阿维菌素粉中非法添加非泼罗尼检查方法的建立

建立了阿维菌素粉中非法添加非泼罗尼的液相色谱－串联质谱检测方法,使用C₁₈(100 mm×2.1 mm ,1.7 μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源负离子检测模式(ESI_-)和多反应监测(MRM)模式测定,外标法定量。结果表明,非泼罗尼进样浓度在0.025～20 ng/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r₂＝0.9995);平均回收率为100.2%(n＝15),RSD为7.7%。本方法简便、准确、快速、灵敏,适用于阿维菌素粉中非法添加非泼罗尼的检测。     

HPLC-DAD法测定2种中兽药散剂中非法添加非泼罗尼

建立鸡球虫散、驱虫散中非法添加非泼罗尼的液相色谱检查方法。采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)(3.5μm,4.6 mm×100 mm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器,波长采集190～400 nm,检查波长220 nm。通过色谱峰保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非泼罗尼进行定性,通过峰面积外标法进行定量。结果表明,方法检测限(LOD)为0.25 g/kg,在0.5 g/kg、2.0 g/kg、5.0 g/kg 3个添加浓度下,平均回收率为95.4%～101.5%,相对标准偏差为1.5%～2.5%,能够满足实际需求。本方法操作简单、检测快速、结果可靠,适用于以上2种制剂中非法添加非泼罗尼的定性定量检测。     

HPLC-DAD法测定2种阿苯达唑伊维菌素制剂中非法添加非泼罗尼

建立了2种阿苯达唑伊维菌素制剂中非法添加非泼罗尼的HPLC-DAD检测方法。液相色谱条件为:采用C18(3.5μm,4.6×100 mm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min;二极管阵列检测器检测,采集波长范围190～400 nm,记录色谱图波长为220 nm,柱温30℃,进样量10μL。通过液相色谱峰保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明:非泼罗尼质量浓度在0.5～100.0 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 92),在2种制剂中非泼罗尼的平均回收率分别在97.85%～99.26%(n=6)和97.47%～99.49%(n=6)之间,RSD均小于3%。本方法高效、简便、准确、可靠,适用于检测以上2种制剂中非法添加的非泼罗尼。     

HPLC-PDA法测定3种兽药中非法添加非泼罗尼

建立了3种兽药中非法添加非泼罗尼的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水-乙腈为流动相,梯度洗脱;二极管阵列检测器,提取波长为220 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下非泼罗尼与其他物质分离良好。非泼罗尼在阿维菌素粉、甲基吡啶磷可湿性粉、环丙氨嗪预混剂中的平均回收率分别为100.0%(RSD=1.6%)、108.7%(RSD=1.1%)、109.3%(RSD=1.2%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查以上3种兽药中非法添加的非泼罗尼。     

UPLC-MS/MS法测定3种中兽药制剂中非法添加的阿莫西林和氨苄西林

应用超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了3种中兽药制剂中非法添加阿莫西林和氨苄西林的检测方法。样品经50%乙腈水溶液提取、稀释后进行分析。实验采用0.2%甲酸乙腈溶液与0.2%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,经Atlantis T3柱(2.1 mm×150 mm,5μm)分离,通过多反应监测模式进行测定。结果表明,阿莫西林和氨苄西林在1~50 ng/m L的范围内线性关系良好,最低检测限分别为0.5 mg/g和0.2 mg/g。阿莫西林回收率在83.4%~95.8%之间,RSD为2.0%~4.6%;氨苄西林回收率在85.1%~97.2%,RSD为1.7%~4.0%。本方法准确、可靠,可用于中兽药制剂中非法添加阿莫西林和氨苄西林的检测。     

高效液相色谱法测定复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂的含量

建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂叔丁基对羟基茴香醚(BHA)与二丁基羟基甲苯(BHT)含量。采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250×4.6 mm, 5μm),流动相A为乙腈-甲醇-水(47∶21∶32),混合前在水中加入1%冰醋酸,流动相B为乙腈,线性梯度洗脱;检测波长为285 nm;流速为0.9 mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL;采用外标法计算BHA、BHT含量。在建立的色谱条件下,空白溶液、阴性样品对BHA、BHT的测定均无干扰;BHA、BHT的检测限分别为0.08μg/mL和0.19μg/mL,定量限分别为0.31μg/mL和0.77μg/mL,分别在5.13～15.39μg/mL与2.56～7.66μg/mL范围内线性关系良好;平均回收率分别为98.5%和99.9%(n=9)。所建立的方法简单易行、专属性强、准确度高、灵敏度好,可用于复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂的含量测定。     

QuEChERS-高效液相色谱法检测牛肉中的阿维菌素类药物残留

旨在建立牛肉组织中阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和甲氨基阿维菌素等4种阿维菌素类药物残留的QuEChERS-高效液相色谱检测方法。牛肉组织样品搅碎后,乙腈两次提取,QuEChERS净化,氮气吹干,含1-甲基咪唑和三氟乙酸酐的乙腈溶液衍生化,高效液相色谱-荧光检测器检测(激发波长365nm,发射波长475nm)。在0.1μg/mL~2μg/mL范围内4种药物均呈线性相关,相关系数大于0.999。检测限为2μg/kg(S/N=3),当添加浓度为2、10、40μg/kg时,4种药物的平均回收率在77.3%~97.2%,日内相对标准偏差为2.05%~4.91%(n=5),日间相对标准偏差为0.27%~1.64%(n=3)。建立的方法简便、灵敏、高效、安全,可用于动物组织中阿维菌素类药物残留的检测。     

液相色谱-串联质谱法检测牛奶中4种阿维菌素类药物残留量的研究

建立了一种可同时检测牛奶中4种阿维菌素类药物(阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃谱利诺菌素)残留的液相色谱-串联质谱方法(LC-MS/MS)。牛奶样品经乙腈提取,高速离心去除蛋白质等杂质,C18柱净化。以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行洗脱,流速0.4 m L/min,采用基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明:阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃谱利诺菌素在0.5~100 ng/m L浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.996;4种阿维菌素类药物的定量限均为0.5μg/kg。阿维菌素在0.5~5μg/kg添加浓度范围内,伊维菌素在0.5~20μg/kg添加浓度范围内,多拉菌素在0.5~30μg/kg添加浓度范围内,埃谱利诺菌素在0.5~40μg/kg添加浓度范围内,回收率为66.4%~120%;批内与批间相对标准偏差均小于20%。该方法具有简便快速、灵敏度高、定性准确,重复性好等特点,可以满足牛奶中4种阿维菌素类药物残留检测的要求。     

HPLC法同时测定复方吡喹酮浇泼剂中有效成分的含量

本试验旨在建立一种同时测定复方吡喹酮浇泼剂中吡喹酮和乙酰氨基阿维菌素含量的HPLC方法.色谱条件为 C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温30 ℃,流动相为乙腈-水-三氟乙酸(70:30:0.01),流速1.0 mL/min,进样量20 μL,检测波长245 nm.吡喹酮在0.7506~7.5063 mg/mL范围内,乙酰氨基阿维菌素在31.266~312.660 μg/mL范围内线性关系均良好,相关系数(r)均为0.9999,平均回收率分别为99.0%、98.1%,RSD分别为1.02%、0.32%.本试验所建立的HPLC法快速简便、准确可靠,可用于复方吡喹酮浇泼剂中吡喹酮和乙酰氨基阿维菌素含量的测定.     

HPLC-MS/MS检测双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-串联质谱法检测兽用中药制剂双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的方法。样品经0.2%甲酸溶液溶解后稀释,以0.2%甲酸溶液与甲醇作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行测定。13种喹诺酮类药物检测限(LOD)为0.1~0.5 mg/m L,定量限(LOQ)为1~5 mg/m L,在5.0~200 ng/m L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,在5、10、20 mg/m L三个添加浓度下,平均回收率为90.9%~101.9%,相对标准偏差为0.6%~3.8%。     

HPLC-MS/MS法测定饲料中硫酸新霉素的含量

试验建立液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS)测定饲料中硫酸新霉素含量的方法。饲料中硫酸新霉素经磷酸盐缓冲液提取,C18固相萃取柱净化,用高效液相色谱-串联质谱仪进行测定,液相色谱采用C18(100.0 mm×2.1 mm,2.4μm)色谱柱,乙腈+20.0 mmol/L七氟丁酸溶液作为流动相,梯度洗脱。质谱采用正电喷雾离子源,多反应检测(MRM)模式测定。结果表明:硫酸新霉素在0.1~5.0μg/m L质量浓度范围内线性关系良好(r=0.997 9);方法检测限为0.2 mg/kg,定量限为0.4 mg/kg;方法回收率为75.8%~98.2%。     

HPLC-MS/MS检测双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-串联质谱法检测兽用中药制剂双黄连注射液中非法添加13种喹诺酮类药物的方法。样品经0.2%甲酸溶液溶解后稀释,以0.2%甲酸溶液与甲醇作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行测定。13种喹诺酮类药物检测限(LOD)为0.1~0.5 mg/m L,定量限(LOQ)为1~5 mg/m L,在5.0~200 ng/m L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,在5、10、20 mg/m L三个添加浓度下,平均回收率为90.9%~101.9%,相对标准偏差为0.6%~3.8%。     

高效液相色谱-二极管阵列检测法测定乳酸环丙沙星可溶性粉中非法添加甲硝唑和替硝唑的研究

为确证乳酸环丙沙星可溶性粉中的非法添加物,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)的谱库匹配,推断出疑似添加物为甲硝唑,从而建立检测乳酸环丙沙星可溶性粉中违规添加甲硝唑和替硝唑的高效液相色谱法。采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(20∶80,V∶V),流速为1.0 mL/min,柱温30℃,用二极管阵列检测器进行扫描,扫描范围为190～400 nm,检测波长为320 nm。该色谱条件下甲硝唑和替硝唑与其他物质峰分离良好。甲硝唑和替硝唑在0.5～100μg/mL浓度范围内线性良好,在2.5 mg/g、5.0及10.0 mg/g 3个添加浓度下,加样回收率为99.5%～100.2%,RSD小于1.5%,检测限为2.5 mg/g。本方法简便快捷、准确度和灵敏度高,能满足非法添加物检测的要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测抗菌药物中非法添加利巴韦林的研究

建立了多种抗菌药物中非法添加利巴韦林检测的UPLC-MS/MS方法。样品经乙腈提取稀释后,采用ACQUITY UPLCBEH amide色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描分析测定。结果显示,利巴韦林在1~50 ng/m L范围内线性关系良好(R2=0.9992),样品检出限为0.5 mg/g,定量限为2 mg/g;在40、50、60 mg/g添加水平的回收率为90%~110%,批内批间变异系数均小于10%。本方法灵敏、快速、重现性好,适用于多种抗菌药物中非法添加利巴韦林的检测。     

HPLC法测定中兽药散剂中非法添加的10种磺胺类药物

建立了中兽药散剂中非法添加10种磺胺类药物测定的高效液相色谱方法。液相色谱条件为:色谱柱C_(18)柱150 mm×4.6 mm(i.d.),5μm;流动相:乙腈-甲醇-2%乙酸溶液(15+5+80);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长:270 nm;进样量10μL。结果表明,10种磺胺类药物在50~800 ng/mL浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数R~2均大于0.995,方法检测限为5μg/g,从5、10和20 mg/g 3个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为85.4%~106.8%(n=6),批内批间RSD均小于10%。     

HPLC-DAD法检测喹乙醇预混剂中违规添加喹烯酮的研究

确证1批次喹乙醇预混剂中的非法添加物。采用HPLC-DAD的谱库匹配,推断出疑似添加物为喹烯酮,从而建立了检测喹乙醇预混剂中违规添加喹烯酮的反相高效液相色谱法(HPLC-DAD)。采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(60∶40),流速1.0 m L/min,波长扫描范围为210~400 nm。喹烯酮在1~100μg/m L浓度范围内线性关系良好,r=1.0000;平均回收率为99.4%~99.8%,n=5,RSD在0.8%~1.0%之间。     

液相色谱串联质谱法测定猪肉中的安定残留

建立了猪肌肉中安定的高效液相色谱-串联质谱检测方法。用乙腈提取猪肌肉组织中的药物,经HLB固相柱净化,采用正电喷雾离子源,在多反应监测(MRM)模式下测定,三对定性离子对(m/z)分别为:285.4>154.0、285.4>193.0和285.4>257.0,定量离子对m/z为285.4>154.0。结果表明:安定在0.1~100 ng/mL内线性良好,相关系数r为0.998 5。在0.5、2、10μg/kg添加水平下,加标回收率为68.2%~97.6%,变异系数(CV)在2.2%~7.8%之间,检测限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定貉子肉中30种抗生素残留量

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定貉子肉中喹诺酮类和磺胺类等30种抗生素残留量的分析方法。貉子肉样品用5%甲酸乙腈提取,上清液经经EMR-Lipid净化后,经Phenomenex Kinetex F5(3.0 mm×50 mm,2.6μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源、正离子模式(ESI+)下电离,多反应监测(MRM)模式下检测,外标法定量。30种抗生素在2~100μg/L的范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.997 93~0.999 98。添加回收率为60.4%~105.8%,相对标准偏差(RSD,n=6)为2.9%~13.5%;方法检出限为0.01~0.40μg/kg,定量限为0.02~0.81μg/kg。该方法操作简单、灵敏度高,能够满足貉子肉中磺胺类及喹诺酮类等30种抗生素残留量的快速筛查和定量工作。     

LC-MS/MS法对动物源性食品中金刚烷胺的残留分析

本试验用高效液相色谱-电喷雾串联质谱对动物源性食品中金刚烷胺进行了检测。以甲醇-1%三氯乙酸(50+50,V+V)作提取剂,萃取液用Oasis MCX固相萃取柱(3cc,60mg)进行净化,以luna C18,3.0μm,2.1×150mm色谱柱为分析柱,在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱仪进行测定。在1.0~50.0ng/ml范围内线性关系良好(r2≥0.999)。样品在1.0μg/kg,5.0μg/kg和10.0μg/kg添加水平的回收率为72.5%~89.8%,相对标准偏差小于10.0%;方法的定量限为5.0μg/kg。     

高效液相色谱法检测6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星

建立了检测止痢散、银翘散、健胃散、白头翁散、荆防败毒散和苍术香连散6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星的高效液相色谱法。样品直接用乙腈提取;采用Waters SymmetryC18 5μm,4.6 mm×150 mm色谱柱,以乙腈-0.04 mol/L磷酸氢二钠溶液(p H=6.5)(70∶30)为流动相,检测波长为285 nm,流速1 m L/min,温度为室温。结果显示:2种大环内酯类药物在0.2~100μg/m L范围内,线性关系良好,R2均大于0.99,该方法平均回收率为89.0%~97.9%,批内相对标准偏差(RSD)均小于10%,该方法检测限为0.05和0.08 mg/g,定量限均为0.1和0.16 mg/g。结论:试验建立的方法灵敏、简单、快速且准确,可用于该6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星的测定。