犬乳腺肿瘤裸鼠模型建立及其生长特性

为研究犬乳腺肿瘤发展的生物学特性及动态演变过程,建立犬乳腺肿瘤裸鼠模型,探讨其发生及发展规律。将绿色荧光蛋白(GFP)导入到犬乳腺肿瘤CHMm系和CHMp系细胞,将细胞悬液注射种植至裸鼠右侧第二对乳头处,建立裸鼠模型。通过活体成像技术与病理学检测技术,研究不同时间段裸鼠体内肿瘤的动态变化。结果显示:倒置荧光显微镜下可观察到GFP标记的CHMm-GFP和CHMp-GFP细胞均发出稳定的绿色荧光信号,种植后第6天出现肉眼可见肿瘤。通过对接种后第25、35、45和60天荧光信号进行检测和病理检查,绘制肿瘤生长曲线和体重变化曲线;且在接种后第25天裸鼠活体成像时,CHMm-GFP系裸鼠体内荧光信号最强,而CHMp-GFP系则在第35天时,裸鼠体内荧光信号最强。在接种后第25天的离体脏器成像检测时,发现两组裸鼠各有1只淋巴结开始显现荧光信号;第35天3只裸鼠淋巴结内均显示荧光信号,其他脏器无荧光信号。第25天病理组织切片检测,两种细胞系分别有1只裸鼠的肿瘤转移至淋巴结内;在第35、45和60天时解剖裸鼠,发现肿瘤均已转移到淋巴结。建立了两个细胞系犬乳腺肿瘤裸鼠模型,两个细胞系在裸鼠体内不同时段呈现不同的生长特性,且均可转移,为深入研究乳腺肿瘤发生和发展规律提供参考。     

Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立及其活体代谢的改变

利用高脂饲料诱导联合地塞米松注射建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,采用实验动物全面监测系统对大鼠的活动和代谢状态进行24h全程监测,并检测血液中甘油三脂、胆固醇、胰岛素和血糖等参数的变化。结果与对照组相比,模型组甘油三酯、胆固醇、胰岛素抵抗指数以及0、0.5、2h血糖值和血糖曲线下面积极显著升高(P0.01);模型组呼吸交换率明显变低,能量消耗升高,活动量极显著下降(P0.01)。结论:高脂饲料联合地塞米松能够引起大鼠脂代谢和糖代谢紊乱,成功诱导出Ⅱ型糖尿病模型。Ⅱ型糖尿病大鼠具备消瘦、呼吸交换率低、热量消耗增加和活动量减少等临床症状,且揭示糖尿病动物较偏向脂肪代谢、生活需氧量增加、生活状态萎靡和生物节律错乱。     

人ehCGβ+肿瘤小鼠模型的建立

采用脂质体转染方法将含人 eh CGβ编码基因的重组质粒 pc DNA3 -eh CGβ转染鼠SP2 / 0细胞 ,经 G41 8选择培养和有限稀释培养获得抗性细胞克隆 ,FSCA检测显示 :该抗性细胞的 eh CGβ表达比例高达 84.75%、平均荧光强度达 2 2 .1 2 ;采用相同方法获得转 HBV-pre S2 / S编码基因的 Sp2 / 0 -pre S2 / S细胞作为转染无关基因的对照细胞克隆 ,FACS检测发现该细胞表达 pre S2 / S比例为 72 .60 %、平均荧光强度为1 6.80。将不同数量的 Sp2 / 0 -eh CGβ细胞皮下接种 BAL B/ c小鼠 ,结果表明 ,接种 1× 1 0 5及以上Sp2 / 0 -eh CGβ细胞在小鼠体内能形成实体瘤 ,且实体瘤的大小与接种细胞数量呈正相关 (R值为 0 .989)。将相同数量 (5× 1 0 5个细胞 )的 Sp2 /0、Sp2 / 0 -eh CGβ和 Sp2 / 0 -pre S2 / S细胞接种同一只 BAL B/ c小鼠不同部位 ,结果发现 3种肿瘤细胞均在 BAL B/ c小鼠皮下形成了实体瘤 ,比较三组的平均瘤重量无统计学差异 (P >0 .0 5) ,提示外源性 eh CGβ基因的转染不影响Sp2 / 0细胞的致瘤特性。文章建立的人 eh CGβ 肿瘤细胞的荷瘤小鼠模型 ,为研究 eh CGβ 肿瘤细胞的生物学特征、eh CGβ 肿瘤细胞的生物治疗等提供实验基础     

小鼠乳腺炎模型的建立及肿瘤坏死因子变化的研究

<正>乳腺炎是奶牛最常见的产科疾病之一,已成为影响奶牛养殖业发展的最严重疾病之一,不仅危害奶牛健康,降低产奶量,影响奶的品质,而且还降低奶牛的繁殖性能。引起奶牛乳腺炎的最主要的病原菌是金黄色葡萄球菌和无乳链球菌,其中金黄色葡萄球菌危害最严重。本试验用从乳腺炎病牛奶样中分离的金黄色葡萄球菌人工诱发小鼠乳腺炎,建立小鼠乳腺炎模型,通过ELISA法测定乳腺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化研究动物体乳腺感染情     

Hela细胞裸鼠模型中肾脏VEGF的表达

目的:通过建立免疫功能缺陷裸鼠异种移植Hela细胞动物模型,检测免疫功能缺陷裸鼠肾脏中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,研究Hela细胞的转移。方法:建立Hela细胞注射裸鼠模型,成瘤后收集并固定瘤体及肾脏组织,对肾脏组织进行石蜡包埋,染色方法使用苏木精-伊红染色法(HE染色法)以及免疫组织化学染色法(SP法),通过HE染色检测组织完整性,免疫组化染色检测VEGF表达水平。结果:实验结果表明免疫功能缺陷裸鼠异种移植Hela细胞动物模型肾脏的肾小管上皮细胞中VEGF高度表达,且通过染色及显微镜观察发现肾脏中出现淀粉样变及肾小管自溶现象。结论:VEGF蛋白在Hela细胞裸鼠模型肾脏中肾小管高表达,说明该蛋白于此接种模型的成瘤过程中发挥着一定的生物学作用。     

建立生猪活体储备制度推动肉类产业健康发展

生猪活体储备制度,是国家或地方政府宏观调控市场的重要手段,是应对重大自然灾害和突发事件引发的市场异常波动的重要措施。生猪活体储备能有效地缓解市场压力,维护市场秩序,稳定人心,稳定社会。对亳州市肉类产业发展现状和存在的问题进行了分析探讨,阐述了建立生猪储备制度的重要意义。     

建立生猪活体储备制度 推动肉类产业健康发展

生猪活体储备制度,是国家或地方政府宏观调控市场的重要手段,是应对重大自然灾害和突发事件引发的市场异常波动的重要措施。生猪活体储备能有效地缓解市场压力,维护市场秩序,稳定人心,稳定社会。对亳州市肉类产业发展现状和存在的问题进行了分析探讨,阐述了建立生猪储备制度的重要意义。     

犬肝硬化模型的建立

于犬背部皮下多点注射60％四氯化碳菜籽油乳剂(1.5mL/kg）,每10d注射1次,共6次,并饮用10％乙醇,8周后肝硬化形成,饮乙醇犬肝硬化形成时间较饮常用水缩短10～15d,且病变明显。     

犬白内障模型的建立

通过使用甲醛建立犬白内障模型,探索甲醛对犬晶状体的影响过程,为兽医工作者练习白内障超声乳化手术提供试验模型。选取健康的重庆本地杂交犬12条,随机选取8条为模型组,4条为对照组,用10%甲醛溶液分多点注射到晶状体中,通过裂隙灯和离体观察判断晶状体的成模效果。结果表明:对照组试验犬中的8个晶状体核均透明,未见混浊;试验组犬中有16只眼注射10%甲醛溶液,5min后晶状体开始发生变化,晶状体核硬度可达到Ⅰ级,1h以后所有晶状体核硬度达到Ⅱ级,到第5h以后所有模型眼均可达到Ⅲ级中等硬度核。本试验证明用10%甲醛溶液注射晶状体可成功建立犬白内障模型。     

兔瘙痒模型的建立

试验选择体重3.23±0.63 kg奇卡兔20只,单独或联合应用组胺和4-氨基吡啶（4-AP）建立兔瘙痒模型.将兔随机分为4组,皮下注射造模药物后记录搔抓反应次数和搔抓潜伏期,检测注射药物前后小鼠血清中的组胺、IFN-γ和IL-6的浓度.结果显示：组胺和4-AP联合运用后搔抓潜伏期显著缩短,40 min内搔抓次数均极显著增加（P＜0.01）.组胺致瘙痒模型组的兔血清组胺浓度升高,与其他3组相比差异极显著（P＜0.01）;其他2个细胞因子的浓度在各组之间差异均未达到统计学显著水平.联合应用组胺和4-AP建立的瘙痒模型效果优于组胺和4-AP单独作用.     

金黄地鼠超数排卵模型的建立

为探讨金黄地鼠超数排卵效果的影响因素,采用孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对成年雌性金黄地鼠进行超数排卵研究。结果表明,采用40 IU PMSG+40 IU HCG剂量组合的超排效果优于30 IU PMSG+30 IU HCG剂量和20 IU PMSG+20 IU HCG组合;90日龄~150日龄的90 g~150 g的金黄地鼠超数排卵效果最好;人绒毛膜促性腺激素注射后20 h是超排鼠处死取卵的最佳时间,获卵最多。     

金黄地鼠动脉粥样硬化模型的建立

目的利用复合因素建立金黄地鼠动脉粥样硬化模型,观察造模后各段主动脉的病理学变化,为这一疾病的基础研究提供实验对象和材料。方法随机将30只金黄地鼠分为对照组(15只)和模型组(15只),对照组给予普通饲料,模型组用高脂饲料喂饲加以注射牛血清白蛋白,饲养8周。主动脉切片进行病理形态学观察。结果模型组主动脉各部位出现粥样斑块,主动脉弓、胸主动脉、腹主动脉、髂动脉内膜增厚,出现大量的斑快和炎细胞浸润。结论本方法可在短时间内造成金黄地鼠出现动脉粥样硬化病变,可作为研究动脉粥样硬化疾病的实验材料。     

Hela细胞裸鼠模型肝脏中IL-4的表达分析

目的：通过构建Hela细胞裸鼠模型,研究白细胞介素-4(IL-4)在裸鼠肝脏中的表达情况,为研究异源移植瘤的形成提供理论基础。方法：裸鼠处死采集肝脏组织,固定后制备石蜡切片,经H&E染色观察肝脏病理结构变化,免疫组化染色观察IL-4在肝脏中的表达及分布情况。结果：H&E染色发现肝小叶结构较完整,静脉有明显的充血并在肝窦中有出血现象,肝窦内分布较多线状枯否细胞,肝小叶内有大量嗜碱性细胞聚集;免疫组化染色发现IL-4蛋白主要在肝细胞胞质中显著表达,胞核、血窦内均无表达。结论：在Hela细胞异源移植瘤的形成过程中,可能通过诱导胞质内IL-4蛋白高表达,激活相关信号通路促进肿瘤细胞的增殖分化迁移,促进肿瘤形成;肝窦中的枯否细胞极化也有可能与肿瘤形成有关。     

大鼠骨肉瘤模型的建立

为建立大鼠骨肉瘤动物模型的方法, 用30只6周龄SD大鼠随机分为3组,将大 鼠骨肉瘤细胞系UMR 106分别以105,106, 107个数量注入大鼠股外侧皮下。接种后,每 周观察肿瘤生长情况,测量肿瘤直径,绘制肿 瘤生长曲线,连续5周。第6周取肿瘤病理 材料,常规切片,HE染色,光镜下观察。结果 105个细胞及106个细胞组肿瘤生长情况不 佳;107个细胞组肿瘤发生率达到100%。说 明大鼠骨肉瘤细胞系UMR 106具有较强的 致瘤性,应用该细胞系建立的动物模型为骨 肉瘤综合治疗奠定了动物实验基础。     

转染βG基因HHCC细胞的裸鼠转移模型的复制

将人肝癌细胞株（ＨＨＣＣ）细胞和转染β－葡萄糖苷酸酶（βＧ）基因的ＨＨＣＣ细胞体外培养，观察细胞形态结构，用流式细胞仪测定细胞周期，要用裸鼠脾种植法研究转βＧ基因ＨＨＣＣ细胞的转移特性，接种后６０ｄ收集转移灶，常规制片，ＨＥ染色镜检。结果，转染βＧ基因ＨＨＣＣ细胞内多见颗粒性物质，微绒毛及突起增多，溶酶体增多，内质网及核糖体丰富，糖元颗粒堆积，某些细胞出现变性、坏死。转染βＧ基因ＨＨＣＣ和ＨＨＣＣ     

活体动物中大环内脂类残留检测微生物抑制法的建立

[目的]建立活体动物中大环内酯类残留的检测方法。[方法]采用微生物抑制方法,对藤黄微球菌CMCC 28001的选择性和特异性、样品提取方法、平板制备条件、方法检出限等技术参数进行研究。[结果]建立的方法可用于活体动物中红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、林可霉素、吉他霉素和克林霉素等6种大环内脂类药物的残留检测。当菌悬液添加浓度为10~(-3)倍稀释液(5.5×106CFU/m L)以及培养基PH值为7.5且培养温度为30℃时,可产生直径最大,边缘光滑、完整、清晰的抑菌圈。[结论]该方法具有良好的敏感性和重复性,成本低,操作简便,是色谱分析、免疫分析等其它方法的有益补充。     

肉用型鸡血浆激素含量用于活体估测屠体性状的研究

血浆激素———生长激素（ＧＨ）、睾酮、甲状腺激素（Ｔ３、Ｔ４）和肾上腺皮质醇影响机体组织的代谢和生长〔１、２、３〕、与屠体性状间有着密切关系〔３、４〕,而屠体性状作为肉鸡的生产性能是其体内特定基因所控制的生理过程综合作用的体现,用血浆激素指标进行早期...     

用于检测小鹅瘟抗体的Dot-ELISA建立

以小鹅瘟病毒(GPV)VP1-VP3非重叠序列重组原核表达多肽为检测抗原,建立了鉴别GPV全病毒抗体与VP3亚单位抗体的Dot-ELISA.该方法中检测抗原包被浓度为70ng/斑点,兔抗鹅IgG-HRP标记抗体的最适稀释度为1:200,被检血清最佳稀释度为1:400.特异性试验的结果中,检测抗GPV抗体的阳性率为100%,而抗GPV-VP3禽痘重组病毒抗体的阳性率为0,表明其有很好的特异性与灵敏度.     

猪葡萄球菌感染裸鼠及BALB/c小鼠模型的研究

用一株本室分离鉴定能够引起猪渗出性皮炎的猪葡萄球菌(S.hyicus GZ1)经肌肉注射裸鼠和BALB/C小鼠,意图研究裸鼠和BALB/C小鼠对猪葡萄球菌的易感性及猪葡萄球菌对裸鼠和BALB/C小鼠的致病性。结果表明裸鼠和BALB/C小鼠均可被感染,并表现各自的临床症状。裸鼠在感染后2到3d背部和面部皮肤开始出现大量小的红色囊泡,4到5d后部分囊泡消失,部分形成结痂。一些裸鼠眼睛还会有较多脓性分泌物渗出,感染两周后相继死亡。BALB/C小鼠感染该菌后多表现急性临床症状,感染后2到3d就相继死亡,因此表现不出明显的眼观病变,只有很少一部分小鼠皮肤上会出现炎性渗出,导致该处皮肤脱落。研究表明:BALB/C小鼠比裸鼠对猪葡萄球菌更易感,裸鼠感染后产生清晰可见的临床症状,而BALB/C小鼠在感染后往往还来不及表现明显的临床症状就相继死亡。可见,猪葡萄球菌不仅对猪有致病性,对裸鼠和BALB/C小鼠也都表现出不同程度的致病性。     

鹅的活体拔毛

羽绒是养鹅业的重要产品之一,鹅的羽绒产量高、绒朵大、弹性好、吸水力低、保温性好、耐磨,利用年限可长达25年之久,一直是国际市场上的紧俏商品。目前,鹅毛每公斤售价为10美元,纯绒每公斤售价为40美元以上。全世界每年各种羽绒的贸易总额达2.5—3.0万吨,其中我国约占1/3,而我国养鹅总数几乎是全世界养鹅总数的三倍,可见我国羽绒生产的潜力极大。近年来我省养鹅业有了很大发展,全省养鹅总数现已突破600万只。每只本地