蛹虫草产量及主要活性物质的影响因素研究

以提高蛹虫草子实体产量、活性物质含量为研究目的。以小麦为基本培养基固体培养蛹虫草子实体,采用单因素、二因素试验研究碳源、氮源和菌种对蛹虫草实体产量、活性物质含量的影响。产量单因素实验结果表明,每瓶添加1 g蚕蛹粉、营养液中白砂糖浓度为20 g·L~(-1)的培养基培养子实体产量最高;但不同水平的蚕蛹粉、黄豆粉对子实体产量影响差异不显著。二因素实验结果表明,当培养基营养液中白砂糖浓度为20 g·L~(-1),蚕蛹粉添加量为2 g·瓶~(-1)时,子实体产量最高;碳源、氮源及碳源和氮源的互作对蛹虫草的产量有极显著的影响。活性物质单因素实验结果表明,培养基营养液中蔗糖浓度为10 g·L~(-1)时腺苷和虫草素含量最高;每瓶培养基中添加1 g土豆粉时,子实体多糖含量最高,与其他营养添加物质有显著差异;不同菌种对产量和主要活性物质含量的影响差异显著。     

基于响应面的蛹虫草菌质固体发酵工艺条件优化

优化蛹虫草固体发酵菌质工艺以缩短发酵周期,提高有效成分含量,有效节约成本。通过单因素筛选和响应面优化法对碳源、氮源、料液比、小麦装料量、接种量、培养时间和腺苷浓度等培养条件进行优化。结果显示,蛹虫草固体发酵菌质最佳培养方案的小麦装料量为15 g,料液比为1.0∶1.3,接种量为2 mL,培养时间为17 d,营养液碳源为可溶性淀粉、氮源为黄豆粉,腺苷的质量浓度为76 g·L^-1。此条件下虫草素含量为3.718mg·g^-1,与初始配方相比,含量提高了4.47倍。工艺优化后的蛹虫草菌质固体发酵周期短,有效成分含量提高,研究结果为后期发酵菌质的开发利用奠定了基础。     

罗伯茨虫草及其无性型活性成分分析

以10株野生罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢液体发酵菌丝体为研究对象,采用比色法和高效液相色谱法（HPLC）分别测定其多糖、甘露醇、尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷及虫草素等活性成分含量,并与西藏那曲野生冬虫夏草作比较。结果表明,罗伯茨虫草尿嘧啶含量高于冬虫夏草,尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷含量与冬虫夏草接近,而多糖和虫草素含量与冬虫夏草差距较大。在10株罗伯茨被毛孢中,菌株HRT06的多糖、尿苷、鸟苷及腺苷含量最高,与其余菌株有显著性差异（p〈0.05）,且菌株HRT06的腺苷含量为0.140 mg·g-1,达到中国药典冬虫夏草腺苷含量不得少于0.100 mg·g-1的规定,可以筛选作为优良菌株加以利用。本研究测定罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢活性成分含量,为综合评价罗伯茨虫草应用价值及其开发利用提供科学依据。     

利用阶段pH控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力的研究

采用3 L发酵罐考察不同pH发酵条件对灵芝(Ganoderma lucidum)菌丝体生长和灵芝胞内三萜合成的影响。结果表明,在pH4.5条件下,菌丝体干重和胞内三萜含量均最高,分别为12.31 g·L~(-1)和237.91 mg·L~(-1)。根据不同pH条件下,灵芝发酵过程中菌丝体的比生长速率、三萜比合成速率的变化,提出四阶段pH控制策略:0～26 h pH自然,26～36 h pH4.0,36～81 h pH4.5,81～168 h pH5.0,在此条件下,在3 L发酵罐中发酵,灵芝的菌丝体干重为14.18 g·L~(-1),比对照(pH自然)和pH4.5时分别提高59.15%和15.19%,灵芝胞内三萜含量279.59 mg·L~(-1),比对照和pH4.5时分别提高47.72%和17.52%;在50 L发酵罐中进行发酵验证,菌丝体干重和灵芝胞内三萜含量分别为13.54 g·L~(-1)和256.97 mg·L~(-1)。本研究的四阶段pH控制策略可较大幅度提高灵芝胞内三萜产量,且该发酵工艺操作简单易行,可为利用规模化深层发酵技术生产灵芝胞内三萜提供有益的参考。     

一株寒地高效解无机磷细菌发酵条件优化

为了探究解无机磷细菌B51-7最佳发酵培养条件,以发酵液初始pH、碳源、氮源和培养温度为研究对象,以钼蓝比色法测定发酵液中可溶性磷含量为评价指标,通过单因素试验和正交实验确定其发酵条件的最佳组合。结果表明:初始pH 4.5、30℃、10 g·L~(-1)葡萄糖、0.1 g·L~(-1)蛋白胨培养条件下,菌株B51-7发酵液中可溶性磷含量最高;菌株B51-7解磷能力的最优发酵条件组合为初始pH 4.0,葡萄糖12 g·L~(-1),蛋白胨0.05 g·L~(-1),温度30℃。该研究为菌株B51-7解磷能力的掌握以及其在微生物磷肥的开发与利用提供了重要的参考依据。     

一株乌天麻共生萌发菌培养条件的优化

以天麻共生萌发菌MY-001为试材,采用单因素试验和正交实验分析法,以菌丝生长速率和菌丝体生物量为主要指标,对萌发菌MY-001培养环境条件及培养基营养条件进行优化。结果表明:MY-001最适宜的环境条件为温度25℃,培养基质含水量200%下进行暗培养;MY-001最易利用的氮源和碳源分别是酵母膏、葡萄糖,复合维生素B也能促进菌丝生长,最佳的营养条件为酵母膏3g·L~(-1)、葡萄糖20g·L~(-1)、复合维生素B 0.005g·L~(-1),通过多元回归分析建立回归方程(Y=0.362+0.084A-0.014B-0.007C),方差分析显示方程为极显著。     

平菇泰山-20变异菌株的鉴别及其菌丝优化培养

通过试验确定了变异菌株平菇泰山-20BY,探讨了在不同碳源、氮源、温度、p H值等条件下对变异菌株菌丝生长的影响。试验结果表明,菌丝生长最适温度24℃~26℃,最适p H值为6~7,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为蛋白胨,最佳培养基配方为葡萄糖20 g·L~(-1)、蛋白胨10 g·L~(-1)、KH_2PO_43 g·L~(-1)和Mg SO_40.5 g·L~(-1)。     

一株野生竹黄菌的鉴定及其萃取发酵产竹红菌甲素发酵条件的优化

通过内转录间隔区测序和序列比对的方法,对1株高产竹红菌甲素(hypocrellin A,HA)的菌株进行分子鉴定;以HA得率为目标,对种子液培养时间、接种量以及发酵产HA的培养基碳氮源进行优化,并对萃取发酵的表面活性剂种类、添加量和时间进行筛选和优化。通过形态和荧光染色观察,研究菌丝体形态、细胞膜成分和活性氧分布对萃取发酵的响应。结果表明:该菌株属于竹黄菌,命名为Shiraia bambusicola(GDMCC 60438)。在实验范围内,以10 g·L~(-1)甘油、4 g·L~(-1)马铃薯浸出粉和12 g·L~(-1)牛肉膏为培养基,经72 h液态发酵,单位碳源HA生物转化率(得率)达到13.98 mg·g~(-1)。在1%～10%(V∶V)范围内,增加接种量可以提升HA得率。Triton X-100为萃取发酵的优选表面活性剂。与常规发酵相比,在第70小时添加0.2%(V∶V)Triton X-100启动萃取发酵,HA的得率提高37.02%,达到了16.70 mg·g~(-1)碳源。萃取发酵时,菌丝表面发生褶皱,呈现收缩或聚集状态;菌丝体内活性氧得到诱导。     

蛹虫草深层发酵产虫草素培养基的优化

以蛹虫草(Cordyceps militaris(L.)Link)NS-810为菌种,通过对接种量的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体一级种制作效果的影响;通过单次单因子试验和正交实验,优化深层发酵产虫草素的最佳培养基,筛选制备蛹虫草液体一级种和液体发酵生产虫草素的最佳工艺。结果表明:孢子浓度3.0×10~8 cfu·mL~(-1)时制作的母种最适合作为蛹虫草菌种扩大培养中的一级种子液;深层发酵的最佳培养基配方为葡萄糖25g·L~(-1)、土豆100g·L~(-1)、鱼蛋白胨18g·L~(-1)、(NH_4)_2SO_40.8g·L~(-1)、KH_2PO_41.0g·L~(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.5g·L~(-1)、蚕蛹粉5.0g·L~(-1)、维生素B118mg·L~(-1)、水1L。优化后虫草素的总产量为1 144.31mg·L~(-1),较基础培养基提高了1.46倍。分别以价格低廉葡萄糖和鱼蛋白胨作为发酵培养基的碳源和有机氮源,利于蛹虫草产业化发酵生产虫草素。     

一株蝉花的ITS序列分析及产纤溶酶条件的研究

以新分离的蝉花(Cordyceps cicadae)CC1504为试材,通过真菌核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析确定菌株的分类学地位;利用琼脂糖-纤维蛋白平板法测定蝉花产纤溶酶的能力,通过单因素试验确定其液体发酵产纤溶酶的最适碳源和最适氮源;以正交实验优化菌株产纤溶酶的培养基组成。结果表明:ITS序列进化树分析确定了该菌株的分类地位为蝉花;该蝉花产纤溶酶的最适碳源为乳糖,产酶水平为248.95U·mL~(-1),其次是甘油,为198.94U·mL~(-1);蝉花产纤溶酶的最适氮源为蛋白胨,产酶水平可达240.68U·mL~(-1),其次是酵母膏,为89.23U·mL~(-1);获得的最佳培养基碳氮源组成为:乳糖10g·L~(-1)、蛋白胨10g·L~(-1)、酵母膏3g·L~(-1),可发酵获得的纤溶酶水平达262.05U·mL~(-1)。     

猴头菇液体培养基的筛选和优化

探讨不同碳氮源对猴头菇液体发酵的影响,并使用正交试验对猴头菇菌株液体培养基进行筛选优化,测定不同糖和玉米粉添加量对其影响。结果:在相同条件下,1.6%玉米粉添加量范围内,玉米粉的添加量与菌丝体干重呈正相关;3.2%糖添加量范围内,糖的添加量与菌丝体干重呈正相关。影响猴头菇液体培养菌丝体干重的主要因素是碳源和氮源,试验表明玉米粉和甘薯粉是猴头菇菌丝体培养的良好碳源,酵母粉和麸皮粉优于其他氮源。试验确定猴头菇的适宜液体培养基配方为2.0%玉米粉、0.3%酵母粉、0.1%KH_2PO_4和0.01%维生素B_2。     

氮源和无机盐对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响

以小麦为主要栽培基质,通过添加不同的氮源和无机盐,选用优质蛹虫草菌株CM-16进行人工培养,探索这2个因素对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明:栽培过程中选用6g·L~(-1)的蛋白胨作为最佳氮源,子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量均较高,分别为43.1g·盒~(-1)、3.95mg·g-1和2.35mg·g~(-1)。无机盐则选择1.0mg·L~(-1)的硫酸亚铁最为合适,此时子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量分别为48.8g·盒~(-1)、4.98mg·g~(-1)和2.10mg·g~(-1)。     

雁北嗜蓝孢孔菌菌株液体培养条件优化

以菌丝体生物量、菌丝生长速度和菌丝体胞外多糖含量为指标,对3个雁北嗜蓝孢孔菌菌株液体发酵培养的碳源、氮源和无机盐进行优化筛选,以为该菌的大规模培养和人工驯化提供依据。结果显示,海藻糖是1号和2号菌株的最佳碳源,葡萄糖是3号菌株的最佳碳源;3个菌株的最佳氮源均为豆粕粉;最佳无机盐1号菌株是硫酸镁,2号、3号菌株是磷酸二氢钾。     

可食用微乳化保鲜液对草莓低温冷藏品质的影响

以丹东"九九"草莓为试材,探讨不同浓度的壳聚糖(0.50、1.00 g·L~(-1))、柠檬酸(0.20、0.50 g·L~(-1))复配的复合保鲜液涂膜处理对草莓低温冷藏品质的影响。结果表明:草莓经复合保鲜液涂膜处理低温冷藏后,显著提高了草莓的好果率,减缓了草莓硬度、可溶性固形物和总酸含量的下降速率,减少了抗坏血酸的营养损失,尤其是1.00 g·L~(-1)壳聚糖与柠檬酸的复配保鲜效果优于0.50 g·L~(-1)壳聚糖与柠檬酸的复配。该研究可为不耐贮藏的水果冷藏保鲜提供技术支持。     

鸡腿蘑菌丝体液态培养条件研究

鸡腿蘑是一种具有较高开发价值的食、药用菌。采用生物发酵技术,对鸡腿蘑菌丝体液态培养条件进行了研究。结果表明:鸡腿蘑液态培养最适温度为22-24℃,培养液中菌丝体干重、多糖和蛋白质量最高,分别依次为2.57g/100ml、1.66g/L、1.22g/L;最适起始pH为6.0,培养液中菌丝体干重、多糖、蛋白质含量最高。依次为2.10 g/100ml、2.95 g/L、1.26 g/L;以玉米粉作碳源、浓度为3％,氮源选择蛋白胨、浓度0.3％的综合效果好;培养5天菌丝体生长量和多糖量达最高。     

吲哚乙酸(IAA)对黑脉羊肚菌胞外SOD活性的影响

为了优化液体发酵环境条件,通过向培养基中添加吲哚乙酸(IAA),改变培养基成分组成的方法,研究吲哚乙酸对黑脉羊肚菌发酵培养产胞外SOD酶以及菌丝体生长的影响。结果表明,黑脉羊肚菌发酵培养过程中,最适菌丝体生长的培养条件为温度28℃,初始p H7,培养时间9 d;最适产酶的培养条件为温度20℃,初始p H5.5,培养时间5 d;IAA添加浓度为1.0μg·m L~(-1)时,菌丝体重量最大为14.03 g·L~(-1),浓度为2.5μg·m L~(-1)时,相对酶活性达到最高。     

桑黄菌液体发酵培养基及发酵条件研究

研究了桑黄菌在发酵过程中菌丝体及胞内外多糖产量变化趋势,碳源、氮源以及接种量、摇床转速、温度和pH值等因素对桑黄菌液体深层发酵菌丝产量的影响。结果表明:玉米粉为最佳碳源,豆饼粉为最佳氮源,优化培养基配方为:玉米粉4.0%、豆饼0.5%、KH2PO40.1%、MgSO4.7H2O0.05%;最适菌丝体生长的液体发酵条件:培养温度26℃,摇瓶转速130rpm,pH值6.5,接种量15%￣20%,培养时间7d。     

正交法优化鸡腿菇JM-08深层发酵碳氮源的研究

以菌丝体生物量和胞外多糖产量为指标,通过正交试验对鸡腿菇JM-08深层发酵的碳、氮源进行研究。结果表明JM-08发酵最适碳源为2％葡萄糖和3％玉米粉,氮源为5％麦麸和0．5％酵母粉。     

大白桩菇多酚的定向液态发酵条件优化

为获得含量更高的大白桩菇多酚,采用单因素试验对大白桩菇液体发酵条件进行研究。在碳源、氮源、碳氮比、pH单因素试验的基础上,采用响应面法对大白桩菇液体发酵工艺进行优化。结果表明,葡萄糖和蛋白胨为液态发酵积累多酚的最佳碳源和氮源;最佳碳氮比为10∶1,最佳pH为5。经响应面试验优化后的液态发酵培养基配方为葡萄糖22.40 g·L^-1、蛋白胨6.12 g·L^-1、磷酸二氢钾0.5 g·L^-1、硫酸镁0.25 g·L^-1、维生素B110mg·L^-1,pH 4.95。在此优化条件下,发酵液中的菌丝体总多酚质量浓度达59.98 mg·L^-1,与预测值接近,且有利于菌丝多酚的积累,可为通过定向液态发酵的方式获得大白桩菇多酚物质提供参考依据。     

黑木耳液体菌种培养基配方及培养条件优化

为探讨黑木耳液体菌种最佳培养基配方及最佳培养条件,以黑木耳品种"黑山"为材料开展研究.采用单因素和L9(34)正交试验方法,研究不同碳源、氮源、无机盐以及不同培养温度、培养天数和摇床转速对黑木耳液体菌种菌丝体生物量的影响.结果显示,黑木耳液体菌种最佳培养基配方为玉米粉2.5 g·L-1、豆粕2 g·L-1、磷酸二氢钾0...