硫化氢的生成及其在细胞凋亡和炎性反应中的作用

硫化氢(H_2S)是一种无色具有臭味的气体,不仅是畜禽舍内的一种有毒有害物质,而且近年来发现H_2S是继NO、CO之后第3种气体信号分子。H_2S在胃肠中可以通过沙门氏菌、幽门螺旋杆菌等对含硫有机物及硫酸盐分解和还原产生,也可以通过胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、半胱氨酸转移酶(CAT)与3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-MST)等催化L-半胱氨酸等含硫氨基酸产生。H_2S具有多种生理病理学作用,可通过阻断细胞色素C氧化酶而抑制线粒体呼吸(高浓度情况下),造成细胞凋亡,同时也能下调BCL-2及NF-κB等抗凋亡基因表达,促进细胞凋亡;可通过调节Caspase3而抑制细胞凋亡(低浓度情况下),还可以与NF-κB的P65发生巯基化反应促进下游抗凋亡基因表达而发挥抗凋亡作用。高浓度的H_2S可以上调NF-κB、P38、ERKE1/2等基因表达,加重炎症反应;低浓度H_2S可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用。作者通过综述H_2S气体的生成及其在细胞凋亡和炎性反应中的双重作用,为深入了解H_2S在疾病发展过程中的生理、病理机制提供参考。     

硫化氢的生成及其在细胞凋亡和炎性反应中的作用

硫化氢（H₂S）是一种无色具有臭味的气体,不仅是畜禽舍内的一种有毒有害物质,而且近年来发现H₂S是继NO、CO之后第3种气体信号分子。H₂S在胃肠中可以通过沙门氏菌、幽门螺旋杆菌等对含硫有机物及硫酸盐分解和还原产生,也可以通过胱硫醚-β-合成酶（CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、半胱氨酸转移酶（CAT）与3-巯基丙酮酸硫转移酶（3-MST）等催化L-半胱氨酸等含硫氨基酸产生。H₂S具有多种生理病理学作用,可通过阻断细胞色素C氧化酶而抑制线粒体呼吸（高浓度情况下）,造成细胞凋亡,同时也能下调BCL-2及NF-κB等抗凋亡基因表达,促进细胞凋亡;可通过调节Caspase3而抑制细胞凋亡（低浓度情况下）,还可以与NF-κB的P65发生巯基化反应促进下游抗凋亡基因表达而发挥抗凋亡作用。高浓度的H₂S可以上调NF-κB、P38、ERKE1/2等基因表达,加重炎症反应;低浓度H₂S可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用。作者通过综述H₂S气体的生成及其在细胞凋亡和炎性反应中的双重作用,为深入了解H₂S在疾病发展过程中的生理、病理机制提供参考。     

紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

为了研究紫草素对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,试验以SMMC-7721为研究对象,利用倒置显微镜观察细胞的形态变化,通过体外细胞毒性试验(MTT)比色法和流式细胞仪检测紫草素处理前后对肝癌细胞株SMMC-7721增殖和诱导细胞凋亡的作用。结果表明:在紫草素作用下,SMMC-7721形态发生改变,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率为(19.00±1.31)%和(23.04±1.25)%。说明紫草素对肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的凋亡诱导作用,为抗肿瘤药物的研究提供了理论基础。     

花椒精油对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响

为探究花椒精油抗人永生化表皮细胞(HaCaT)增殖活力和诱导凋亡的潜在机制,通过采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法对花椒精油的抗增殖活力进行了检测,用流式细胞仪和Western blot检测了细胞周期和细胞凋亡影响情况。研究发现,花椒精油能显著抑制HaCaT细胞增殖,作用48h花椒精油半抑制浓度(IC50)值为199.2μg/mL,其抑制作用呈时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测结果显示,精油能使HaCaT细胞周期停滞在S期,并诱导细胞凋亡。Western blot结果显示,花椒精油处理的HaCaT细胞中剪切的Caspase-8/9/3、PARP、Bax表达量增加,同时Bcl-2表达量减少。说明花椒精油能够显著抑制HaCaT细胞增殖,并能通过内源和外源两种途径诱导细胞发生凋亡。     

苦杏仁精油对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响

为了研究苦杏仁精油(bitter almond essential oil,BAEO)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)体外增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其可能存在的抗银屑病作用机理。采用气相色谱-质谱联用仪(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)分析BAEO化学成分;磺酰罗丹明B(sulforhodamine-B,SRB)法检测BAEO对HaCaT细胞增殖的影响;用流式细胞术碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染法检测BAEO对细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot测定凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP表达水平。结果显示,BAEO主要化学成分是苯甲醛(57.36mL/L)、苯甲酸(12.73mL/L)和扁桃腈(9.54mL/L);BAEO对HaCaT增殖抑制率随药物浓度和时间的增加而显著增加(P0.01);流式细胞仪检测经BAEO(0.1、0.25、0.5mL/L)作用于HaCaT细胞24h后,细胞周期停滞在G0/G1期,早期凋亡率显著升高(P0.05);Western blot结果表明,0.1、0.25、0.5mL/L的BAEO作用于HaCaT细胞24h后Caspase-3和PARP蛋白的表达下调。结果表明,BAEO能显著地抑制HaCaT细胞增殖,以及通过G0/G1期细胞周期停滞、细胞凋亡率升高、增加Caspase-3和PARP蛋白的剪切来诱导HaCaT细胞凋亡。     

长春新碱对犬乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

犬乳腺肿瘤在兽医临床中非常常见,母犬乳腺瘤发病率约占全部肿瘤性疾病的25%～42%[1] .其早期治疗主要依靠外科切除的方法,但对已经转移的犬乳腺肿瘤,通过手术切除后也可能复发.为延长患病犬的生命,我们可以选用化疗药物来抑制肿瘤细胞的增殖.长春新碱(vincristine,VCR)是常用的抗肿瘤药物,现已发现可以抑制一些人肿瘤细胞的增殖[2-3],并可以影响一些细胞的周期[4-5].VCR是否对体外培养的犬乳腺癌细胞有抑制作用,国内还未见有这方面的报道,为此,我们进行了这方面的研究.     

热应激对大鼠肠上皮细胞增殖和凋亡的影响

试验旨在探究热应激对IEC-6细胞增殖、凋亡、周期、凋亡及紧密连接蛋白表达的影响.试验采用体外细胞培养热应激模型,分别设置对照组(37℃)与热应激组(41℃)对细胞进行处理,每组3个重复,CCK-8法检测IEC-6细胞活性,流式细胞术检测IEC-6细胞凋亡率及周期,Western blot法检测凋亡相关蛋白(Bax、B...     

脂联素对动物细胞增殖和程序性死亡调控作用的研究进展

细胞是生命活动的基本单位,生命体通过协调细胞的增殖、分化、死亡调节机体正常的生理功能,维持内环境稳态。脂联素(adiponectin, ADPN)是一种具有多方面功能的脂肪因子,它在动物细胞代谢调节和维持细胞能量稳态方面发挥着重要作用。脂联素能够通过相关信号通路抑制细胞的异常增殖、分化和焦亡,双向调控细胞自噬,增强细胞自噬水平,阻止细胞发生异常自噬,并具有抗细胞凋亡作用。文章综述了脂联素及其受体的结构和生物学功能,回顾了脂联素对动物不同类型细胞增殖、凋亡、自噬、焦亡等事件的调控及机制方面的研究进展,以期为开展基于脂联素及其受体相关途径的动物抗衰老、抗炎症、抗癌变等研究提供新的方向和靶点。     

低温等离子体调控细胞增殖和凋亡的研究进展及其在畜牧业的应用

低温等离子体(non-thermal plasma,NTP)是轻度电离的等离子体,其离子和中性粒子温度远低于电子温度,使得整个放电体系呈现低温状态,目前广泛应用于灭菌消毒、疫苗生产、口腔治疗、伤口愈合和癌症治疗等生物医学领域.NTP产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)及活性氮(reac...     

锌对鹅淋巴细胞凋亡和细胞增殖周期影响的研究

试验选用120只1日龄鹅随机分成4组，A组喂以玉米大豆为基础日粮未加锌的饲料，另3组在基础日粮中添加ZnSO₄·H₂O，使锌含量分别为40(B组)、110(C组) 和2000 mg/kg(D组)。应用流式细胞仪观测锌对鹅细胞周期和细胞凋亡的影响。结果显示锌添加量为110 mg/kg时，鹅血液淋巴细胞、胸腺、脾脏细胞的增殖指数和DNA含量最高。低锌和高锌饲料可以引起血液淋巴细胞的凋亡。     

SMAD6对猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的影响

睾丸未成熟支持细胞的增殖活性对种公畜繁殖性能有重要影响,睾丸基因组DNA甲基化(5mC)不同发育阶段特异性引起的基因差异表达可以调控支持细胞的增殖活性。在课题组前期研究中,SMAD6被鉴定出是睾丸发育过程中受3′UTR甲基化水平调控的枢纽基因之一,但其生物学功能尚未被发掘。本研究旨在探究SMAD6对猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的作用。在体外培养的猪未成熟支持细胞中过表达SMAD6或干扰SMAD6表达后,检测细胞周期和增殖相关基因的相对表达量、细胞增殖情况、细胞ATP水平、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白的表达情况。结果显示：过表达SMAD6后细胞周期及增殖相关基因的相对表达量上升(P<0.05或P<0.01)、细胞增殖增加(P<0.05或P<0.01)、细胞ATP水平升高(P<0.01)、细胞的凋亡率下降(P<0.05)、促凋亡相关蛋白BAX和Caspase3的表达降低(P<0.05);干扰SMAD6表达结果则与之相反。研究结果提示,SMAD6促进猪未成熟支持细胞的增殖且抑制其凋亡。     

镉对鸡胚成纤维细胞增殖和凋亡的影响

以鸡胚成纤维细胞为研究对象,探讨镉影响细胞增殖及凋亡的作用。应用酶标仪、倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜及流式细胞仪,分析细胞毒性、细胞形态、凋亡率、细胞周期与线粒体膜电位及胞内钙离子稳态。结果表明:镉处理后,细胞活性下降,呈现凋亡形态学变化,细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率呈浓度和时间依赖性,细胞线粒体膜电位下降,胞内游离钙离子浓度增大。研究发现,镉可通过阻滞细胞周期,降低线粒体膜电位,影响胞内钙离子稳态来诱导鸡胚成纤维细胞凋亡。     

大蒜素对人结肠癌LS-174-T细胞增殖和凋亡的影响

为了探讨大蒜素作为潜在药物的可能性,试验采用不同浓度大蒜素(Allicin)作用人结肠癌LS-174-T细胞后,通过电镜、流式细胞术和荧光定量PCR等手段,观察细胞凋亡和细胞周期的变化,检测细胞线粒体膜电位以及基因Bax/Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平。结果表明:大蒜素作用LS-174-T细胞48 h后,细胞有明显凋亡现象发生,细胞周期阻滞于S期与G2期,线粒体膜电位显著降低,Bax mRNA和蛋白表达均上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均下调。说明在在本试验条件下大蒜素可通过调节Bax基因和Bcl-2基因诱导LS-174-T细胞凋亡,并延缓癌细胞的进一步增长。     

柞蚕蛹虫草抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖和诱导凋亡的作用

为鉴定柞蚕蛹虫草新的医用价值,将不同浓度的柞蚕蛹虫草水提物(AEoAPC)分别作用于体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞,于24、48、72 h后采用倒置相差显微镜和透射电子显微镜观察、四甲基偶唑蓝(MTT)比色及流式细胞术(FCM)检测细胞的增殖和凋亡情况。结果表明:细胞培养板中分别加入质量浓度为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、5.0 g/L的AEoAPC,均能显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,并呈现时间剂量依赖性,1.0 g/L AEoAPC处理24、48、72 h后,对SMMC-7721细胞的生长抑制率分别为18.9%、46.4%、77.2%;经AEoAPC处理后大量癌细胞出现染色质边集和凝聚、核碎裂及凋亡小体;1.0 g/LAEoAPC处理24、48、72 h SMMC-7721细胞凋亡率分别为7.65%、11.04%、23.02%,细胞凋亡程度与AEoAPC作用时间呈正相关,有丝分裂第一间距期(G1)的细胞在AEoAPC作用72 h后分布明显增加。研究结果初步显示,AEoAPC对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其抗肿瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

棉酚对猪原代培养黄体细胞增殖和凋亡的影响

采用长大杂母猪原代培养的黄体细胞,通过MTT法、DNA Ladder和TUNEL检测法,探讨了0、0.4、2、10、50 mg/L棉酚对猪原代培养黄体细胞增殖和凋亡的影响.结果表明,棉酚分别染毒24、48 h后,与对照组比较,各浓度组对黄体细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),黄体细胞的凋亡率达5%～23%;这种细胞毒性作用呈剂量相关性,在一定剂量下,具有时间依赖关系.     

5-羟色胺对肉鸡肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

采用胶原酶消化法培养原代肉鸡肺动脉平滑肌细胞（PASMC）,检测不同浓度的5-羟色胺（5-HT）对肉鸡PASMC增殖的影响,并用流式细胞仪检测PASMC周期和凋亡情况。结果发现,10-4～10-7 mol/L的5-HT能剂量依赖性地促进肉鸡PASMC的增殖,可能是5-HT加速细胞从G1期向S期过渡,同时5-HT也可促进PASMC凋亡,因此在总体上5-HT促进PASMC增殖的作用更明显。     

干扰B-Raf基因对绵羊毛囊干细胞增殖和凋亡的影响

本研究旨在探讨编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Serine/Threonine-Protein Kinase）的B-Raf基因对绵羊毛囊干细胞（HFSCs）增殖和凋亡的影响。将si-B-Raf转染至HFSCs,通过RT-qPCR实验技术检测B-Raf基因、Erk1/2基因和STAT3基因的表达水平,通过Western Blot实验技术检测B-Raf蛋白、Erk1/2蛋白、p-Erk1/2蛋白和STAT3蛋白的表达水平,通过EdU细胞增殖法和CCK-8细胞增殖检测法检测HFSCs的增殖情况,通过流式细胞仪检测HFSCs的凋亡情况。结果表明,si-B-Raf转染细胞后,B-Raf基因的表达量显著降低,Erk1/2基因和STAT3基因的表达量也显著降低;Western Blot实验结果表明,B-Raf蛋白、Erk1/2蛋白、p-Erk1/2蛋白和STAT3蛋白的表达水平显著降低;EdU和CCK-8结果发现细胞增殖受到抑制,细胞增殖水平显著下降;流式细胞仪检测到细胞凋亡水平显著上升。综上,干扰B-Raf基因表达显著抑制HFSCs增殖并促进其凋亡,可能是通过MAPK/Erk1/2通路进行的,研究可为...     

lncRNA NONRATT021477.2对氧化应激条件下BRL细胞增殖和凋亡的影响

以H₂O₂诱导BRL细胞建立氧化应激型模,通过ROS和MDA试剂盒检测氧化应激的发生状态。过表达和干扰表达lncRNA 77.2后,通过流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞增殖情况。结果显示,过表达lncRNA77.2后,BRL细胞内ROS和MDA含量均极显著下降(P<0.01),细胞增殖能力增强(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01);而干扰表达lncRNA77.2后,细胞内ROS显著升高(P<0.05),MDA含量极显著升高(P<0.01),细胞增殖能力下降(P<0.01),细胞凋亡率上升(P<0.01)。结果表明,lncRNA 77.2可作为抗氧化调控因子通过抑制凋亡和氧化损伤对大鼠肝细胞起到一定的保护作用。