食品微生物DNA能力验证样品的均匀性和稳定性研究

食品微生物DNA能力验证,是利用DNA检测方法,通过实验室间微生物检测结果的比对来确定实验室检测能力的活动。以沙门氏菌(Salmonella)基因组DNA为测试目标,开展了实验室间食品微生物DNA检测能力验证样品的制备,研究了DNA检测能力验证中样品的均匀性和稳定性,以期为食品微生物DNA能力验证的运作提供指导。     

可视化单引物等温扩增技术检测发酵乳制品中沙门氏菌的研究

建立了可视化单引物等温扩增技术(Visual single primer isothermal amplification,Visual SPIA)检测发酵乳制品中沙门氏菌(Salmonella)的方法。针对沙门氏菌侵袭蛋白(Invasion protein A,invA)基因设计引物,验证该方法特异性,同时对人工污染发酵乳制品的检出限进行测定。分别采用国家标准方法 (GB 4789.4—2016)和可视化SPIA方法对235份发酵乳制品样品进行检测,确定可视化SPIA方法的敏感性、特异性及符合率。结果显示,12株沙门氏菌呈阳性结果,29株非沙门氏菌均呈阴性结果。荧光可视法的检出限均为3.2×101CFU/mL,沉淀可视法的检出限为3.2×102CFU/mL。可视化SPIA方法的敏感性为100.00%,特异性为98.15%,符合率为99.15%。该方法特异性强,可通过肉眼直接观察并判定结果,实现了对沙门氏菌的可视化检测,对沙门氏菌引起的食物中毒的预防和控制具有重要意义。     

沙门氏菌乳胶凝集方法与常规方法的比较分析

以沙门氏菌乳胶凝集试剂盒为研究对象,通过与《GB 4789.4—2016食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法的比较,分析沙门氏菌乳胶凝集试剂盒在沙门氏菌检测中的作用及有效性评价。通过研究发现,沙门氏菌乳胶凝集试剂盒能够快速检测样品中的沙门氏菌,与《GB 4789.4—2016食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法相比,缩短了检测时间。但沙门氏菌乳胶凝集试剂盒能检测大部分的沙门氏菌,对于有些沙门氏菌无法检测出,因此只能作为沙门氏菌检测的辅助方法。     

益绿素对沙门氏菌抑菌作用的研究

采用益绿素对从猪场猪粪中分离出的乙型副伤寒沙门氏菌(Salmonlla paratyphi B)、斯坦利沙门氏菌(Salmonlla stanley)、雷根特沙门氏菌(Salmonella thunderghent)、德尔卑沙门氏菌(Salmonlla derby)以及鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)进行抑菌实验。选出对益绿素敏感性最强的1株沙门氏菌,在不同温度,不同pH值及不同质量浓度的益绿素条件下,对该株沙门氏菌的抑菌效果进行了研究。结果表明,益绿素对5株沙门氏菌均有抑菌效果,其中对雷根特沙门氏菌(Salmonella thunderghent)的抑菌效果最好,在温度为42℃,pH值为6.8～7.8,益绿素质量浓度为17.5g/L时,益绿素对该沙门氏菌的抑菌效果最佳。     

鸡场对沙门氏菌的控制措施

<正>鸡场常见的沙门氏菌有鸡白痢沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,除此之外,还有许多其他种类,血清型超过2600多个。沙门氏菌能够直接侵入动物细胞内,难以通过抗生素控制(大部分抗生素作用于细胞外部)。许多动物(尤其是家禽类)会被永久感染且垂直传播。沙门氏菌对养鸡业危害巨大,10只感染沙门氏菌的纯系母鸡可间接生产出6万吨受沙门氏菌污染的鸡肉,6000只沙门氏菌阳性祖代母系母鸡可感染300     

鸡蛋清洁前后蛋壳表面沙门氏菌污染检测

为了解使用鸡蛋清洁技术能否减少蛋壳表面沙门氏菌污染,取清洁前后的鸡蛋各60枚,分别置于保鲜袋中相互隔离。用无菌棉拭子采集蛋壳表面细菌,经前增菌和选择性增菌后,提取细菌DNA进行PCR检测。清洁后的鸡蛋表面未检出沙门氏菌,未清洁的鸡蛋表面检出沙门氏菌,进一步检测,均不是肠炎沙门氏菌和伤寒沙门氏菌。说明鸡蛋清洁技术可以有效减少蛋壳表面沙门氏菌污染。     

猪肉中沙门氏菌污染情况及检测方法进展

沙门氏菌作为引起食源性疾病的重要致病菌,在猪肉及猪肉制品中的污染率很高,因此肉类产品的质量安全成为社会关注的重大问题。快速准确地检测食物中的沙门氏菌是防止和控制沙门氏菌传播的重要手段。综述了沙门氏菌对猪肉的污染途径及沙门氏菌的几种检测方法,以引起人们对猪肉沙门氏菌污染和检测方法的关注。     

沙门氏菌检测的研究进展

沙门氏菌是一种能引起人畜共患病的病原菌,由其引起的食物中毒事件屡居首位,在食品致病菌的检测中,沙门氏菌的检测尤为重要。沙门氏菌的传统检测方法耗时较长,虽然成本较低,但检测过程也比较复杂,影响事件的结果。近几年随着科学技术的发展及分子生物学的兴起,各种试剂盒和PCR技术用于沙门氏菌的检测,还包括荧光定量法、基因芯片技术等。对沙门氏菌的检测方法进行综述。     

食品鸡蛋及死胚蛋中沙门氏菌的检测

为了解我国食品鸡蛋和死胚蛋(毛蛋)中沙门氏菌的感染情况,分别对130颗食品蛋的蛋壳表面、蛋内容物以及70颗完整死胚蛋(毛蛋)和66颗破壳死胚蛋的肝、肠、卵黄囊进行了沙门氏菌的检测。结果表明,在所检测的130颗食品鸡蛋中蛋壳表面及蛋内容物细菌的检出率分别为76.92%和4.83%,其中沙门氏菌的检出率分别为0.76%和0;70颗完整毛蛋肝、肠、卵黄囊细菌的检出率分别为:47.1%,42.9%,48.6%,其中沙门氏菌的检出率为:4.29%,4.29%,1.42%;66颗破壳毛蛋中肝、肠、卵黄囊细菌的检测率分别为:83.3%,93.9%,84.8%,其中沙门氏菌的检出率为:19.7%,18.2%,16.7%。研究表明,我国市场上鸡蛋的沙门氏菌检出率较低,但为了防止蛋壳表面的细菌和沙门氏菌渗入蛋内容物而对人类的健康造成危害,有必要进行洁蛋加工。对于毛蛋中沙门氏菌的检测,发现破壳毛蛋沙门氏菌的检出率显著高于完整毛蛋。因此,蛋壳在防止沙门氏菌入侵的过程中起到了重要作用。此外,由于毛蛋中沙门氏菌的检出率较高,在鸡蛋生产过程中需要加强孵化场的环境控制以降低雏鸡感染沙门氏菌所造成的危害。     

奶粉中沙门氏菌盲样考核结果与分析

为了考核食品安全监督抽检机构沙门氏菌的检测能力,按照《沙门氏菌盲样考核作业指导书》的要求和GB4789.10—2016的方法对10件样品(编码为CODE 1~CODE 10)进行检验并对分离菌株进行血清分型。编号为CODE 2的样品检出S.Colindale,编号为CODE 5的样品检出S.Agona,编号为CODE 6的样品检出S.Liverpool和S.II。此次试验室盲样考核结果为"满意"。     

浅析蛋鸡沙门氏菌病的综合防治

<正>蛋鸡沙门氏菌病是由某些特定血清型沙门氏菌所引起的一类常见多发病的总称,不仅严重危害蛋鸡的健康,给养鸡场造成严重经济损失,而且污染鸡蛋,对人类健康产生较大危害。本文从鸡沙门氏菌病的病原特性、流行特点、诊断方法和综合防治等方面加以分析,为更有效地防控该病提供科学依据。一、病原特性鸡沙门氏菌是肠杆菌科的一属,该属细菌抗原结构复杂,目前共发现四千多个血清型,我国已报道的血清型有240种以上。在自然条件下,沙门氏菌的抵抗力较强,     

鸡源沙门氏菌多重耐药和Ⅰ型整合子的流行调查

为了研究沙门氏菌多重耐药性与Ⅰ型整合子的流行情况,本研究从山东省鸡场分离沙门氏菌,根据Kauffmann-White方法测定其血清型,采用微量稀释法测定了沙门氏菌对19种常用抗菌药物的MIC值,并且采用PCR技术测定了Ⅰ型整合子及其携带的耐药基因盒。结果显示：本次分离得到311株沙门氏菌,包括印地安纳沙门氏菌（133株）和肠炎沙门氏菌（178株）2种血清型;药物敏感性试验表明：分离菌株对磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑、萘啶酸、氨苄西林、四环素、多西环素和甲氧苄啶普遍耐药,菌株多重耐药率为91.0 %(283/311),99%的分离株对阿米卡星、多黏菌素敏感;PCR测定Ⅰ型整合子结果：Ⅰ型整合子的检出率为65.0%(202/311),其中多重耐药表型菌株Ⅰ型整合子阳性率为92.6%,202株整合子阳性菌株中有6株的携带基因盒dfr17-aadA5。上述结果表明,Ⅰ型整合子普遍存在于沙门氏菌中,并且与沙门氏菌的多重耐药性密切相关。     

柚皮总黄酮抑菌效果及抗氧化活性测定

通过研究柚皮总黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、青霉菌、啤酒酵母的抑菌作用,以及对·OH和·O2-的清除能力得出,柚皮总黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌具有良好的抑菌效果,与其质量浓度呈正相关,10 mg/m L柚皮总黄酮的抑菌效果不如5μg/m L山梨酸钾溶液,但优于5μg/m L苯甲酸钠溶液与2μg/m L尼泊金乙酯溶液;柚皮总黄酮对青霉菌和啤酒酵母没有抑菌作用;柚皮总黄酮对·OH和·O2-均具有较好的清除能力,其抗氧化效果优于VC和茶多酚溶液。     

鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建

为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13（实验方）与鸡伤寒沙门氏菌Sg9（驱动方）基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR ,得到消减混合物, 将其与PCR?2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。     

鲜蛋中沙门氏菌的分离鉴定及生长模型分析

为了了解鲜蛋中沙门氏菌的污染情况及其生理特性,按照国家标准中蛋制品的检验程序,对养鸡场及市场共50个鸡蛋样品中的沙门氏菌进行分离,并对分离出的可疑菌株做生理生化鉴定试验,根据试验结果分析,确定其中1株为沙门氏菌,对其在温度37℃下的生长曲线进行数学分析,得出最适生长模型为MMF模型。     

种子企业能力验证活动中存在的问题及对策

<正>1种子企业能力验证活动的作用及现状针对我国种子企业开展能力验证活动的作用及现状,本文分析了开展能力验证工作可能遇到的问题,并针对能力验证活动提出建议。能力验证是利用实验室间比对来判定实验室能力的活动。能力验证体系在很多领域已经逐步成型,但我国种业实验室能力验证活动起步较晚,还未能引起大家的足够重视,能力验证在种业实验室领域的应用还有待深入研究和完善。     

定量PCR快速检测动物食品中沙门菌污染

摘 要： 沙门氏菌是动物性食品中的重要食源性致病菌,建立其快速检测方法对动物性食品的质量控制具有重要作用。本研究根据沙门氏菌16srDNA、 dT fermentation等基因或DNA功能区序列设计PCR引物, 通过比较3种不同的基因组DNA提取方法,提取待检样品总DNA, 进行多基因定量PCR检测。结果表明,该方法简单快速且灵敏度高,在动物食品中的检测灵敏度可达10 CFU/g,整个检测时间在10h 以内。说明本方法对检测动物中沙门氏菌具有特异性高且灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测动物中沙门氏菌的需要。     

核酸适配体在沙门氏菌快速检测中的研究进展

沙门氏菌是人畜共患病原菌,严重威胁人体健康。为有效控制沙门氏菌感染食品,预防因沙门氏菌感染而引起的食物中毒,对其进行快速检测很有必要。核酸适配体作为一种新型的仿生识别分子能特异性结合靶标物质,为食品安全快速检测技术的实现开辟了一条新的路径。此项技术具有靶分子范围广、稳定性好、制备及修饰方便等优点。通过介绍核酸适配体的概念、作用机理及特点,将核酸适配体在沙门氏菌的具体应用和发展方向作进一步的阐述。     

食品中两种沙门氏菌检测方法的比较

目前，我国现行有效的食品安全国家标准中针对食品中沙门氏菌的检测主要是传统的微生物学检测法，该方法操作繁杂，检测周期较长，已难以满足国内外对食品安全检测的要求。通过使用微生物学检测法和PCR法共同检测样品中沙门氏菌，比较两种方法在检测时间和检测结果准确性上的差别。试验结果说明，两种方法都能准确检测出含沙门氏菌的阳性样本，其中PCR法具有检测时间更短、特异性更强、灵敏度更高、操作更简单、成本更低的优势，可用于快速、准确地检测食品中沙门氏菌。     

猪沙门氏菌病的诊断与防治措施

猪沙门氏菌病又称仔猪副伤寒,是由致病性沙门氏菌引起的一种仔猪传染病,可分为急性型、亚急性型和慢性型。急性型呈败血症变化,亚急性型和慢性型主要表现为大肠发生弥漫性纤维素性坏死性肠炎,有时呈卡他性或干酪性肺炎。