细管冻精不同解冻方法对荷斯坦牛受胎效果的影响

为研究探讨奶牛细管冻精不同解冻方法对荷斯坦牛受胎效果的影响,试验对奶牛细管冻精经不同方法解冻后精子活力、有效存活时间以及输精后第一情期受胎率进行了研究,结果表明:(1)在5℃和15℃解冻时精子活率低于0.35,差异不显著(P>0.05);90℃解冻后活率显著低于40℃、75℃组(P<0.05),其中75℃解冻3 s精子的活率最高,解冻效果最好;在40℃解冻20 s效果较好.(2)在40℃和75℃解冻后,精子存活时间随解冻温度升高而缩短,其中40℃解冻后精子有效存活时间较75℃差异极显著(P<0.01).(3)冻精采用75℃3 s解冻后输精较40℃解冻20 s第一情期受胎率高5.45%,差异不显著(P>0.05).     

不同解冻方法对奶牛细管冻精活力的影响

研究探讨了不同解冻方法对0.25 mL奶牛细管冻精解冻后的影响,细管冻精分别在5,15,40,75,90℃下不同时间（1～120 s）进行解冻操作,通过评定精子冻后活率、顶体完整率、尾膜完整率,筛选出最佳的奶牛细管冻精的解冻方法。结果表明：（1）奶牛细管冻精采用75℃解冻3 s,精子的活率最高,解冻效果最好;其次在接近体温40℃解冻20 s,效果也较好;在低温5℃和室温15℃解冻,精子活率低于0.3;在90℃高温解冻条件下不稳定,不适合生产使用;（2）90℃解冻精子的顶体完整率、尾膜完整率明显低于40℃和75℃,差异显著（P＜0.05）,但是精子畸形率却高于40℃与75℃的处理组（P＜0.05）,而后两者间差异不显著（P＞0.05）;（3）不同解冻温度解冻后精子在37℃时保持有效存活时间存在较大差异,表现为：40℃＞75℃＞90℃。因此,在生产实践中对奶牛细管冻精进行解冻时,可根据具体情况选用适合的解冻方法。若解冻后立即输精的,建议采用75℃下3 s解冻;解冻后不能立即输精的,为了使精子在较长时间内保持活力,宜采用40℃下20 s解冻。     

不同解冻方案与奶牛受胎率关系的研究

为研究不同解冻方案与奶牛受胎率的关系,试验选用81头健康无病,自然发情及排卵都正常的荷斯坦牛,对采用4种解冻方案（40℃20s与75℃3s水浴解冻、体内解冻、手搓解冻）的细管冻精解冻后的受胎效果进行跟踪对比,结果显示：体内解冻组的第一情期受胎率最高,为50.00%,其次是40℃20s解冻组,第一情期受胎率为45.00%,两组差异不显著(P＞0.05);75℃、3s解冻组与手搓解冻组的第一情期受胎率分别为42.86%和35.00%,手搓解冻组的第一情期受胎率较体内解冻组、40℃20s解冻组差异显著（P＜0.05）。试验结果表明,在人工授精生产中冻精选用体内解冻直接输精法奶牛第一情期受胎率最高。     

牛细管冷冻精液的解冻研究近况

<正> 牛冷冻精液的解冻方法,因颗粒、安瓿和细管法的不同差别很大(如1977Olar等)对安瓿冷冻精液的研究,1979 A.A.EI—Men—ufi和B.等关于颗粒冷冻精液的研究)。随着冷冻精液在养牛业中的普及率不断提高,细管冷冻精液的应用比重越来越大,据1977—1978年37个国家统计,细管法占90％。关于细管冷冻精液冷冻前的处理和受胎率的关系等方面的资料很多。细管冷冻精液的解冻方法,解冻后的处理和精液品质与受胎率的关系等也有不少研究。但是作为一个完整的解冻程序     

牛冷冻精液保存与使用方法(下)

三、牛冷冻精液解冻与镜检注意事项 1.细管精液解冻首先将水浴 锅内水温加热到370℃～39℃,然后用镊子取1支冷冻后的细管精液迅速浸泡入37℃～39℃温水中并晃动,待溶解后取出,用卫生纸或纱布擦掉细管上的水珠,再用细管剪剪去超声波封口端,挤2小滴精液于载玻片上,盖上盖玻片进行冻后活力检测.     

不同解冻温度对精子活力的影响

温度是精子最敏感的外界因素之一。人们的注意力多集中在稀释液和冷冻方法的研究,对冷冻精液的解冻方法和技术的研究不足。但实践证明,牛精液冷冻效果好坏与解冻温度有很大关系。长期以来,人们沿用冷冻精液的解冻温度38～40℃解冻冷冻精液。为此,可以通过本试验了解不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,找出适宜牛细管冷冻精液的最佳解冻温度。     

不同解冻温度和时间对肉牛细管冻精精子活力的影响

[目的]寻找肉牛精子最佳解冻温度和解冻时间。[方法]将54支利木赞公牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻,对解冻后的精液品质进行检测。[结果]解冻后精子活率随解冻温度升高(40～75℃)而升高,而畸形率随解冻温度升高而降低,但高温下(90℃)解冻,精子活率显著低于解冻温度为40～75℃(P<0.05),畸形率显著高于解冻温度75℃(P<0.05);低温(40、75℃)下随着解冻时间延长,精子活率增高,但差异不显著;高温(90℃)下解冻,精子活率与解冻时间长短关系更为明显,时间越长,精子活率越低。精子畸形率、存活时间与解冻时间无显著关系。[结论]在生产实践中根据具体情况选用适合的解冻温度和解冻时间,建议使用75℃/3～5s解冻。     

水牛细管冻精输精效果观察

为提高水牛冷冻精液人工输精受胎率,2003年,根据现场、异地输精的路程远近、时间长短,从解冻温度、保存方式、输精后受胎率等方面进行了试验。结果显示：现场输精,38℃解冻后在卵泡成熟期输精,总受胎率为77.8％：进行异地输精时．在3h以内,按“早上-下午”法则,用35～38℃解冻后体温保存输精．总受胎率为68．2％;在3～6h以内,坚持在发情结束后8～12小时．用2～8℃解冻后体温保存输精．总受胎率为69.2％。效果较好。该项技术自2004年在全县13个乡镇推广应用,到2008年水牛冻改半径由5km扩大到40km．冻改点增加7个,水牛配种受胎率比2002年提高了13．7个百分点。     

山羊精液冷冻保存与应用技术的研究

1985-1987年对江苏白山羊精液颗粒冷冻保存技术与应用效果进行了研究,试验结果表明:稀释液中甘油最终浓度以1.5％最好,始冻温度-145℃为佳,40-41℃解冻温度好,冻精颗粒0.1±0.01ml加 0.4ml解冻液解冻,输精剂量 0.5ml,每情期输精2次,一次情期受胎率达74.1％,与自然配种相比,受胎率无明显差异,而窝平产羔数比自然配种多0.33只.     

山羊精液冷冻保存技术研究

[目的]探索山羊精液的冷冻方法。[方法]以甘油为冷冻保护剂,采用细管法冷冻保存山羊精液,探讨甘油浓度和添加时间、冻结方法和解冻温度对山羊精液冷冻效果的影响。[结果]在稀释液中添加6%和7%甘油的处理组中,冻后精子活率与复苏率均显著高于添加3%、5%甘油的处理组。配液时添加6%甘油的处理组中冻后精子活率与复苏率均显著低于在4℃平衡后添加的处理组。把平衡的山羊精液分别在离液氮面3 cm处熏蒸9 min和-80℃冰箱中冻结9 min,前者的精子复苏率显著低于后者。在解冻温度分别为40、45和50℃的处理组中精子冻后活率与复苏率显著高于解冻温度为55和60℃的处理组,说明解冻温度以40～50℃为宜。[结论]在山羊精液冷冻保存中,甘油的最佳添加时间为4℃平衡后冻结前。     

波尔山羊细胞冷冻精液保护保存效果研究

通过对4种波尔山羊细管冷冻精液保护液保存效果对比试验，筛选出稀释后精子活力，解冻后精子活力及解冻后室温保存12h精子活力较好的保护液，并且用于细管冷冻精液的批量生产和推广。     

猪精液0.5 ml细管快速冷冻和解冻方法的优化

 【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5 ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。【方法】冷冻方法：分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11 cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20 min后投入液氮保存,37℃×30 s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25 s、47℃×20 s、52℃×15 s、57℃×10 s和62℃×5 s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。【结果】采用3 cm×10 min冷冻方法,解冻0、8 h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对“高温短时”解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位均较高,同时丙二醛浓度降低;57℃×10 s和62℃×5 s解冻的精子各项指标无显著差异（P＞0.05）,但前4项指标显著高于对照组（P＜0.05）,丙二醛浓度显著降低（P＜0.05）。【结论】优化猪精液0.5 ml细管快速冷冻的冷冻和解冻方法可以显著提高解冻质量,采用3 cm×10 min冷冻、57℃×10 s或62℃×5 s解冻方法效果最佳。     

使用细管冷冻精液提高授胎率的几个问题

目前，我们所使用的细管冷冻精液较过去用的颗粒精液在应用上更方便、更卫生、更快捷、受胎率更高。为冷冻精液配种提供了优越的条件。但是，在现时实际操作过程中，由于家畜人工授精操作技术人员的技术水平等级差异，改良配种设施不齐备，一家一户串门或是上门配种输精方式，不同程度的降低了细管精液的优势，就此，作者就从事改良配种工作的切身体会，对细管冷冻精液使用方法，提出自己的看法。     

圆筒形贮存管对猪精液冷冻保存效果的影响

试验研究了用圆筒形贮存管冷冻猪精液时不同漂浮时间和解冻时不同解冻温度、时间对冷冻保存效果的影响。猪精液冷冻时,圆筒形贮存管在放入液氮罐前,先置液氮面上3 cm处,分别漂浮熏蒸5、10、15、20 min后投入液氮中保存。精液解冻时,分别在37℃＋1.5 min、52℃＋1.0 min、70℃＋0.5 min解冻处理。结果表明,漂浮15 min处理可显著提高猪精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。52℃＋1.0 min处理组的猪精液冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其它2个处理组。试验结果还证实,用圆筒形贮存管冷冻猪精液是可行的,所获得的冷冻后最高精子活率与用0.25 mL麦管获得精子活率无显著差异。     

稀释液及解冻条件对湖羊冻精质量的影响

为优化湖羊冻精生产工艺,提高冻精质量,以湖羊种公羊的精液为试验材料,分别选择7种稀释液进行处理,采用液氮熏蒸法进行冷冻,并设置不同解冻温度和时间进行交叉试验。结果表明:7号稀释液处理的湖羊精子在42℃和70℃两种解冻条件下的活力、活率、质膜完整率和顶体完整率均最高; 6种解冻条件中,70℃解冻5 s的解冻效果最佳,其活率、活力、质膜完整性和顶体完整率分别达50. 62%、43. 09%、40. 09%和54. 37%。综上,7号稀释液和70℃解冻5 s是湖羊精液冷冻的最佳稀释液和解冻条件。     

波尔山羊精液高倍稀释试验研究

为充分发挥波尔山羊种公羊的作用,对精液高倍稀释各个技术环节进行了多方面的试验研究。采用新鲜羊奶稀释液进行了7个不同稀释倍数的试验,结果表明5倍与8倍稀释组情期受胎率分别为91.4%和91.5%,差异不显著(P>0.05);其它各组之间差异均显著或极显著(P<0.05或P<0.01);各组的情期受胎率随着稀释倍数的增大逐渐下降,15倍稀释组为84.0%,20倍为76.0%,25倍为68.8%,30倍为53.3%。25倍以下的稀释倍数,输入有效精子数在1000万以上,生产上是可以应用的。稀释液的筛选试验表明鲜奶稀释液受胎率较高;二次稀释法比一次稀释提高受精率9%(P<0.05);子宫颈深部输精比子宫颈口输精提高受胎率95.5%(P<0.01);10倍以上稀释有利于精液常温保存。     

湖羊精液稀释液及冷冻保护剂的筛选

试验旨在研究不同稀释液对湖羊精液的4℃保存效果,同时探讨不同种类及浓度的冷冻保护剂对湖羊精液冷冻保存效果的影响。选择6种常见的绵羊精液稀释液配方,检测湖羊精液稀释后精子活力变化,分析精子存活时间及生存指数;另选取6种常见的精子冷冻保护剂,分3组浓度(5%、10%、15%)添加,检测细管冻精解冻后的精子活率。结果表明,6种稀释液对湖羊精液的4℃保存效果存在显著差异,其中F稀释液保存效果最佳。冷冻保护剂的种类和添加比例对湖羊精液的冷冻保存效果都存在影响,稀释液中添加5%的丙三醇对湖羊精液的冷冻保存效果最佳。     

绵羊腹腔内窥镜子宫角深部冷冻精液输精试验

采用人用黄体酮 ,PMSG对绵羊进行同期发情处理 ,46只绵羊 48h同期发情率为 95 .6 5 % (4 4/ 46 ) ,用解冻后活力仅 0 .2的冷冻精液 ,借助腹腔内窥镜子宫角深部输精 ,情期受胎率 72 .73% (32 / 44 ) ,与澳大利亚Salamoan教授腹腔内窥镜子宫角冷冻精液输精情期受胎率 74.0 4% (77/ 10 4)且冻后活力 0 .5 ,仅差 1.31个百分点 ,差异不显著 (P <0 .0 5 ) ,而与常规冷冻精液输精的情期受胎率 5 5 .45 % (178/ 32 1)相比 ,高出 17.78个百分点 ,差异极显著 (P <0 .0 1)。     

浅谈奶水牛冻精输精配种的关键技术

印度摩拉水牛是较好的乳用水牛品种,它与我国本地水牛杂交的杂种较本地水牛体型大,生产发育快,役力强,产奶量高.细管冷冻精液是目前一种理想的剂型,具有冷冻时受冻均匀、解冻时受热一致、解冻方便、输精时不易污染、避免精液和液氮的直接接触、精子活力好、受胎率高的优点.笔者长期从事印度摩拉水牛与本地母水牛的杂交改良工作,积累了奶水牛细管冻精人工授精经验,本文总结母牛发情时间、细管冻精的解冻与装枪、适时输精和输精等关键技术环节,供参考.     

藏獒精液冷冻技术的研究

以藏獒为试验材料,对藏獒精液冷冻过程中的几个主要技术环节进行研究,旨在确定适合于藏獒精液冷冻保存的方法.对藏獒精液冷冻过程中降温平衡时间、不同液氮面高度和解冻温度进行研究,结果表明精液用200 Ml水进行降温平衡,距液氮面3 am熏蒸,用40℃解冻时精液的冷冻效果最好.