γ干扰素体外释放试验在人和动物结核病诊断中的研究进展

结核病是给人类和动物健康造成严重影响的主要人兽共患传染病。早发现、早诊断、早干预对于有效地预防和控制结核病流行至关重要。γ干扰素是一种参与宿主抗结核感染的细胞免疫反应的细胞因子，基于其开发的γ干扰素体外释放试验可用于结核病诊断。鉴于目前酶联免疫吸附试验检测γ干扰素的方法存在诸多缺陷，例如耗时长、灵敏度低、无法区分潜伏性和活动性结核感染等，生物传感器正被尝试用于γ干扰素检测，以进一步提高诊断的灵敏性和特异性。本文归纳了将γ干扰素作为结核病生物标志物的多种检测技术，并讨论其适用范围和效果，以期为完善结核病诊断技术及开发新型诊断方法提供理论和技术参考。     

牛结核病体外免疫诊断技术

牛分支杆菌感染的主要特征是引起 细胞免疫反应。现在牛结核病的诊断试验是 以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结 核血清学试验是不值得提倡的,血清学试验 最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最 近,发现了牛结核γ干扰素试验是一种快速 的(24h)惟一使用全血的体外试验,该方法 在澳大利亚应用,结果表明,比传统的结核菌 素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题 归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特 性,设动物对牛PPD和禽PPD的γ干扰素反 应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核 特异性蛋白已确认并被分类,这些特异性蛋 白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用, 但是它们可能因牛对牛分支杆菌感染的免疫 反应的遗传多样性而受到限制。     

牛结核体外免疫诊断技术

牛分支杆菌感染的主要特征是引起细胞内免疫反应。现在针对牛结核的诊断试验是以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结核血清学试验是不值得提倡的，血清学试验最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最近，发现了牛结核r干扰素试验是一种快速的(24小时)惟一使用全血的体外试验，该方法在澳大利亚地区应用发现，该方法要比传统的结核菌素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特性，设动物对牛PPD和禽PPD的r干扰素反应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核特异性蛋白已确认并被分类，这些特异性蛋白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用，但是它们可能因牛对结核分支杆菌感染的免疫反应的遗传多样性而受到限制。     

应用ELISA方法检测牛结核分枝杆菌γ-干扰素

为了验证ELISA方法检测牛结核分枝杆菌γ-干扰素的可行性,应用建立的ELISA方法检测30份牛全血,结果为阴性和阳性对照均成立,30份全血的牛结核分枝杆菌γ-干扰素均为阴性,结果表明应用ELISA方法检测牛结核分枝杆菌γ-干扰素诊断牛结核分枝杆菌可行,可以适用于牛结核分枝杆菌的大规模监测。     

牛结核病诊断新技术

皮试试验是诊断牛结核病的常规方法,但由于纯蛋白质衍化结核菌素（ＰＰＤ）多次使用,会明显影响牛结核病的诊断结果。为此,英国学者利用ＥＳＡＴ－６和ＭＰＢ７０两种特异性结核病抗原建立了全血ＩＦＮ—ｒ（ｒ干扰素）试验,并评价了其诊断效果。试验采集１８０头牛血样作皮试试验检测,其中１３１头被证实患有结核病,并且１２８头来自非结核牛群。对上述血清用两种抗原建立的ＩＦＮ－ｒ试验进行检测,结果两试验具有明显的阳性相关性（Ｐ＜０．００１）。与皮试试验比较,该方法的敏感性为７６．３％,特异性为９９．２％,而皮试试验…     

牛结核病γ-干扰素体外释放检测随时间变化规律

检疫-扑杀是牛结核病防控与净化的重要措施，而准确诊断是有效实施结核病“检疫-扑杀”控制策略的基础和前提。近年来，许多牧场在结核检疫净化中采用牛结核皮试辅以牛结核γ-干扰素体外释放检测作为判定标准。随着两种方法结合使用的增加，皮试是否影响γ-干扰素体外释放检测日益引起关注。本研究在两个牛场分别对48头牛和55头牛进行了连续6周的γ-干扰素体外释放检测跟踪，明确了奶牛结核病γ-干扰素体外检测检出率和验证率随时间变化的规律，皮试后6周内γ-干扰素体外试验检出率呈“V”字形变化；验证率逐步上升，在皮试后7～42d维持在100%。     

结核杆菌特异性诊断抗原的研究

在人类及动物疾病中 ,传染病是引起死亡率最高的疾病。其中结核病是人畜健康的主要威胁。据统计 ,目前全球人群中结核杆菌感染者约17～20亿 ,结核病人约2000万 ,每年至少3000万人感染结核 ,约800万新结核病患者 ,200余万人死于本病 [1]。随着爱滋病感染人数的剧增 ,结核与爱滋病的混合感染日趋严重 ,每年约有15 %的爱滋病感染者死于结核。结核病的免疫和治疗仍是医学界的一大难题 ,唯一的疫苗—BCG免疫效果不稳定 ,药物治疗亦被耐药性问题所困扰。因此在结核病感染的早期建立快速的诊断方法对于本病的控制无疑具有举足轻重的作用。结核病…     

梅花鹿结核病的诊断报告

梅花鹿结核病的诊断报告范国治，赵永利，王萱，王丽双（牡丹江市兽医卫生防疫站．１５７００９）结核病是由结核分枝杆菌引起的人和畜禽共患的一种慢性传染病。我市某鹿场自１９９５年３起，陆续有数头梅花鹿相继发生以消瘦、咳嗽为主要症状的疾病。经流行病学、细菌学、...     

胶体金免疫层析检测牛结核γ干扰素方法的建立

牛结核病是一种重要的人畜共患病,尽管许多国家已经实施了牛群净化,但其仍然威胁人类的公共卫生健康。本研究利用抗牛γ干扰素特异性单克隆抗体,通过免疫金标记技术,建立了胶体金免疫层析试纸条检测牛γ干扰素的方法。研充结果证明,该方法对牛γ干扰素具有高度特异性,与其它动物干扰素没有交叉反应,检测牛γ干扰素的灵敏度与进口ELISA试剂盒相当。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月,其特异性及灵敏度没有明显变化。对田间送检的23份全血经结核特异性刺激后进行检测,结果与进口结核ELISA试剂盒符合率为91．3％。研究表明,本研究建立的牛γ干扰素免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点,适合用于牛结核的快速特异检测。     

牛结核γ-干扰素检测法和比较皮内变态反应在牛临床检测中应用

我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检测的不同方法。使用牛结核菌素比较皮内变态反应(CCT)与牛结核γ-干扰素检测法对某奶牛场200头奶牛实施平行检测,γ-干扰素检测法同时采用了国产试剂盒(KIT1)与进口试剂盒(KIT2)。结果显示:CCT与KIT2具有中等一致性(Kappa值为0.5),但特异性较差(66.4%),阳性预测值低(54.0%),易出现假阳性结果导致大量的错杀。γ-干扰素检测试剂盒KIT1与KIT2具有较好的一致性(Kappa值为0.9),总符合率95.0%,表明二者均能有效检测牛结核,且国产试剂盒能显著降低检测成本。在控制成本的前提下,建议用皮试先初筛,γ-干扰素检测法确诊阳性牛。     

奶牛结核病监控

奶牛结核病是由结核杆菌引起的人畜共患传染病，其特征是在器官和组织中形成结核结节。据报道，我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核病患者数量居世界第二位，我国约有活动性肺结核病人600万，其中80％在农村。每年有25万人死于结核病。结核病已成为我国农村因病致贫、因病返贫的主要疾病之一。     

牛副结核病疫群中对补反、变态呈阴性反应牛的胎盘感染率调查

牛副结核病胎盘传染已被一些学者通过从病牛胎儿中分离到副结核分枝杆菌所证实。由于副结核病尚没有令人满意的诊断方法,当前所应用的诊断方法都或多或少地存在一些假阳性和假阴性,这些假阴     

结核分枝杆菌检测方法及其耐药机制的研究进展

结核分枝杆菌在人类生活中已有几十万年,但至今仍有很多人因感染该菌而死亡。结核病仍是目前威胁人类生命的重要疾病之一,亦是单病因所致的感染性疾病中死亡率较高的疾病。我国是全球结核病爆发的重要灾区,近年来出现的耐多药结核病菌和广泛耐药结核病菌成为全球疾病控制的一个主要威胁,而我国结核病疫情主要以耐药率高为主要特征,耐多药结核病的患者总人数位居全球第一。文章概述了结核分枝杆菌最新的检测方法及其耐药机制,对于指导结核病治疗、控制其传播及开发新型抗结核病药物具有重要意义。     

乌鲁木齐市人畜间结核病流行病学调查研究

为了保障饮用牛奶的安全和人们健康,本研究对乌鲁木齐市2007～2010年共计47085头奶牛,采用结核菌素(PPD)皮内变态反应方法进行检疫,对检出的199头阳性牛养殖场(户)进行流行病学调查,同时用发达国家通用的比较变态反应和γ-干扰素实验进行比对实验,对阳性牛进行剖检,观察病理变化,采集病变肺脏和肺门淋巴结进行细菌培养和菌型鉴定。结果显示:国外比较变态反应与γ-干扰素检测具有较高的符合率;奶牛结核病分离到的牛型结核分枝杆菌占80%,人结核病分离到的人结核分枝杆菌占92.3%。乌鲁木齐市牛结核病的发病和流行与环境污染、活畜交易市场和集贸市场、畜及畜产品流通环节中的污染、饲养管理不科学、饲草料的污染、养殖人员自身疾病的影响和检疫净化的全面实施等相关。本实验的研究结果有利于乌鲁木齐奶牛结核病防治措施的制定和实施。     

意大利研究牛乳微RNA-146a用作潜在牛结核病生物标记物的潜力

正牛结核病是由牛型结核菌引起的一种人畜共患病,影响动物健康及畜群经济可持续性。牛结核病的诊断基于皮肤迟发型超敏反应和γ-干扰素定量分析,2种诊断方法均受几个混淆因子的影响。因此,需要新的早期诊断方法。微RNA被用作传染性和非传染性疾病的生物标记物有着良好前景。近期,意大利研究人员指出,牛乳微RNA-146a具有作为牛结核病生物标记物的应用潜力。为确定微RNA涉及牛结核病的可能性,根据牛结核病     

应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测牛结核病

本试验应用聚合酶链式反应(PCR)技术原理,研究建立了牛结核病PCR检测方法。试验结果表明:该方法的敏感性测定模板浓度为30.4pg,特异性测定牛结核分枝杆菌在478bp出现特异扩增带。通过对298头份牛奶和229份牛全血样本进行检测,检出阳性牛奶样本33份,阳性全血样本43份;鲜牛奶样本同时还用罗氏培养后采取PCR方法进行检测,检出阳性样本34份;全血样本同时还用PPD进行皮内试验,检出阳性样本52份。试验表明:牛结核病PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、快速等优点,为牛结核病的早期诊断提供了科学依据。     

民和县“出户入园”奶牛“两病”检测研究

本文采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和结核菌素皮内变态反应、牛结核r-干扰素ELISA试验分别对奶牛布病和结核病进行了检测,结果为:奶牛布病阳性率为3.26%;奶牛结核病阳性率为0.72%;结核菌素变态反应与牛结核r-干扰素ELISA试验阳性符合率为100%。     

四种不同检测方法在奶牛结核病诊断中应用的比较研究

应用γ干扰素试验、胶体金试纸条对100头奶牛进行试验,采集这100头奶牛的肝素抗凝全血及血清,经全血培养、抗原刺激,用γ干扰素试剂盒检测上清,用胶体金试纸条检测血清。同时应用传统皮内变态反应、欧盟比较皮内变态反应,对这100头奶牛进行检测,3d后观察结果。在100头被检测的奶牛中,传统皮内变态反应检出结核阳性36头,欧盟比较皮内变态反应检测出结核阳性13头,两种γ干扰素试验试剂盒分别检出结核阳性12头和10头,两种胶体金试纸条分别检出结核阳性11头和9头。     

牛结核病两种活体诊断方法检测结合病原学诊断的研究

本文报道应用两种活体诊断方法检测牛结核病的试验结果。2010～2011年度,应用PPD皮内变态反应方法分3批次对5156头奶牛和奶水牛实施监测,监测阳性数57头,阳性率1.11%。采集该57头牛抗凝全血,应用γ-干扰素酶联免疫吸附试验进行检测,检出阳性样品3份,阳性率5.26%。对14头第一批PPD皮内变态反应阳性牛进行病理检验和进行细菌分离培养和PCR检测,结果3份样品分离培养呈阳性,其中1份PCR鉴定为结核分枝杆菌,2份为非分枝杆菌。PCR方法检测的14份组织样品中,2份为结核分枝杆菌阳性,1份为牛结核分枝杆菌阳性。结合病理剖检和病原PCR诊断,分析比较PPD皮内变态反应试验和γ-干扰素酶联免疫吸附试验的敏感性和特异性,由于PPD纯度、非特异性反应、结果判定的主观性等因素,导致PPD皮内变态反应监测检出假阳性率较高。     

奶牛结核病的检疫监测方法

<正>奶牛结核病是一种由牛分枝杆菌所引起的牛的慢性传染病,具有感染性强的特点,通过奶制品,可传染至人或其他动物,易造成严重危害,属于二类动物疾病。近些年,奶牛结核病发病率有所上升,特别是规模化奶牛场,因此,奶牛结核病检疫引起了相关人士的关注与重视。如今,在科技发展的推动下,检测技术不断成熟、更新,在实践中得到广泛应用。其中,牛型结核分枝杆菌病PPD皮内变态反应试验与牛结核γ-干扰素ELISA试验是检测奶牛结核病的常用检测技术。