羊源肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

本研究通过病死羊的肺脏中进行细菌分离、形态学观察、生化试验、致病性试验、药敏试验和16S rRNA扩增。结果从肺中分离到1株具有致病性的革兰氏阴性短杆菌。生化试验鉴定结果符合肺炎克雷伯氏菌的特征。分离株对头孢噻肟、阿米卡星、头孢曲松和链霉敏感外,对强力霉素等12药物具有耐药性。16S rRNA测序结果分析显示分离株与肺炎克雷伯氏菌的核苷酸同源性为97.1%~99.0%,在核苷酸进化树上与肺炎克雷伯氏菌属于同一分支。结果表明本研究从病死羊的肺脏中分离到1株肺炎克雷伯氏菌。     

竹鼠源致病性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

为确定南宁隆安县某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,从发病的竹鼠肝、肺及肾脏中分离得到2株可疑细菌,经形态观察及16S rRNA序列分析,鉴定两株细菌均为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。测序结果显示,该菌16S rRNA与雷氏普罗威登斯菌(AB680422)同源性高达99.9%。药敏试验显示,对头孢吡肟、头孢唑林、头孢氨苄等药物高度敏感;对青霉素、氯霉素、氟苯尼考、复方新诺明等药物有抗性。这些研究结果表明,雷氏普罗威登斯菌是隆安县某竹鼠养殖场竹鼠致死的病原菌。本文在国内外首次报道了雷氏普罗威登斯菌对竹鼠有较强的致病性。     

猪液化沙雷氏菌的分离与鉴定

液化沙雷氏菌为人呼吸道标本的常见菌，偶在人的血液中检出，曾报道可致鸭发病。笔者于2004年12月在黄岩沙埠某猪场的病猪血液中检出具毒力的液化沙雷氏菌。该场病猪食欲不振，呼吸急促，甚至呈犬坐开口呼吸，食欲废绝，具传染性，而体温始终正常，因久治不愈而送检。后选用药敏试验筛选的敏感药物治愈病猪，控制了疫情。     

羊源铜绿假单胞菌的分离鉴定与生物学特征分析

为探究陕西省某羊场羊呼吸道疾病的主要病原,取该羊场8只病死羊的肺脏组织依次检测支原体、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒和副流感病毒,结果均为阴性。无菌采集病死羊肺脏组织进行细菌学检测,经细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验与分子生物学鉴定,共分离到5株铜绿假单胞菌(分别命名为PA1～5),并对分离菌株进行小鼠致病性试验、药敏试验、生物被膜试验。结果显示,注射菌液的小鼠均在24 h内死亡,剖检发现小鼠肺脏、肝脏、脾脏出血肿大,且有大小不等、散在分布的化脓灶。药敏试验结果表明,PA1～5分离株对恩诺沙星、庆大霉素均敏感,对氨苄西林、阿莫西林、替米考星、氟苯尼考、泰乐菌素、泰万菌素、多西环素均表现耐药性。生物被膜试验表明PA1具有中等生物被膜形成能力,菌株PA2～5具有弱生物被膜形成能力。表明铜绿假单胞菌可能是造成本次羊呼吸道疾病的主要病原之一,且5株羊源铜绿假单胞菌分离株具有一定的致病性并可形成不同强弱程度的生物被膜,可交替使用恩诺沙星、庆大霉素进行治疗。研究结果可为铜绿假单胞菌引起的羊呼吸道疾病的防治提供参考。     

羊源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力基因检测

为了调查内蒙古通辽市某羊场发病羊死亡的原因,对疑似致病菌进行分离、鉴定及部分生物学特性研究.对病死羊进行剖检,无菌条件下采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏等组织脏器进行细菌分离培养;对分离菌进行小鼠致病性试验、细菌生化检测、16S rDNA基因扩增及同源性比对分析和药物纸片扩散法敏感性试验.结果显示,分离菌株符合肺炎克雷伯菌生...     

致仔猪腹泻的雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

秦皇岛市某猪场哺乳仔猪发生以腹泻为主要临床表现的疾病,为查明其病因,无菌采集濒死仔猪小肠内容物进行细菌分离培养、培养特性、生化特性鉴定,初步表明该分离菌株为雷氏普罗威登斯菌(编号:Q20160503)。该菌的16SrRNA基因序列同源性比对分析表明,分离菌与Providencia rettgeri同源性达99.1%~99.3%。动物回归试验证实该分离菌株为致病菌。分离菌株对阿莫西林-克拉维酸钾、头孢噻呋钠、丁胺卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、左氧氟沙星、黏菌素、磺胺异恶唑等13种药物高度耐药,仅对美罗培南、乙酰甲喹敏感。     

竹鼠雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定及药敏试验

为查明引起竹鼠死亡的病因,以病死竹鼠的内脏器官进行病原菌分离,对优势分离菌进行培养特性、生化特性、细菌16S rRNA比对和致病力实验分析。结果表明,分离菌为对竹鼠具有较强致病力的雷氏普罗威登斯菌。体外药敏试验结果显示,分离菌对20种药物中,敏感的抗菌药物有头孢曲松、头孢他定、氧氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考和阿米卡星,表现中介的抗菌药物有头孢噻呋、头孢西丁、恩诺沙星、庆大霉素和链霉素等5种,而表现为耐药的有9种。     

羊源脲酶产生菌的分离及NS-3菌株的鉴定

为了从羊瘤胃液中筛选出可高效利用尿素的菌株,试验采用平板涂布法以尿素为唯一氮源对健康小尾寒羊瘤胃液进行初筛,对得到的变色圈较大的菌株进行脲酶活性检测和菌株形态特征、生理生化试验鉴定,结合16S rDNA序列分析并与相应种属的标准菌株进行比对,利用MEGA 5. 0构建系统发育树。结果表明:在羊瘤胃液中共分离得到83株具有变色圈的菌株,经纯化后得到9株变色圈较大的菌株,其中脲酶活性较高的菌株命名为NS-3,经鉴定和比对,NS-3菌株与解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella Ornithinolytica)的相似性达到100%,二者在所构建的系统发育树上处于同一个分支,因此最终鉴定NS-3菌株为解鸟氨酸拉乌尔菌。     

羊源链球菌的分离鉴定及防治

为了探索温州地区羊链球菌病的防控方法,研究羊链球菌病的病原血清群、生化特性、羊链球菌对药物的敏感性及耐药性,避免临床抗生素的滥用,试验采用分离纯化、生化试验、PCR鉴定、链球菌分群试验、药敏试验等方法对从温州瓯海、文成、苍南、永嘉等地羊场送检的8份疑似羊链球菌病料进行了研究,并且根据试验结果进行临床用药与预防。结果表明:分离出8株链球菌,其中C群链球菌6株,D群链球菌2株;生化试验结果符合链球菌特征;PCR鉴定得到的引物大小与链球菌通用引物大小吻合;分离出的链球菌均对头孢曲松钠、头孢哌酮、头孢噻肟、氨苄西林等药物高度敏感,对青霉素钠、阿莫西林、庆大霉素、链霉素、诺氟沙星等药物耐药;用高敏感药物对发病初期1 200只山羊进行治疗,治愈率高达98%;对爆发羊链球菌病C群的6家羊场羊只进行免疫,免疫保护率为97%;对爆发羊链球菌病D群的2家羊场羊只进行免疫,免疫保护率仅为50%。     

外来船舶压舱水中雷氏普罗威登菌的分离鉴定

<正>船舶压舱水有携带的致病微生物、有害水生动植物及其他有害物质,一旦在港口随意排放,将破坏当地的生态环境。目前人们对压舱水的研究侧重于藻类,致病微生物的研究较少,只有对大肠菌群以及致病性弧菌的报道。本文首次报道在入境的外轮压舱水中分离出雷氏普罗威登菌。     

一株羊源致病性大肠杆菌分离鉴定

为了研究齐齐哈尔市周边某羊场羔羊发生腹泻的原因,通过对1例腹泻羔羊的粪便进行细菌分离鉴定、生化试验、K-B试纸法进行药物敏感性试验、菌体16S rDNA序列鉴定、动物致病性试验、耐药基因检测。结果从羔羊粪便中分离出一株细菌,菌落形态和生化试验结果与大肠杆菌相符,药物敏感性试验显示对头孢噻肟、头孢他定耐药,对四环素、环丙沙星中介,对阿米卡星、庆大霉素、氨苄西林敏感。扩增的16S rDNA序列片段大小约1 500 bp,与GenBank对比显示和序列号为NC＿054923.1的大肠杆菌同源性高达99.15%,将细菌接种于小白鼠体内24 h全部死亡,并检测到该大肠杆菌携带EBC耐药基因。为齐齐哈尔市羊源致病性大肠杆菌的研究提供了一定的依据。     

羊源链球菌的分离鉴定及致病性研究

从洛阳偃师某羊场单纯性流产羊的胎儿与羊水中分离到一株球菌，通过动物试验、细菌的形态特性、培养特性、生化特性等进行检测，确定为羊链球菌。同时对该细菌的耐药性进行检测，该菌对头孢噻肟、头孢唑啉极敏感，可作为治疗该病的首选药。     

一株羊源海藻糖比伯斯坦菌的分离鉴定及生物学分析

海藻糖比伯斯坦菌(Bibersteinia trehalosi)为人兽共患菌,但在我国的研究报道转少。本研究从病死羔羊肺脏组织中分离到一株革兰阴性短杆菌,对其进行了细菌分离、生化试验、16S rDNA和ropB基因的PCR扩增、小鼠致病性试验、药敏试验及四环素抗生素类与产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)等6种耐药基因的PCR检测。结果显示,该菌16S rDNA扩增序列与GenBank中B.trehalosi同源性达99%;其特异性rpoB基因PCR扩增条带与预期一致;对小鼠致病性强;对头孢哌酮、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素等多种抗生素均敏感,对青霉素、丁胺卡那、头孢拉啶耐药,仅扩增出约1 900 bp的BCT耐药基因片段,与公布的BCT基因序列同源性达99%,耐药表型与耐药基因检测结果一致,证明该分离菌株为B.trehalosi。本研究为该菌的有效防控与致病机理的研究奠定了基础,也为养殖临床用药提供参考。     

云南羊源O78型大肠埃希氏菌的分离鉴定

巍山县某山羊养殖户,出生15 d内的羔羊出现共济失调等神经症状,死亡率高达85%。样品经阿卡班(AKA)、山羊病毒性关节炎-脑炎(CAE)、梅迪-威斯纳病(MV)、蓝舌病(BTV)real-time PCR及普通PCR检测均为阴性。样品(脑组织)划线接种于5%的绵羊血琼脂、营养琼脂及麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24 h。结果:在5%的绵羊血琼脂、营养琼脂平板上生长出直径2~3 mm、稍凸、圆形、湿润、灰白色、边缘整齐、不透明的菌落;在麦康凯琼脂平板上菌落呈粉红色。经革兰氏染色镜检、细菌生化鉴定为大肠埃希氏菌,血清型鉴定为O78型。昆明小白鼠致病性试验显示,致病性较强,实验组25只小白鼠接种后48 h内全部死亡,并从死亡小白鼠肝脏和心血内成功回收到该株细菌。     

羊源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

本实验室接收到一份来自山东省济南市莱芜区的黑山羊乳羔羊腹泻病例,通过细菌的分离鉴定和病原学检验,筛选出一株大肠杆菌分离株。PCR试验结果显示,该分离株对磺胺类、β-内酰胺类、四环素类等药物有相关耐药基因;药敏试验显示,抑菌圈直径较小,其耐药性强且与PCR检测结果相对应。结果提示,强耐药性大肠杆菌已在养羊业存在,从业人员和政府部门应当引起重视。     

羊源链球菌的分离鉴定及致病性研究

从洛阳偃师某羊场单纯性流产羊的胎儿与羊水中分离到一株球菌,通过动物试验、细茵的形态特性、培养特性、生化特性等进行检测,确定为羊链球菌.同时对该细茵的耐药性进行检测,该茵对头孢噻肟、头孢唑啉极敏感,可作为治疗该病的首选药.     

猪源性blaNDM-1阴性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

为了解美国进口种猪人畜共患性致病菌的携带情况,本研究采集种猪新鲜粪便样品,进行常见致病菌的分离。结果在120份样品中分离到1株普罗威登斯菌,命名为HBA13。通过不同选择性培养基、常规生化鉴定及16S rRNA基因序列同源性比对分析,鉴定HBA13为雷氏普罗威登斯菌（Providencia rettgeri）。鉴于雷氏普罗威登斯菌在细菌耐药性方面的重要意义,进行了NDM-1表型检测,并利用PCR方法进行blaNDM-1耐药基因的检测,结果表明所分离雷氏普罗威登斯菌blaNDM-1耐药基因为阴性。猪源性blaNDM-1阴性雷氏普罗威登斯菌的分离,为今后相关研究奠定了基础。     

一株产胶原蛋白酶沙雷氏菌的分离及鉴定

从土样和水样中分离具有明胶水解活性的细菌。经活性平板初筛、牛皮消化实验和活性测定表明,菌株Col-C对牛皮具有较强消化能力,对Ⅲ型胶原蛋白的水解活性为21.19 U/mL。经形态学观察、生理生化特性和16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescen)。该菌株所产胶原蛋白酶可用于饲用皮革蛋白粉的消化降解。     

宁夏地区羊源大肠埃希氏菌的分离鉴定及耐药性检测

为了解宁夏地区羊源大肠埃希氏菌的流行情况及对常用抗生素的耐药性,对采集于宁夏地区的108份病料进行大肠埃希氏菌的分离鉴定,采用微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对分离株的最小抑菌浓度(MIC).结果表明,在108份病料中共分离到58株大肠埃希氏菌,分离率达53.7％;分离菌株中耐药株共34株(58.6％),其中15株(4...