不同浓度β-巯基乙醇对6周龄杜泊羊卵母细胞发育能力的影响

为了探讨成熟液里不同浓度β-巯基乙醇对6周龄杜泊羊卵母细胞发育能力的影响,试验选择6只6周龄杜泊羊,采用促性腺激素诱导活体采集卵母细胞,将获得的A、B级卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在不同浓度(0、50、70、100μmol/L)β-巯基乙醇成熟液中成熟,再经成熟卵母细胞与获能精子共同孵育、受精卵发育培养后,统计卵裂率和囊胚率。结果表明:与对照组卵裂率(59.13%)和囊胚率(12.17%)相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的卵裂率(60.87%、63.48%、65.22%)和囊胚率(14.78%、17.39%、21.74%)均较高(P0.05),其大小顺序为试验Ⅲ组试验Ⅱ组试验Ⅰ组对照组,100μmol/Lβ-巯基乙醇组的卵裂率、囊胚率分别增加6.09个百分点和9.57个百分点。说明成熟液里添加一定量β-巯基乙醇能够提高6周龄杜泊羊卵母细胞的发育能力和受精卵质量,β-巯基乙醇浓度在100μmol/L以内,卵母细胞的卵裂率和囊胚率呈上升趋势;关于成熟液里β-巯基乙醇最佳浓度,有待进一步研究。     

不同浓度半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响

近年来,随着卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)以及细胞核移植技术的不断发展,牛胚胎的体外生产已经在几个不同的培养体系中获得了成功.但是,卵母细胞生长发育是一个非常复杂的过程,受多种因素的影响,有些因素的作用对于同种类动物的卵母细胞或体外/体内培养条件下的卵母细胞有着较大的差别.要找出各种动物卵母细胞体外培养的最佳方案以提高卵母细胞体外成熟率,尚有许多工作需要做.研究以延边黄牛卵母细胞为试验材料,试图探明不同浓度的半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,现报道如下.     

特陶寒三元杂种羊血液生理生化指标测定分析

无角陶赛特羊(Poll Dorset,简称D)具有生长发育快、易育肥、肌肉发育良好、瘦肉率高等特点,是新西兰用其生产反季节羊肉的专门化品种.特克塞尔羊(Texel,,简称T)具有肌肉发育良好、瘦肉多等特点,广泛用于生产肥羔的终端父本.而小尾寒羊(Small-tail Han Sheep,简称H)全年发情,性成熟早,母羊一年两胎或两年三胎,被引入到河西走廊用作生产肥羔的母本.     

不同浓度玻璃化冷冻液对牛未成熟卵母细胞发育能力的影响

旨在研究含不同浓度乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)的玻璃化冷冻液对牛未成熟卵母细胞冷冻后发育能力的影响。将卵丘卵母细胞复合体(COCs)置于不同配方的玻璃化冷冻液(VS1:10%EG+10%DMSO;VS2:20%EG+20%DMSO;VS3:25%EG+25%DMSO)中暴露30s或60s,体外成熟培养22h,以未在玻璃化冷冻液中暴露而直接体外成熟22h的COCs为对照组。结果表明,在VS3中暴露60s时,成熟率比对照组明显下降(P<0.01),其他组与对照组差异均不显著(P>0.05);在不同玻璃化冷冻液(VS1、VS2、VS3)中,采用开放式拉长细管(OPS)法冷冻COCs,解冻后再进行体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC)。结果表明,VS2组囊胚率(5.4%)最高,与VS3组(3.6%)差异不显著(P>0.05),VS1组没有获得囊胚。研究表明,含20%EG、20%DMSO的玻璃化冷冻液可以用于牛未成熟卵母细胞的冷冻,COCs在冷冻液中处理的时间应控制在30s内。     

不同浓度离子霉素对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响

试验探讨了不同浓度的离子霉素结合6-二甲氨基嘌呤激活猪体外成熟卵母细胞后对其孤雌发育的影响。体外成熟卵母细胞分别用10、15、20、25mol/L的离子霉素处理40min,再用2mmol/L的6-DMAP处理8h,各组的卵裂率分别是:(13.11±6.75)%,(22.31±14.18)%,(26.93±24.53)%和(26.72±19.75)%,囊胚率分别是2.26±1.03)%,(2.39±2.41)%,(3.32±3.95)%和(11.76±10.76)%,各组之间差异不显著(P>0.05)。结果表明:用10～25mol/L离子霉素和6-DMAP联合激活猪体外成熟卵母细胞,对其孤雌发育能力有一定影响,但效果不显著;猪卵母细胞采用离子霉素激活的最佳方案是用25mol/L处理40min,再用浓度为2mmol/L的6-DMAP处理8h。     

组织蛋白酶对羊卵母细胞发育能力影响的研究进展

组织蛋白酶(cathepsin,CTS)是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,包括组织蛋白酶B(CTSB)、组织蛋白酶S(CTSS)和组织蛋白酶C(CTSC)等,它们是一类主要存在于溶酶体中的细胞内肽键水解酶.对组织蛋白酶的研究可以追溯到上世纪上半叶,CTSC是第一个被纯化的蛋白酶.但之后的几十年相关研究发展缓慢,直至上世纪80年代,组织蛋白酶B、H、L才被鉴定并测序.     

低精子浓度下不同处理方式对小鼠卵母细胞体外受精及发育的影响

本试验探讨在低精子浓度(2.5×105个/mL)条件下,利用酸液完全去掉透明带、保留部分透明带及完全保留透明带这几种处理对小鼠卵母细胞体外受精及受精胚发育的影响.结果表明,完全去掉透明带的小鼠卵母细胞受精率(95％)极显著高于保留部分透明带(42％)及对透明带不做处理(30％)的方法(P＜0.01),但3种处理方法所获受精卵发育至囊胚能力没有差别.     

幼龄羊的周龄及卵母细胞体外培养体系对JIVET技术的影响

为了探讨周龄及卵母细胞体外培养体系对幼龄羊胚胎体外生产技术(JIVET)的影响,试验对10只5~10周龄杜寒杂种羔羊进行激素诱导,获取卵母细胞,分别在基础成熟液和含200μmol/L半胱氨酸的成熟液里成熟,再分别在含2%发情羊血清(ESS)的Ⅰ受精液和含3 mg/m L牛血清白蛋白(BSA)的Ⅱ受精液里受精,测定不同周龄羔羊的采卵数量、卵母细胞成熟率和卵裂率。结果表明:5,7,8,10周龄羔羊获得卵母细胞数分别为(111.00±16.97)枚/只、(139.50±28.99)枚/只、(108.50±17.68)枚/只、(42.00±11.31)枚/只,5,7,8周龄羔羊显著高于10周龄羔羊(P0.05),而5,7,8周龄羔羊之间差异不显著(P0.05);试验成熟液获得的卵母细胞成熟率比基础成熟液高3.64百分点;Ⅰ受精液获得的卵母细胞卵裂率极显著高于Ⅱ受精液(P0.01)。说明选择5~8周龄羔羊、卵母细胞体外成熟液添加一定量半胱氨酸和体外受精液含一定量ESS可以改善JIVET体系。     

不同浓度EGOG对山羊卵母细胞成熟受精的影响

将从屠宰场采回的山羊卵巢在3h内带回实验室,从卵泡中抽取卵母细胞,取外观形态正常的卵母细胞分成5组,分别添加0、10、15、20、25μmol／L浓度的EGCG经27h体外成熟培养后受精,探索不同浓度EGCG对山羊卵母细胞成熟和受精的影响。结果表明EGCG添加浓度为15μmol／L时对卵母细胞的成熟和受精都有明显的促进效果。     

不同浓度EGCG对山羊卵母细胞成熟受精的影响

将从屠宰场采回的山羊卵巢在3 h内带回实验室,从卵泡中抽取卵母细胞,取外观形态正常的卵母细胞分成5组,分别添加0、10、15、20、25 μmol/L浓度的EGCG经27 h体外成熟培养后受精,探索不同浓度EGCG对山羊卵母细胞成熟和受精的影响.结果表明EGCG添加浓度为15 μmol/L时对卵母细胞的成熟和受精都有明显的促进效果.     

卵母细胞去核方法及其对卵母细胞发育的影响

自1938年Spermann为研究不同发育时期细胞核的发育能力而提出的细胞核移植构想以来,核移植技术已经取得了极大的成就,特别是1997年由英国科学家Wilmut等经体细胞核移植克隆出绵羊"多莉"而带来的克隆风暴更是以迅猛之势席卷全球。     

不同因素对新疆多浪羊卵母细胞体外成熟的影响

为了探索多浪羊卵母细胞体外成熟的影响因素,提高体外受精率,为多浪羊繁殖潜能的发挥提供基础,试验以屠宰场多浪羊卵巢为材料,采用不同运输条件及不同卵母细胞收集方法,研究运输条件及采集方式对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:温度为25~30℃时卵母细胞成熟率(49.4%)与20~25℃(52.9%)相比差异不显著(P0.05),与30~38℃(23.2%)及4~10℃(35.7%)相比差异显著(P0.05)。保存时间1~2 h的成熟率(49.1%)与保存时间2~3 h的成熟率(50.3%)相比差异不显著(P0.05),保存时间6~8 h的成熟率(26.0%)显著低于保存时间1~2 h和2~3 h的成熟率(P0.05)。切割法收集的卵母细胞数及体外成熟率均显著高于抽吸法(P0.05)。卵巢在20~30℃条件下、1~3 h内运回畜牧科技重点实验室卵母细胞体外成熟率最高,而且切割法优于抽吸法。     

不同冷冻方法对牛卵泡卵母细胞发育潜力的影响

本试验探讨了不同方法冷冻保存的牛卵泡卵母细胞体外受精后的发育潜力。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞大多（79．1％）形态正常，但体外受精后的受精率（13．2％）和卵裂率（8．8％）均明显低于对照组（66．7％和46．0％），卵裂后继续发育的能力严重受损。在3种方法中，玻璃化冷冻效果最好，受精率分别达到15．0％和11．1％，是值得进一步研究的一种方法。     

半胱氨酸对猪卵母细胞体外发育潜力及谷胱甘肤水平的影响

探讨mTCM199中添加不同浓度的半胱氨酸对猪卵母细胞体外成熟及体外受精的影响,并研究了体外成熟过程中谷胱甘肽(GSH)浓度的变化.结果表明:0.10 mg/mL半胱氨酸可明显改善猪卵母细胞体外成熟和体外受精的效果(P<0.05),经测定,猪卵母细胞内GSH浓度随着半胱氨酸浓度提高与培养时间的延长而逐渐升高,且添加0.05 mg/mL和0.10 mg/mL半胱氨酸的猪卵母细胞培养48 h时可使GSH浓度达到最大值(P<0.05).因此,GSH的浓度可作为卵母细胞细胞质成熟度的一个特征性指标,且0.10 mg/mL半胱氨酸的猪卵母细胞成熟培养48 h的效果最好.     

不同冷冻方法对牛卵母细胞及孤雌胚发育的影响

研究了麦管和OPS管法冷冻以及OPS法中保护剂种类对牛卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果发现,OPS管冷冻牛卵母细胞形态正常率、卵裂率、囊胚率极显著高于麦管法(P<0.05)。在OPS法中,应用两种保护剂冷冻后,卵母细胞形态正常率、卵裂率、囊胚率差异极显著(P<0.01);采取38℃与25℃温度平衡,冷冻后卵母细胞各发育指标差异不显著(P>0.05);采用4℃平衡,冷冻后的卵母细胞激活后没有出现囊胚,各发育指标极显著降低(P<0.01)。结果表明,OPS法可以有效地保护卵母细胞,保证其后孤雌激活;采用低温平衡会对孤雌发育的囊胚阶段有较大影响。     

黄体期短期优饲对道寒杂交羊卵泡发育的影响

为研究母羊黄体期短期优饲对其卵泡发育的影响。选择60只道寒杂交羊随机分为试验组和对照组,每组30只。试验羊均先饲喂基础日粮(DE 11.72 MJ/d,DP 79.71 g/d),并对试验羊进行同期发情处理(肌注PG 0.1 mg,3 d后阴道埋置CIDR 12 d,撤栓再次肌注PG 0.1 mg),同期发情处理埋栓2 d后试验组羊饲喂试验日粮(DE 18.75 MJ/d,DP 108.44 g/d),饲喂期10 d,并于饲喂开始第1,2,4,6,8,10天分别采集试验组和对照组羊颈静脉血,测定血浆中葡萄糖,胰岛素,瘦素等含量。在撤栓注射PG后,埋栓第13,14,15天每组随机选择6只羊进行屠宰,采集卵巢,按小卵泡(≤3.0 mm)、中等卵泡(3.0～5.0 mm)和大卵泡(≥5.0 mm)进行卵泡数量统计及卵泡液、颗粒细胞收集。采用实时定量PCR技术,分析不同大小卵泡颗粒细胞中OB-R和IGF-1基因mRNA表达水平。结果显示,与对照组相比,试验组小卵泡数量显著下降(P<0.01),中等卵泡和大卵泡数量显著升高(P<0.01),同时血浆和大卵泡中葡萄糖(P<0.01)、胰岛素(P<0.01)和瘦素(P<0.05)的平均浓度均显著升高,中等卵泡和大卵泡颗粒细胞中OB-R和IGF-1基因的表达显著上升(P<0.05)。结果表明,母羊黄体期短期优饲可提高血浆中葡萄糖、胰岛素、瘦素浓度和颗粒细胞中OB-R和IGF-1基因表达量,促进卵泡期的卵泡优势化数量。     

不同营养水平对滩×寒杂种母羊繁殖性能的影响

为研究妊娠后期(97~150 d)、泌乳期(30 d)、催情期(断奶至第2个情期)0.8×NRC(Ⅰ)、0.9×NRC(Ⅱ)和1.0×NRC(Ⅲ)代谢能(metabolic energy,ME)与粗蛋白(crude protein,CP)水平对母羊繁殖性能的影响。将30只1~2胎的滩×寒杂种妊娠母羊随机分成3组(统计的母羊数依次为6,5和7只),单栏饲养。结果表明,1)Ⅰ组母羊产后体重(43.50±7.50 kg)低于Ⅱ(47.20±2.12 kg,P＞0.05)、Ⅲ组(54.79±6.72 kg,P＜0.05),Ⅱ组呈低于Ⅲ的趋势;Ⅲ组母羊自身日增重(137.4±59.8 g)极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(-57.7±39.9,34.2±56.2,P＜0.01),Ⅱ也显著高于Ⅰ组(P＜0.05)。各组羔羊初生重(3.82±0.76,3.86±0.58和4.10±0.77 kg)相近(P＞0.05);Ⅲ组的羔羊初生窝重(7.69±2.24 kg)高于(P=0.086)Ⅰ、Ⅱ组(5.73±1.34,5.40±1.65 kg),与其多羔率高有关。2)在泌乳期,母羊泌乳量(27.08±4.52,40.34±11.90,55.48±14.29 kg)、羔羊断奶窝重(13.49±3.82,14.62±3.64,19.32±4.45 kg)、窝增重(7.17±2.71,9.22±2.17,12.28±3.15 kg)、羔羊断奶均重(7.71±2.26,10.45±1.72,11.19±2.51 kg)和增重(4.10±1.60,6.59±1.38,7.08±2.09 kg)均随母羊营养水平而提高(P＜0.05或P＞0.05)。Ⅰ组母羊泌乳期增重,Ⅱ、Ⅲ组均减重(相应为+0.94±2.05,-0.35±2.74和-1.86±3.89 kg),但组间差异不显著(P＞0.05)。3)3组母羊授乳末体重分别为(46.31±7.61),(46.85±2.58)和(52.93±4.20) kg (P=0.067),断奶后第1次发情分别是在(18.60±12.86),(13.25±6.70)和(10.71±4.07) d,第2情期结束时的空怀率为16.67%,20.00%和14.29%。母羊2次产羔间隔相应为201.8,183.5和187.7 d。     

淫羊藿苷对小鼠卵泡卵母细胞体外发育与成熟的影响

用在体和离体试验研究淫羊藿苷对小鼠卵母细胞体外发育与成熟的影响。健康雌性小鼠分组灌服0.1、0.3、0.5和0.7 mg/d淫羊藿苷或2、6、10及14 mg/d淫羊藿水提液,并设生理盐水灌服对照组,取连续灌服7d和14d小鼠卵巢卵泡卵母细胞作体外成熟培养与体外受精,统计第一极体(pb I)排出率和受精率。在小鼠卵母细胞体外成熟培养液中按高(5μg/m L)、中(0.5μg/m L)、低(0.05μg/m L)剂量添加淫羊藿苷,经24 h成熟培养后进行体外受精,观察并记录卵母细胞pb I排出、受精和卵裂情况。结果表明,分别连续灌服淫羊藿苷和淫羊藿水提液后,各组小鼠卵母细胞细胞体外成熟率均有所提高,连续灌服7 d后,淫羊藿苷0.3、0.5和0.7 mg/d组小鼠卵母细胞受精率较对照组显著提高(P0.01);连续灌服14 d淫羊藿水提液6 mg/d组卵母细胞pb I排出率和受精率均显著高于对照组(P0.05)。添加淫羊藿苷低剂量组小鼠卵母细胞体外受精率和卵裂率显著高于对照组(P0.05);pb I排出率虽高于对照组,但无显著差异。本试验表明,连续灌服淫羊藿苷7 d对小鼠卵母细胞体外发育与成熟具有明显的促进作用;体外培养液中添加低剂量淫羊藿苷对小鼠卵母细胞体外成熟和受精具有促进作用,但高剂量反而有抑制作用。     

不同冷冻和解冻方法对绵羊卵母细胞发育效果的影响

卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值.试验主要分析了不同冷冻及解冻方法对绵羊GV期和MII卵母细胞发育效果的影响.GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率(54.8%)以及体外培养成熟率(14.7%)均显著低于细管玻璃化(71.8%,29.5%;P＜0.05)和OPS玻璃化(78.3%、35.4%;P＜0.05),卵裂率OPS玻璃化高于细管玻璃化,但差异不显著(26.1%,16.7%;P＞0.05);MII期卵母细胞形态正常率程序化冷冻显著低于细管玻璃化和OPS玻璃化冷冻(67.2%,77.6%,84.8%;P＜0.05),卵裂率OPS玻璃化显著高于程序化冷冻法(31.3%,10.3%;P＜0.05);3种不同方法冷冻不同发育时期卵母细胞成熟率和卵裂率与对照组相比较均差异极显著(P＜0.01).解冻后卵母细胞形态正常率三步与五步解冻法极显著高于一步解冻法(85.9%,82.7%,63.1%; P＜0.01);成熟率为三步法和五步法显著高于一步法(10.8%,26.9%,25.3%;P＜0.05);卵裂率三步法和五步法高于一步法,但没有差异显著性(14.3%,23.9%,21.1%; P＞0.05).     

不同冷冻方法对GV期绵羊卵母细胞发育效果的影响

卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值。文章主要分析了不同冷冻方法对绵羊GV期卵母细胞发育效果的影响。GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率（54.8%）和体外培养成熟率（14.7%）均显著或极显著低于细管玻璃化冷冻（71.8%,29.5%;P〈0.05）和OPS玻璃化冷冻（78.3%,P〈0.01;35.4%,P〈0.05）;3种不同方法冷冻GV期卵母细胞成熟率与对照组相比均差异极显著（P〈0.01）。