奶牛乳房炎早期诊断试剂盒的制备及稳定性评价

本研究结合奶牛乳汁中体细胞裂解技术和DNA染色技术,制备出奶牛乳房炎早期诊断试剂盒。通过4℃和常温条件下的长期试验,检测其保质期;通过批内和批间检测结果评价其稳定性。结果显示,该试剂盒5min即可作出判断,且判定结果与已知样品一致;4℃和常温下均可保质一年以上;批内和批间检测结果一致。该试剂盒具有准确、保质期长、稳定性好等优点。     

奶牛乳房炎早期诊断试剂盒应用效果试验

用显微镜体细胞计数、隐性乳房炎诊断液、乳房炎早期诊断试剂盒对318 头无乳房炎临床症状产奶奶牛进行乳房炎检测,并对其进行分析。结果发现,显微镜体细胞计数法检出乳房炎发病率36.79%,隐性乳房炎诊断液检出乳房炎发病率31.45%,乳房炎早期诊断试剂盒检出乳房炎发病率35.22%,隐性乳房炎诊断液法检测准确率为94.65%,而早期诊断试剂盒检测准确率为98.43%。乳房炎早期诊断试剂盒比隐性乳房炎诊断液诊断准确率高3.78 个百分点,更趋近于显微镜体细胞计数法的检测结果。     

孕酮ELISA试剂盒在牛奶乳汁检测中的初步应用

本实验利用自建的奶牛乳汁孕酮竞争ELISA法(酶标抗原法)研发了奶牛乳汁孕酮ELISA试剂盒。通过对试剂盒的特异性、灵敏性、重复性、稳定性和回收率等主要性能进行优化试验。结果表明:试剂盒可以在4℃条件下保存9个月,与睾酮、雌三醇、雌二醇无特异性反应,灵敏度为0.14 ng/mL,批内差异为4.11%,批间差异为6.26%,回收率为93.80%~107.60%,变异系数为5.65%。应用该试剂盒检测乳汁孕酮诊断奶牛妊娠与未妊娠的准确率分别为93.3%和95.8%。因此,该试剂盒性能良好,妊娠诊断效果理想,为今后在奶牛生产中的广泛应用奠定基础。     

奶牛乳房炎乳中结合珠蛋白含量的夹心ELISA检测方法研究

为准确检测奶牛乳房炎乳中结合珠蛋白(Hp)含量,本研究采用牛血红蛋白(Hb)包被酶标板捕获乳清中Hp,利用特异性抗血清和酶标抗体建立夹心ELISA方法,并对建立的方法进行优化,用于检测牛奶中Hp含量.结果表明,ELISA方法检测下限为0.08μg/mL,与其他几种常见乳房炎乳中急性期蛋白质无交叉反应,批内试验和批间试验变异系数分别为3.27%～4.98%和5.46%～8.31%.应用本实验建立的夹心ELISA方法和商品化试剂盒分别检测50份已知患乳房炎牛乳清中Hp含量,同时对检测结果做相关性分析.结果表明,夹心ELSIA方法与商品化试剂盒具有很好的相关性(R2=0.996 2),同时验证了乳清中体细胞数与Hp含量呈正相关.夹心ELISA方法可准确测定牛奶中Hp含量,并可为奶牛乳房炎的诊断提供一种简易有效的辅助手段.     

奶牛乳房炎主要致病菌16S rDNA基因芯片检测方法的建立

本研究建立了快速检测奶牛乳房炎主要致病茵的基因芯片方法,试验以奶牛乳房炎4种主要致病菌的16SrDNA基因作为基因芯片检测的靶片段,设计和筛选通用性引物和特异性探针,对通用引物进行荧光标记、PCR扩增、芯片杂交和信号扫描分析,根据杂交信号强度和聚类分析结果,判定奶牛乳房炎感染的致病菌种类。实验结果显示：以16SrDNA为靶基因检测奶牛乳房炎主要致病菌（无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、奇异变形杆菌、金黄色葡萄球菌）的基因芯片方法,可以快速、特异、准确地对这4种试验菌株进行检测和鉴定。该检测方法的建立将为流行病学调查、食品卫生监督、乳房炎的防控等提供快速、有效的检测方法,具有良好的市场应用前景。     

检测鸡肉中甲羟孕酮酶联免疫试剂盒的研制

试验旨在利用酶联免疫技术研制一种快速检测鸡肉中甲羟孕酮的试剂盒。经测试,该试剂盒对鸡肉样本的检测限为1 μg/kg,批内、批间相对标准偏差均小于10%;稳定性测试结果表明,试剂盒能在4℃保存12个月;交叉反应率结果表明,单克隆抗体特异性良好。该试剂盒的操作时间仅需45 min,适合现场大量样本的快速检测。     

奶牛乳房炎检测报告

奶牛乳房炎按照临床表现可分为显性乳房炎（临床型乳房炎）和隐性乳房炎，是奶牛常见病之一，被人们认为是较难控制和消除的疾病。奶牛一旦发生乳房炎，可直接影响奶牛的产奶量和鲜奶质量，从而导致养殖效益的下降。为了了解奶牛乳房炎的发生发展情况，以指导奶业生产，我们分别在1999年、2001年、2003年和2005年．对奶牛乳房炎进行了4次抽查检测，其检测结果报告如下：     

奶牛乳房炎检测报告

奶牛乳房炎按照临床表现可分为显性乳房炎（临床型乳房炎）和隐性乳房炎，是奶牛常见病之一．被人们认为是较难控制和消除的疾病。奶牛一旦发生乳房炎，可直接影响奶牛的产奶量和鲜奶质量．从而导致养殖效益的下降。为了了解奶牛乳房炎的发生发展情况，以指导奶业生产，我们分别在1999年、2001年、2003年和2005年，对奶牛乳房炎进行了4次抽查检测，其检测结果报告如下：     

甘肃省临泽县奶牛隐性乳房炎发病情况调查与分析

该研究旨在初步了解甘肃省临泽县奶牛隐性乳房炎发病情况及特点,为该地区奶牛隐性乳房炎防治提供依据。利用LMT法对该地区6家奶牛场共240头奶牛乳汁样品进行检测。结果显示,被检测的240份奶牛乳汁样品中118份为隐性奶牛乳房炎,平均检出率49.17%,其中1~2胎、3~4胎和5胎及以上奶牛检出率分别为27.08%、42.31%和69.32%,奶牛隐性乳房炎检出率与其胎次明显呈正相关;此外,其检出率与奶牛日均产奶量呈负相关,其中日均产奶量低于21、21~23和23 kg以上的奶牛隐性乳房炎检出率分别为70.52%、40.82%和23.40%。说明临泽县奶牛隐性乳房炎发病率较为严重,养殖场(户)需要提高对该病的防控意识。     

PCR诊断技术用于奶牛乳房炎病原菌快速检测的研究进展

奶牛乳房炎是一种严重影响奶牛业发展的常见多发病,不仅给乳品业造成巨大的经济损失,而且还影响乳品质量,危及人类健康。目前,对于奶牛乳房炎的治疗大部分奶牛场基本都是在不明确病原菌的情况下滥用抗生素,造成病原菌耐药性增加,治疗效果下降。为了有效治疗奶牛乳房炎,对奶牛乳房炎病原菌的早期快速诊断至关重要。由于传统的乳房炎病原菌的检测方法存在操作繁琐、耗时长、灵敏度低及无法检测抗生素乳样中病原菌等缺陷,因此,临床上急需一种快速、灵敏、简便的检测方法。作者对目前用于奶牛乳房炎病原菌诊断的普通PCR法、多重PCR法、实时荧光定量PCR法、巢氏PCR诊断法以及PCR检测试剂盒等进行了综述,并分析了这些方法的优缺点,同时对未来奶牛乳房炎病原菌诊断的研究方向和前景进行了展望,以期为进一步开发快速、特异、敏感的奶牛乳房炎病原菌诊断技术提供理论参考。     

北京南部地区奶牛乳房炎流行病学调查

为了解北京南部地区奶牛乳房炎的流行情况,对北京市某区及河北省保定地区4个奶牛养殖场的1248头泌乳奶牛的4992个乳区进行了调查检测。结果表明,该地区临床型乳房炎发病率为10.90%,隐性乳房炎发病率为43.7%;随着胎次升高,临床型乳房炎和隐性乳房炎的发病率均呈上升趋势,第4胎次之后奶牛临床乳房炎和隐性乳房炎与之前胎次的差异显著(P<0.05);第三季(7~9月)发病率最高,与其他季节的差异显著(P<0.05)。     

天津地区奶牛乳房炎调查及阳性乳中真菌的分离鉴定

用兰州奶牛乳房检测试剂(LMT)和临床检查对天津市4个区县奶牛场的奶牛进行了乳房炎检测.共检测奶牛乳房炎阳性奶样181头份,其中临床型乳房炎奶样125头份,隐性型乳房炎奶样56头份,然后对阳性样品进行真菌的分离和鉴定.结果共分离到酵母样真菌46株,分离率为25.4%;天津地区奶牛真茼性乳房炎主要为新型隐球菌、白色念珠菌...     

乳酶LDH作为奶牛隐性乳房炎早期诊断指标的研究

为了筛选敏感的奶牛隐性乳房炎早期诊断指标,选择220头荷斯坦泌乳奶牛,分别采集乳汁进行体细胞计数和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定.结果显示,隐性乳房炎奶牛乳汁中LDH活性显著高于健康奶牛(P＜0.05),乳汁体细胞数(SCC)与LDH活性呈正相关(r2=0.93).选择LDH活性>100 IU/L作为隐性乳房炎的判定阈值,诊断的敏感性为70%,特异性为82.3%,Jouden指数为0.52.结果提示,LDH可作为奶牛隐性乳房炎早期诊断指标.     

奶牛急性乳房炎病原菌的分离与鉴定

[目的]为了掌握奶牛急性乳房炎致病菌的种类.[方法]通过采集病牛乳汁样品3份,分别对其病原茵进行分离与鉴定.检测[结果]表明:检出4种共13株细菌,其中致病性金黄色葡萄球菌6株;停乳链球菌5株;大肠埃希茵1株,乳房链球茵1株.[结论]该场奶牛的急性乳房炎是由致病性金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、乳房链球菌和大肠杆菌共同引起...     

乳房炎对奶牛繁殖性能的影响

乳房炎是奶牛产后乳腺组织发生的病变,是奶牛产后最常见的疾病之一,可分为临床乳房炎和亚临床乳房炎。乳房炎不仅严重影响奶牛泌乳性能,增加泌乳奶牛被动淘汰率,而且也对奶牛繁殖性能产生不利的影响。研究表明,奶牛产后泌乳期配种前和（或）妊娠期间患乳房炎可降低人工授精受胎率、增加早期胚胎死亡（妊娠损失）和流产率、增加空怀天数和产犊间隔,从而影响奶牛养殖经济效益。乳房炎主要是通过影响奶牛生殖内分泌、体液免疫和发热等途径影响母牛卵巢机能、子宫机能和子宫内环境,从而影响母牛发情周期和发情表现、胚胎和胎儿发育而影响奶牛繁殖性能。本文综述了乳房炎对奶牛繁殖性能影响及其机制的研究最新进展,以期为提高我国奶牛繁殖性能提供参考。     

遂平县奶牛隐性乳房炎发病情况调查

为了弄清遂平县奶牛隐形乳房炎发病情况,应用LMT法对遂平县4个奶牛场共283头奶牛乳液进行检测。结果显示:4个奶牛场奶牛隐形乳房炎发病率分别为60.46%、65.38%、51.61%和45.22%,平均发病率为56.54%;奶牛隐形乳房炎发病率随着胎次和年龄增加而升高,具有正相关性。结果表明该地区奶牛隐性乳房炎发病情况较为严重,需要引起养殖户的重视。     

遂平县奶牛隐性乳房炎发病情况的调查

为了弄清遂平县奶牛隐形乳房炎发病情况,应用LMT法对遂平县4个奶牛场共283头奶牛乳液进行检测。结果显示:4个奶牛场奶牛隐形乳房炎发病率分别为60.46%、65.38%、51.61%和45.22%,平均发病率为56.54%;奶牛隐形乳房炎发病率随着胎次和年龄增加而升高,具有正相关性。结果表明该地区奶牛隐性乳房炎发病情况较为严重,需要引起养殖户的重视。     

新疆库尔勒市某奶牛场奶牛隐性乳房炎情况调查

为了检测和调查新疆库尔勒市某奶牛场泌乳奶牛乳房炎的发病率,对该奶牛场养殖的32头泌乳期奶牛用凝乳法进行了隐性乳房炎检测。结果表明,隐性乳房炎奶牛阳性率为40.63%,且乳房炎阳性率随奶牛使用年限的增加而增加;用挤奶机器挤奶的奶牛乳房炎阳性率高于手工挤奶,后乳区的乳房炎阳性率高于前乳区。     

会宁县奶牛乳房炎发病情况调研

正奶牛乳房炎是影响奶牛业发展最严重的疾病,发病率高,危害严重。为了深入了解全县奶牛乳房炎发病现状,分析问题,总结经验,为促进全县奶牛产业健康发展建言献策,2015年全年,县畜牧兽医局组织专业技术人员,先后深入太平店、会师镇等9个乡镇的10个养殖场(户),进行了奶牛乳房炎发病情况调研,现将调研结果总结如下。1调研目的1.1早期发现和治疗奶牛乳房炎,能够在较短时间内了解奶牛乳房炎的流行概况,对调查中发现的病例可以早治疗,促进其痊愈,减少经济损失;对奶牛乳房炎早发现、早治疗,是减少发病率、病     

大肠杆菌性乳房炎奶牛血浆的比较蛋白质组研究

大肠杆菌是奶牛乳房炎的主要病原微生物之一,为了分析大肠杆菌性乳房炎奶牛血浆蛋白的表达变化,探索其防御机制。通过乳汁微生物培养的方法选择仅由大肠杆菌自然感染的隐性乳房炎奶牛。采用二维凝胶电泳技术分离大肠杆菌性乳房炎奶牛和临床健康奶牛的血浆蛋白和ProteoMiner试剂盒富集的中低丰度蛋白,凝胶用考马斯亮蓝G-250染色后,用图像分析软件检测血浆表达的差异蛋白点并用液质联用质谱鉴定。结果发现,大肠杆菌性乳房炎奶牛血浆中有19个蛋白点的表达量发生改变,其中15个蛋白点鉴定为7种蛋白质。在大肠杆菌性乳房炎奶牛血浆中结合珠蛋白、α1酸性糖蛋白和血清淀粉样蛋白A等蛋白的表达量增加。并用ELISA法测定血浆结合珠蛋白的结果也发现,大肠杆菌性乳房炎奶牛血浆结合珠蛋白水平显著高于健康牛(P0.01)。表明大肠杆菌感染造成了奶牛血浆蛋白的表达发生了变化,对这些表达变化蛋白的解析有利于探索机体的防御机制,同时为疾病的诊断和治疗提供科学依据。