黄曲霉毒素分解酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达与应用

本试验旨在研究黄曲霉毒素分解酶(ADTZ)基因在枯草芽孢杆菌中的表达与应用。试验通过构建枯草芽孢杆菌ADTZ基因的整合表达载体,将ADTZ基因整合到野生型枯草芽孢杆菌(B.subtilis LN)中,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步检测ADTZ蛋白的表达情况。将重组枯草芽孢杆菌作为发酵菌种接种到发霉玉米中进行发酵试验,检测发霉玉米样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的变化,验证ADTZ基因在枯草芽孢杆菌中的表达效果。结果表明,通过构建整合表达载体成功将ADTZ基因整合到枯草芽孢杆菌基因组中,在SDS-PAGE上检测到重组枯草芽孢杆菌能够分泌表达特异性蛋白条带。经过重组菌发酵的发霉玉米AFB1的含量较未接种和接种野生型枯草芽孢杆菌发酵的发霉玉米AFB1的含量差异显著(P0.05)。由此可见,ADTZ基因可成功整合到野生型枯草芽孢杆菌中,并进行了胞外分泌表达,表达产物具有生物活性,能有效地降解AFB1。     

黄曲霉毒素解毒酶制剂对饲喂AFB1日粮肉仔鸡生长性能及血液生理生化指标的影响

通过研究黄曲霉毒素解毒酶制剂(ADTZ)对饲喂含黄曲霉毒素B1(AFB1)日粮的肉仔鸡生长性能及血液生理生化指标影响,探讨其应用效果。选用672只1日龄AA肉仔鸡随机分为3个处理,每处理设8个重复;分别饲喂基础饲粮、基础饲粮+0.1mg/kgAFB1、基础饲粮+0.1mg/kgAFB1+0.2%ADTZ,试验期42d。结果表明:①与对照组相比,AFB1组平均日增重显著降低(P<0.05),料重比显著提高(P<0.05),日采食量呈下降趋势(P>0.1);ADTZ组生长性能得到改善,与AFB1组相比,日采食量和日增重均显著提高(P<0.05),料重比呈下降趋势(P>0.1);②AFB1组肉仔鸡血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性显著提高(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性提高了13.64%(P=0.094);与AFB1组相比较,ADTZ组血清中AST活性降低了6.46%(P=0.066),ALT活性呈降低趋势(P>0.1)。③各处理对对血清中生长激素、甲状腺激素T3和T4、胰岛素样生长因子-Ⅰ和胰岛素含量影响均不显著(P>0.1)。     

黄曲霉毒素B1分解酶对肉牛生长性能、胴体品质及毒素组织残留的影响

选取30头体质量344kg左右健康西门塔尔杂交牛,随机分为3组:对照组,饲喂基础饲粮;试验Ⅰ组和Ⅱ组分别在基础饲粮基础上添加0.05%和0.10%的黄曲霉毒素B1分解酶,试验期90d。结果表明:各组之间生长性能、胴体指标、血液和肝脏生化指标差异不显著(P0.05);添加黄曲霉毒素B1分解酶显著降低了毒素在肝脏(P0.01)和肾脏(P0.05)中的残留。试验Ⅰ、Ⅱ组肝脏黄曲霉毒素的B1残留量分别比对照组下降了44.87%(P0.01)和49.15%(P0.01);试验Ⅰ、Ⅱ组肾脏中黄曲霉毒素的B1残留量分别比对照组下降了32.20%(P0.05)和33.90%(P0.05)。由此可知,肉牛饲料中添加黄曲霉毒素B1分解酶可降低毒素在组织中的残留。     

乳酸菌和水合铝硅酸钙钠对黄曲霉毒素B_1脱毒及肉鸡的解毒作用

本研究旨在探讨乳酸菌和水合钠钙铝硅酸盐对肉鸡日粮黄曲霉污染的解毒作用,同时评估其对肉鸡生长性能、养分消化率、免疫功能及黄曲霉毒素B1残留的影响。试验选择了1d的雌性肉鸡960只,根据体重一致性随机分为4组,每组8个重复,每个重复30只,分别饲喂阳性对照日粮(没有黄曲霉毒素B1污染)、阴性对照日粮(阳性对照组日粮+45μg/kg黄曲霉毒素B1)、乳酸菌日粮(阴性对照日粮+2.0×1010CFU/kg乳酸菌)和水合硅铝酸钙钠日粮(阴性对照日粮+3.5g/kg水合硅铝酸钙钠),试验共开展21d。结果 :阴性处理组平均日增重和饲料报酬显著降低(P 0.05),与阴性对照组相比,乳酸菌组、水合硅铝酸钙钠组和阳性对照组平均日增重显著提高8.92%、5.95%和6.69%(P 0.05),饲料报酬分别显著提高7.94%、6.35%和6.35%(P 0.05)。酸菌组消化能的消化率较水合硅铝酸钙钠组显著提高1.56%(P 0.05),同时乳酸菌组钙和磷的消化率也显著高于其他各组(P 0.05)。乳酸菌组脾脏和肝脏重量较阴性对照组显著降低14.63%和6.38%(P 0.05),而法氏囊和胸腺相对重量显著提高10.42%和5.23%(P 0.05)。阳性对照组组、乳酸菌组和水合硅铝酸钙钠组较阴性对照组显著提高了T和B淋巴细胞数量(P 0.05)。与阴性对照组相比,阳性对照组、乳酸菌组血清、肝脏、脾脏、肾脏、法氏囊和胸腺中黄曲霉毒素B1残留量降低49.93%～80.82%(P 0.05),而水合硅铝酸钙钠组黄曲霉毒素B1残留量降低44.38%～66.12%(P 0.05)。结论 :日粮中添加乳酸菌或水合硅铝酸钙钠可以改善肉鸡生长性能、养分消化率和免疫功能,降低黄曲霉毒素B1的毒副作用和组织残留量。但乳酸菌的改善效果比水合硅铝酸钙钠更明显。     

T-2毒素急性中毒对雄性昆明小鼠血清生化指标的影响

以雄性昆明小鼠为研究对象,以不同剂量的T-2毒素对小鼠进行腹腔注射,24 h后检测小鼠血清生化指标,判断T-2毒素急性中毒模型是否建立成功。结果显示,随着T-2毒素剂量的增加,小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和直接胆红素(DBLI)以及总胆红素(TBLI)水平呈增加趋势,但总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量以及总胆固醇(T-CHO)和甘油三酯(TG)含量呈降低趋势,与对照组相比均差异显著或极显著(P0.05或P0.01)。表明T-2毒素对小鼠机体造成了损伤,T-2毒素急性中毒模型建立成功。     

实验性雏鸭黄曲霉毒素中毒肝损伤的动态变化

将120羽2日龄健康雏鸭随机分成2组,试验组用含黄曲霉毒素的饲料饲喂,对照组用正常饲料饲喂,在饲喂后1、5、7、9 d检测血清转氨酶水平;同时进行肝组织病理学检查。结果：试验组饲喂后2 d雏鸭出现黄曲霉毒素中毒典型临床症状,7 d开始出现死亡。剖检可见肝脏肿大,被膜下大量网格状灰白色物质增生。试验组处理后5 d雏鸭肝细胞肿胀、变性,汇管区少量胆管上皮细胞增生;7 d汇管区小胆管增生较明显,局部连接成片;9 d汇管区增生的小胆管已经占据了肝脏的近1/2。试验组雏鸭血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性随黄曲霉毒素饲喂时间延长而升高。饲喂后1 d试验组雏鸭血清中AST和ALT活性与对照组差异不明显（P〉0.05）;5、79、d试验组雏鸭血清AST和ALT活性与对照组的活性相比差异显著（P〈0.05）。对照组未见异常的临床症状及病理变化。     

复合吸附剂对AFB_1和DON暴露鸡血清生化指标的影响

本试验旨在通过复合吸附剂(CA)对禽体内黄曲霉毒素B1(AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的吸附作用,根据血清生化指标变化,研究其对霉菌毒素污染的脱毒效果。选取120羽7日龄体质量接近的健康雏鸡,随机分成4组,分别为对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,其中对照组饲喂正常饲料,试验Ⅰ组饲喂霉变饲料,试验Ⅱ组饲喂正常饲料+0.5%CA,试验Ⅲ组饲喂霉变饲料+0.5%CA。试验期为21d。所有鸡只分别在7、28日龄进行称重,试验结束时,经鸡翅静脉采血,测定血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱基磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性;同时,每组选取5只鸡剖检,观察脏器病变,取肝脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊,计算脏器系数。结果显示,与对照组相比,试验Ⅰ组雏鸡肝脏、肾脏、脾脏脏器系数显著升高(P0.05),胸腺和法氏囊脏器系数显著降低(P0.05),血清TP和ALB含量显著下降(P0.05),ALT、ALP、LDH和MDA活性显著升高(P0.05),SOD活性显著降低(P0.05);试验Ⅲ组肝脏、肾脏和脾脏的脏器系数显著降低(P0.05),TP和ALB的含量显著提高(P0.05),ALT、ALP和MDA的活性显著降低(P0.05),SOD活性显著升高(P0.05);试验Ⅱ组的脏器系数及生化指标与对照组相比差异均不显著(P0.05)。结果表明,CA对AFB1和DON有良好的吸附作用,可用于饲料中霉菌毒素的脱毒。     

霉菌毒素降解剂对育肥猪生长性能和抗氧化功能的影响

文章旨在研究含黄曲霉毒素饲料中添加霉菌毒素降解剂对生长育肥猪生长性能和抗氧化功能的影响。50头90日龄健康生长育肥猪随机分为5组,试验1组为对照组,饲喂正常饲料;试验2组为阳性对照组,饲料中添加400mg/t黄曲霉毒素B1;试验3～5组为试验组,在添加黄曲霉毒素饲料中分别添加0.05%、0.10%和0.20%的霉菌毒素降解剂。结果表明,添加0.1%～0.2%霉菌毒素降解剂能够提高生长育肥猪的日增重、采食量和料重比,消除黄曲霉毒素对生长育肥猪生产性能的危害;降低生长育肥猪血清丙二醛(MDA)的含量,提高血清超氧化物歧化酶(SOD)含量和总抗氧化能力(T-AOC),降低霉菌毒素造成的氧化损伤。     

复合吸附剂对AFB_1和DON联合毒性的脱毒效果

本试验旨在通过动物体内试验,研究复合吸附剂(CA)对黄曲霉毒素B1(AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合毒性的脱毒效果。选取21日龄昆明系雄性小鼠60只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复4只。各试验组小鼠饲喂相同的饲料,第Ⅰ组为对照组,每天灌服生理盐水;第Ⅱ组灌服0.5%CA;第Ⅲ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON;第Ⅳ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.1%CA;第Ⅴ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.5%CA。试验期为30d。分别于试验的第15和第30天,每个重复随机选择2只小鼠经眼球采血,测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰基转移酶(rGT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量;并取肝脏和脾脏,计算脏器相对指数。结果显示,与对照组相比,在试验15d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数,血清AST活性显著升高(P<0.05),ALB含量显著降低(P<0.05),Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05);在30d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数、血清AST,ALT,ALP,r-GT活性显著升高(P<0.05),第Ⅳ组小鼠脾脏指数、血清r-GT活性显著升高(P<0.05),小鼠增重量、TP、ALB含量显著降低(P<0.05),SOD活性极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著升高(P<0.01),Ⅱ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05)。试验表明,CA对机体无副作用,0.5%CA能有效缓解AFB1和DON对小鼠的联合毒性。     

四氯化碳诱导慢性肝损伤模型小鼠的转录组学分析

为了研究小鼠慢性肝损伤发病过程中肝脏组织转录组学变化规律，试验将40只ICR小鼠随机均分为肝纤维化正常对照组(A-C组)、肝纤维化模型组(A-M组)、肝硬化正常对照组(B-C组)和肝硬化模型组(B-M组),其中A-M组和B-M组分别用四氯化碳(CCl₄)+橄榄油溶液连续灌胃7周和11周，A-C组和B-C组分别连续灌胃等量的橄榄油7周和11周，试验结束后采集小鼠血液，测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性，并取肝脏组织进行转录组测序，对转录组学分析存在显著差异的基因通过实时荧光定量PCR方法进行验证。结果表明：与A-C组小鼠相比，A-M组AST与ALT活性显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),从肝脏组织中共检测到了1 109个差异基因，其中有956个上调基因，153个下调基因；与B-C组小鼠相比，B-M组AST与ALT活性均极显著升高(P<0.01),从肝脏组织中检测到509个差异基因，其中397个上调基因，112个下调基因；与B-M组相比，A-M组肝脏组织中检测到70个差异基因，其中有41个基因上调和29个基因...