBC均为0.781 mg/mL。自配四黄止痢颗粒的MIC和MBC为50 mg/mL;市售四黄止痢颗粒方剂MIC均为200 mg/mL。3种中药联合、4种中药联合应用的抗菌活性明显优于单味中药,且都比自配四黄止痢颗粒和市售四黄止痢颗粒对多杀性巴氏杆菌的抗菌效果好,其中精简的组方中,黄柏+黄连+大黄对多杀性巴杆菌的抗菌效果最好。     

翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果研究

研究翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果。利用传统水煎法制备翼草景香水煎液，用HPLC方法测定翼草景香水煎液中红景天苷浓度，并用红景天苷浓度标定翼草景香水煎液药物浓度，分别采用牛津杯法和试管2倍稀释法测定翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度（MIC），通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型，测定翼草景香水煎液浓度为0.12316 mg/mL时，在感染前和感染后给药方式下，分别给与0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL药物时对小鼠的体内感染防治作用。结果表明，当翼草景香水煎液浓度为0.49263 mg/mL时，抑菌圈平均直径为28.5 mm；MIC值为0.00385 mg/mL，经病理解剖、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统（VTEK 2 COMPACT）系统细菌鉴定，表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功，当水煎液浓度为0.12316 mg/mL时，0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL预防组和治疗组小鼠死亡率分别依次为50%，41.7%，81.8%，66.7%，50%和75%。因此，翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内、外抑菌活性，且其预防作用较治疗作用明显。     

菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌体内外抑菌活性研究

研究菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的体内外抑菌活性作用。用传统水煎法制备菪可轮蒲水煎液,用HPLC法测定菪可轮蒲水煎液中龙胆苦苷浓度,并用龙胆苦苷浓度标定复方药物浓度,分别采用牛津杯法和宏量肉汤稀释法测定菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型,测定浓度为0.0232mg/mL的菪可轮蒲水煎液,在感染前和感染后给药方式下,分别给予0.1、0.3、0.5mL药物时对小鼠多杀性巴氏杆菌感染的预防和治疗作用。结果显示,菪可轮蒲水煎液浓度为0.0464mg/mL时,对多杀性巴氏杆菌的抑菌圈平均直径为13.5mm,MIC值为0.0029mg/mL,经病理剖检、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统(VITEK2COMPACT)细菌鉴定,表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功,且预防组各组和治疗组各组小鼠死亡率依次为58.3%、41.7%、83.3%、66.7%、58.3%和91.7%。综合以上试验结果,菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内外抑菌活性,且其预防作用较治疗作用明显。     

26味中药对狐源致病性大肠埃希菌地方株体外抑菌试验

为了研究五味子等26味中药对狐源致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)HL2(O1)地方流行株的体外抑菌活性,采用水提法制备了单味中草药药液,浓缩为生药含量为1g/mL,利用平板打孔法和微量二倍稀释法分别测定26味中药对狐源致病性E.coli HL2(O1)的抑菌圈直径和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,五味子、诃子对狐源致病性E.coli呈极度敏感,抑菌圈直径在21.3mm~20.3mm之间,MBC均为7.825mg/mL;金银花、黄连、苦参3味药物高度敏感,抑菌圈直径在16.4 mm~19.3 mm之间,MBC在15.65mg/mL~31.25mg/mL;板蓝根、黄芩、五倍子等10味药物中度敏感,抑菌圈直径在11.3mm~14.2mm之间,MBC在62.5mg/mL~250mg/mL;连翘、地丁、白头翁、穿心莲4味药物为低度敏感;其余药物无明显的效果。筛选出了五味子、诃子、黄连、金银花、苦参5味对狐源致病性E.coli HL2(O1)地方株敏感的中药,可为狐源致病性E.coli的防治提供基础。     

白头翁散对不同细菌的体外抑菌效果观察

为了探讨白头翁散对不同细菌的体外抑菌效果,本试验采用水提法分别提取白头翁散组方中4味中药白头翁、秦皮、黄柏、黄连的有效成分,通过试管二倍稀释法测定4味中药、自配白头翁散方剂及两种市售白头翁散水提物对7种不同细菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,单味中药中黄连对大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽胞杆菌、无乳链球菌、副溶血弧菌、多杀性巴氏杆菌均呈现较好的抑菌效果和杀菌效果,MIC为1.563～50.000 mg/mL,MBC为6.25～400.00 mg/mL。自配白头翁散方剂抑菌和杀菌效果更好,MIC为0.781～25.000 mg/mL,市售白头翁散的抑菌效果和杀菌效果均不及自配白头翁散。     

不同中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌试验

为研究中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的抑制效果,采用纸片法对自拟的6个中药复方进行敏感性试验,并用试管二倍法测定中药复方的最小抑菌浓度。结果表明,6个中药复方均具有不同程度的抑菌作用,其中复方4对大肠杆菌的抑菌效果较好,平均抑菌圈直径为21.2 mm,平均MIC值为62.5 mg/mL;复方1对沙门氏菌效果较好,平均抑菌圈直径为19.8 mm,平均MIC值为41.7 mg/mL;复方3对多杀性巴氏杆菌效果较好,平均抑菌圈直径为23.3 mm,平均MIC值为3.92 mg/mL,3个复方均呈高度敏感。表明中药复方可以用于鸡细菌性腹泻的防治。     

三种疫苗对牦牛免疫血清抗体效价监测分析

为监测牛病毒性/黏膜病灭活疫苗、牛副伤寒灭活疫苗及多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗对牦牛的免疫效果,本试验选取健康牦牛40头,以多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗每头4 mL的剂量、牛病毒性/黏膜病灭活疫苗及牛副伤寒灭活疫苗每头2 mL的剂量进行接种,并于免疫后30、60、90、120、150和180 d后采集血液,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对牦牛血清抗体进行检测。结果表明,病毒性/黏膜病灭活疫苗免疫保护效果较好,免疫6个月后能维持较高的血清抗体效价;牛副伤寒灭活疫苗及多杀性巴氏杆菌灭活疫苗免疫抗体效价较低。本试验对免疫后抗体的监测评估为今后牦牛三种疫病的疫苗免疫防控提供了数据支撑。     

中药联合对巴氏杆菌的体外抑菌作用研究

探讨中药水提取物及其联合对巴氏杆菌的体外抑菌效果。选用黄连、香附、丁香等30味中药,采用水提法提取药液,用试管二倍稀释法测得单药最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并将抑菌效果较好的几味中药作为主药与其他中药进行联合,测定联合后的MIC与MBC。结果表明,单味中药中黄连对巴氏杆菌的抗菌活性最佳,MIC和MBC均为12.5 mg/mL。选取抑菌效果较好的黄连、丁香、香附、蒸陈皮等中药与其他中药联合,结果表明黄连与四制艾叶联合后对巴氏杆菌的抑制效果最好,其MIC和MBC均为3.125 mg/mL。说明黄连与四制艾叶联合的抑菌效果较好,且为协同作用,优于两种单药各自的抑菌活性,可作为抑制巴氏杆菌的药物进行进一步的研究。     

24味中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株体外抑菌试验研究

为了研究24味中药水提物对吕梁地区宠物犬源致病性大肠杆菌(Escherichia coli)流行株NJ-1的体外抑菌效果,利用水提法提取24味中药有效成分,使其浓度为1 g/m L;利用牛津杯法和试管二倍稀释法分别测定24味中药水提物抑菌圈直径大小和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株对黄连、诃子、五倍子、五味子、苦参5味中药水提物高度敏感,抑菌圈直径在18.1~20.0 mm之间,MBC在7.80~15.63 mg/m L之间;其余的中药水提物对宠物犬源致病性大肠杆菌NJ-1株存在不同程度的敏感性。说明中草药可应用于犬源致病性大肠杆菌病的治疗。     

肉猪用中药饲料添加剂的抑菌和毒理学试验

为研究中药饲料添加剂的抑菌和毒理学效果,设计两种肉猪专用的中药饲料添加剂提取液进行抑菌效果试验和毒理学试验。结果表明,大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的抑菌圈直径,试验A组分别比试验B组高2.1 mm、2.1 mm、0.7 mm和1.8 mm;大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的最小抑菌浓度,试验A组分别比试验B组低0.18 mg/mL、0.25 mg/mL、0.13 mg/mL和0.10 mg/mL;大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的最小杀菌浓度试验A组分别比试验B组低0.32 mg/mL、0.25 mg/mL、0.12 mg/mL和0.24 mg/mL。急性攻毒试验和蓄积毒性试验结果表明,两组肉猪中草药饲料添加剂是无毒类物质,说明本试验设计的两种中药组方在肉猪饲养过程中可以作为中药添加剂使用,且试验A组的抑菌效果强于试验B组。     

氟苯尼考对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果研究

[目的]观察抗菌药物氟苯尼考对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果,评价其对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果。[方法]采用微量肉汤稀释法测定临床常用的9种抗菌药物对多杀性巴氏杆菌的抑菌效果,筛选敏感抗菌药物,进一步选择小白鼠开展预防试验和治疗试验,观察抗菌药物对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠的防治效果。[结果]在9种常见的抗菌药物中,对多杀性巴氏杆菌抑菌效果最好的是氟苯尼考和多西环素,2种药物的MIC为1 μg/mL,MBC为2 μg/mL;抑菌效果最差的是延胡索酸泰妙菌素,MIC为64 μg/mL,MBC为128 μg/mL。利用多杀性巴氏杆菌人工感染小白鼠,治疗试验与预防试验均设置阴性对照组（注射生理盐水）、阳性对照组（攻毒细菌）以及药物治疗或预防组（攻毒细菌+氟苯尼考）;治疗试验获得氟苯尼考的保护率为78.6%,预防试验的保护率为84.6%。[结论]氟苯尼考对人工感染多杀性巴氏杆菌小白鼠有较好的防治效果。     

9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌体外抗菌活性研究

采用试管二倍稀释法，测定了9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性（MIC和MBC）。结果表明氨苄西林、阿莫西林和诺氟沙星对禽多杀性巴氏杆菌的MIC均为0．125μg／mL，诺氟沙星MBC为0．5μg／mL，氨苄西林和阿莫西林的MBC都为1．0μg／mL。氟苯尼考、替米考星和卡那霉素对禽多杀性巴氏杆菌的MIC分别为：0．5、2和2μg／mL。     

38种中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌的抑杀效果比较分析

为明确中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌(Vibrio harveryi)的抑杀效果,选择38种常用中草药,采用牛津杯打孔法测定了中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌的敏感性。结果哈维氏弧菌对五倍子、诃子和黄连等9种中草药高度敏感,其抑菌圈直径为22～27 mm;对大黄、虎杖和秦皮等10种中草药敏感,其抑菌圈直径为12～19 mm;对其他中草药无抑菌作用。同时,采用微量二倍稀释法和液体涂布法测定了上述19种中草药对哈维氏弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:上述中草药对哈维氏弧菌均具有抑杀作用,其MIC和MBC分别为1.5～50 mg/mL和3.1～100 mg/mL,其中以五倍子的抑杀效果最好,对哈维氏弧菌的MIC为1.5 mg/mL,MBC为3.1 mg/mL。     

中西药联合对小鼠巴氏杆菌病的防治效果试验

为了解中西药联合对巴氏杆菌的体内外抑菌效果,采用二倍稀释法和微量肉汤稀释棋盘法测定香附、黄连、山药、山银花、益母草、决明子6种中药和阿莫西林、硫酸新霉素、盐酸多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、替米考星、头孢噻呋钠7种抗菌药对巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),筛选抑菌效果最好的中药和抗菌药,观察其对小鼠人工感染巴氏杆菌病的防治效果。结果表明,单味中药香附抑菌效果(MIC为25 mg/mL)和杀菌效果(MBC为50 mg/mL)最好,抗菌药中恩诺沙星体外抑菌效果(MIC为0.5μg/mL)和杀菌效果(MBC为1μg/mL)较好,香附与恩诺沙星联合用药抑菌效果增强(FIC=0.56)。预防组和治疗组相对于阳性对照组的死亡率有所降低;香附对小鼠的巴氏杆菌病预防和治疗的保护率分别为10%、25%,恩诺沙星对小鼠的巴氏杆菌病预防和治疗的保护率分别为60%、75%,香附与恩诺沙星联合使用时的预防与治疗效果增强,保护率分别为70%和80%。表明香附与恩诺沙星两种药物联合比单药的防治效果好。     

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1：1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。     

中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌效果试验

为了分析20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712体外抑菌效果,试验采用水提法制备了中药药液,浓缩为1 g生药/mL;采用牛津杯法和微量二倍稀释法分别测定20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌圈直径和最小杀菌浓度(MBC),采用微量肉汤棋盘稀释法测定两种敏感中药组合的联用抑菌指数(FICI)。结果显示,藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712对黄连、诃子、白头翁、五味子、五倍子5种药物高度敏感;其抑菌圈直径在16.3 mm～19.8 mm之间,MBC在15.65～31.25 mg/mL之间;诃子+黄连、诃子+白头翁2种中药组合具有协同作用,诃子+五倍子、五味子+黄连、五味子+白头翁3种中药组合具有相加作用,五味子+五倍子中药组合有拮抗作用。为中药防治藏香猪源致病性大肠埃希菌病提供研究基础。     

牦牛巴氏杆菌病诊治

<正>巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌引起的,多种畜禽、野生动物共患的一种传染病。猪巴氏杆菌病称猪肺疫、禽巴氏杆菌病称禽霍乱。患病动物以出现败血症和炎性出血为主,主要表现为高热、颈部水肿、牙关紧闭、流涎、内脏广泛出血,有肺炎。1流行病学多杀性巴氏杆菌为条件性致病菌,健康牦牛呼吸道和扁桃体中存在本菌,但不引起发病,当长途运输、气候突变、感染寄生虫、饲养管理方式改变、过度劳役、营养不良造成牦牛机体抵抗力     

22味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验研究

为了筛选有效中药抑制奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌,采用药敏纸片法测定黄芩等22味中药的体外抑菌效果。采用水提法制备中药药液,浓缩为生药1 g·mL^-1,测定22味中药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：黄芩和地榆对金黄色葡萄球菌呈高度敏感,白术、丹皮等5味中药均属中度敏感。选取体外抑菌效果最好的黄芩和地榆加上白术、丹皮组成不同比例复方进行抑菌实验,结果表明：复方Ⅱ和复方Ⅶ的抑菌和杀菌效果最佳,其MIC和MBC均为31.25 mg·mL^-1。     

西藏牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏分析

为了对西藏牦牛多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定和药敏分析,为多杀性巴氏杆菌病的诊断、治疗以及防控提供一定理论依据,本试验对病死牦牛的内脏组织进行了细菌分离,再通过涂片镜检、生化鉴定、荧光定量PCR法对分离细菌株进行了鉴定,并利用17种抗菌药物对该细菌株进行了药敏分析.结果 显示:该细菌株镜检为革兰氏阴性短杆菌,在血清琼脂平皿上形成了表面光滑、湿润、边缘较整齐的半透明灰白色菌落,在麦康凯琼脂平皿上未见生长;符合多杀性巴氏杆菌生化鉴定标准,且在细菌株DNA基因组中能扩增出多杀性巴氏杆菌鉴定基因,表明该致病菌为多杀性巴氏杆菌.13种抗菌药物对该细菌株有显著抑制作用,但其抑菌机理还需进一步研究.     

25种中草药对3种鱼源嗜水气单胞菌的抑杀效果比较

为了研究25种中草药对鲤鱼、青鱼和草鱼源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌效果,并筛选出具有较好抑菌作用的单味中草药,试验采用水提法提取中草药的有效成分,通过牛津杯打孔法和微量二倍稀释法分别测定了25种中草药对3种不同来源嗜水气单胞菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:黄柏、丁香、艾叶等9种中草药对鲤鱼源嗜水气单胞菌有抑菌作用,抑菌圈直径为10~22 mm,MIC为3. 2~12. 5 mg/mL,MBC为6. 3~25 mg/mL;赤芍、大青叶、茵陈等12种中草药对青鱼源嗜水气单胞菌有抑菌效果,抑菌圈直径为10~22 mm,MIC为3. 2~12. 5 mg/mL,MBC为6. 3~25 mg/mL;赤芍、丁香、黄柏等12种中草药对草鱼源嗜水气单胞菌有抑菌效果,抑菌圈直径为12~28 mm,MIC为3. 2~12. 5 mg/mL,MBC为6. 3~25 mg/mL。说明不同来源的嗜水气单胞菌对不同中草药的敏感性不同。