羊肚菌组织分离物交配型基因缺失现象分析

对采集自不同地区的21份羊肚菌标本,包括3个梯棱羊肚菌(Morchella importuna)、5个七妹羊肚菌(M.eximia)、10个六妹羊肚菌(M.sextelata)栽培出菇的子囊果,以及3个野生高羊肚菌(M.elata)的子囊果进行多批次组织分离,共计获得348份分离物。对这些分离物的交配型基因检测结果显示:Mat1-1-1和Mat1-2-1两种交配型基因的检出率近似(Mat1-1-1∶Mat1-2-1=267∶278),其中153份(43.96%)分离物只检测到一种交配型基因,每种交配型基因缺失的概率相近,83份缺失交配型基因Mat1-1-1,占23.85%,70份缺失交配型基因Mat1-2-1,占20.11%。七妹羊肚菌19-37和19-43的分离物仅检测到交配型基因Mat1-2-1,而七妹羊肚菌19-44的分离物只检测到交配型基因Mat1-1-1。初步分析组织分离物的培养性状与交配型基因缺失的关联性,发现组织块萌发较慢、气生菌丝稀疏的分离物其交配型基因缺失的概率远高于萌发较快、菌丝浓密的分离物。     

黑色支系羊肚菌高产菌株选育

以前期人工驯化出的耐高温羊肚菌菌株M840和高产菌株M40为亲本,在单孢分离进行基因测序后确定2种不同交配型菌丝进行单孢杂交,进行羊肚菌高产菌株的选育,以期为羊肚菌优良菌株选育提供参考依据。结果表明:经过出菇验证、遗传稳定性分析验证、农艺性状优良子实体分离、二代栽培出菇验证,最后获得了产量稳定且高产菌株Z5。     

野生羊肚菌资源收集与菌株筛选技术研究

为发掘适合陕北风沙区栽培的野生羊肚菌资源,确定最佳菌种分离方法及培养配方,探索出适合当地推广的优质菌株,从种质资源收集鉴定、菌种分离纯化、培养基筛选、大田试种与推广几个方面进行了试验研究。结果表明,来自不同地方的26个菌株主要包括梯棱羊肚菌7株、六妹羊肚菌5株、七妹羊肚菌4株。以菌盖部位进行的组织分离,菌核密集且含有MAT1-1-1和MAT1-2-1两种交配型基因;以孢子分离获得的菌丝长势强、菌核密集且含有2种交配型基因。5种培养基中以配方M2最佳,菌丝健壮浓密、长势强且整齐。经过初选和复选获得6个优选菌株,在试验生产示范和大面积推广栽培中驯化选育出的6个菌株均表现出较好的稳定性和抗病性,平均产量均超过200 kg·667^-1m^-2。其中,以采自四川绵阳的七妹羊肚菌菌株NK-2平均产量最高,达到292 kg·667^-1m^-2。     

固体基质中羊肚菌菌丝生物量的ELISA双抗体夹心检测法

为考察羊肚菌(Morchella esculenta)在固体培养基质中菌丝生物量,以液体培养的纯菌丝为标准,用抗羊肚菌菌丝抗原的鼠源单克隆抗体(C6A8)及兔源多抗(TM02)建立了羊肚菌菌丝生物量的酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心检测法.该方法检测羊肚菌菌丝生物量的线性范围为2.58×102～6.6×104 mg/L,线性回归方程为y=0.0949X-0.0338,R2=0.9943;不同抗原浓度实验反应证明方法具有很好的重现性;这个方法用于黑脉羊肚菌(M.angusticeps)、尖顶羊肚菌(M.conica)、宽圆羊肚菌(M.rotunda)、金针菇(Flammulina velutipes)、黑木耳(Auricularia auricula)、金顶侧耳(Pleurotus citrinopileatus)的反应结果显示方法对羊肚菌属的供试菌株具有很好的特异性,其它种类的供试菌株不能引发特异的免疫反应.按照方法检测野生羊肚菌(M.esculenta)子实体周围土样,结果土壤基质中羊肚菌菌丝含量为0.75 mg/g.     

自制羊肚菌菌种实现大田生产的经验

羊肚菌栽培具有高投入、高风险、高效益特点,其菌种必须含有两种交配型基因才能出菇,普通羊肚菌菌种分离技术均有可能缺失交配型基因,而科研院所可以通过PCR技术检测菌种后用于生产,导致羊肚菌菌种市场价高并趋于垄断.可以自行制作羊肚菌菌种,利用冷库进行出菇效果对比试验,筛选出菌种用于大田栽培.通过3年生产实践,方法可行,具有推...     

中国北方地区羊肚菌暖棚人工栽培实践

在中国北方大同、朔州、晋中等地,利用暖棚设施进行羊肚菌人工栽培实践.从暖棚设施、菌种制备、整地播种、栽培管理、病虫害防护、采收等环节总结并分析暖棚栽培羊肚菌的主要技术措施和要点,为北方地区羊肚菌人工栽培和推广提供参考.     

一株野生羊肚菌的分离鉴定及原种培养基的筛选

对野外茅草林下采集到的一株野生羊肚菌(菌株命名为Y1)进行分离纯化,通过经典分类方法结合分子生物学方法进行品种鉴定,并基于菌丝生长速度、菌丝密度及菌核数量从9种不同培养基配方中筛选最佳原种培养基。结果为:Y1的子实体菌盖呈黄色,上有凹凸不平的网格,菌柄呈白色、中空,形似羊肚菌;在显微镜下观察,菌丝体呈黄色,菌丝粗壮,菌丝结构明显,与羊肚菌属形态特征相似;ITS序列比对显示Y1与羊肚菌属中的黄色羊肚菌类群同源性高达99%,初步鉴定该野生菌株为羊肚菌Mes-19;筛选出的最优原种培养基配方为麦粒75%、土壤23%、石灰1%、过磷酸钙1%。     

羊肚菌菌丝间融合与不融合现象研究

用平板、空试管、断培养基等方法培养羊肚菌菌丝,在显微镜下原位直接观察菌丝间的融合和非融合现象。观察六妹羊肚菌Morchella sextelata、梯棱羊肚菌M. importuna、七妹羊肚菌M. septimelata、Mel-21和秋天羊肚菌M. galilaea、Mes-16、Mes-19、Mes-20、Mes-21等9个物种,共100多个菌株菌丝间2 000多个接触点;并历经6年时间,用300多个菌株在国内外100多个地点超过500公顷面积进行出菇试验。结果发现:同一单孢菌株的菌丝分枝间有少量部位的可自体融合,融合点不产生新的分枝菌丝;同一物种的不同单孢菌株间菌丝不融合,同一物种的多孢菌株培养物内部相互不融合;不同物种间的菌丝都不融合;不融合的菌丝接触点出现Ⅱ型、X型、Y型、T型、π型等状况交叉而过,细胞接触而不融合;未见菌丝间的有性融合;菌丝接触后出现死亡、缠绕、卷曲、打结、膨大等现象;羊肚菌菌丝体纯培养物可以形成分生孢子和菌核。出菇试验结果表明,腐生型羊肚菌物种的出菇率,超过200个单孢菌株100%,超过100个多孢菌株100%,超过50个纯组织分离物小于50%,超过30个组孢混合菌株小于50%;出菇菌株在形态和产量有显著差异。共生型羊肚菌的菌种都不出菇。能出菇的同一物种的多孢菌株出菇后表现出子实体形态多样性,不同物种混合播种后出菇的子实体为原来物种的形态特征。结论:羊肚菌单孢培养物菌丝间不发生有性融合,单个孢子自身可孕,完全能够单孢出菇。     

娄烦、襄汾野生羊肚菌比较分析

为了调查山西省野生羊肚菌资源及其生境,对山西省娄烦县和襄汾县两处野生羊肚菌资源进行了生境和子实体分析比较,并且测定了子实体、土壤和地上覆盖物的养分含量。结果表明,两处羊肚菌的生境相似,土壤pH为中性偏碱或弱碱性,适宜羊肚菌的发生,其子实体均富含氮、磷、钾、铁、钙等元素;两处羊肚菌的子实体形态不同,可能与地上覆盖物的养分和土壤的理化性质有关;此外,还发现襄汾羊肚菌会产生大量孢子,为下一步利用孢子培养单孢菌丝、制备羊肚菌菌种提供了方向。     

木耳孢子单核菌株培养性状多态性研究

研究了38个木耳孢子单核菌株的菌丝生长势、菌丝生长速度多态性与其交配型的关系。结果表明，供试的木耳孢子单核菌株在菌丝生长速度和菌丝生长势等培养性状方面出现了一定程度的多态性。在测定的38个孢子单核菌株中，交配型A有21个菌株，交配型a有17个菌株，A：a=21：17。经X^2检验，两种交配型未出现1：1严重偏离。这表明，木耳孢子单核菌株的菌丝生长势和菌丝生长速度与其交配型无明显相关性。     

ELISA鉴别条件下的野生羊肚菌菌种分离方法

为了提高分离的羊肚菌菌种的可靠性,在传统菌种分离的基础上,增加了酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴别检验。对采自于吉林省吉林市的野生羊肚菌发生地的羊肚菌土壤基质及子实体分别进行了菌种分离,对分离得到的3株疑似羊肚菌的菌株进行了间接酶联免疫吸附法(间接ELISA)免疫学方法检测,确定其中的2株纯培养菌丝为羊肚菌菌种。     

羊肚菌属真菌菌丝及菌核多态性研究进展

羊肚菌菌丝和菌核的形成及形态变化多样,了解掌握在不同营养栽培条件下的多态性规律是羊肚菌研究中的难题,对菌丝、菌核微观和宏观形态变化进行综述,并对菌丝、菌核优劣培养条件进行比较分析,为攻克菌核、菌丝多态性在羊肚菌研究中产生的难题及实现羊肚菌人工商业化生产,提供数据及借鉴。     

梯棱羊肚菌菌丝培养条件研究及观察分析

在不同培养基上梯棱羊肚菌菌丝体在形态、颜色及生长状况方面差异较大,其中木屑培养基对梯棱羊肚菌生长最有利,是比较理想的梯棱羊肚菌菌丝培养基.将梯棱羊肚菌菌丝进行染色显微观察,发现不同浓度梯度的染料影响观察效果.研究表明,梯棱羊肚菌菌丝最合适观察的染色浓度为5μg/mL.     

羊肚菌生物学特性的初步研究

初步试验了 6种碳源、6种氮源培养基对羊肚菌菌丝生长的影响以及在 5种不同温度、pH值、光照单因子条件下羊肚菌菌丝生长状况。结果表明 ,最好的碳源是蔗糖和白糖 ,最好的氮源是硝酸钾和尿素。羊肚菌菌丝生长的适宜温度为2 0～ 2 5℃ ,适宜pH6～ 8,光对羊肚菌菌丝生长可能有一定抑制作用。     

羊肚菌单孢菌株的性亲和与营养体亲和特性

以人工栽培梯棱羊肚菌(Morchella importuna)子囊果YAASMYPL6和六妹羊肚菌(M.sextelata)子囊果YAASMJN5,野生梯棱羊肚菌子囊果Zhao0001和黄色羊肚菌(Mes-19)子囊果YAASM43为材料,采用毛细管单孢分离法分离其子囊孢子获得单孢菌株,并通过基于交配型基因的分子标记方...     

木醋液对羊肚菌液体培养菌丝生长的影响

羊肚菌液体培养基中添加一定量的木醋液,观察其对羊肚菌菌丝生长的影响。结果表明:当木醋液浓度为0.2%时,羊肚菌菌丝萌发速度较快,菌丝球及菌丝密度较大,且培养第8天时菌丝生物量大于其他处理组,比对照提高13.1%,因此0.2%为试验最适宜木醋液添加浓度。     

不同氮源对羊肚菌菌丝生长的影响

为了获得野生羊肚菌(Morchella spp.)资源,并探讨其菌丝生长的最适氮源,本试验以羊肚菌属QYY、XF、 FS菌株为供试菌株,以菌丝长势、密度、均匀度、菌丝生长速率和菌丝生长指数为指标,考察6种氮源对3个羊肚菌菌株菌丝生长的影响。结果表明,除尿素外,羊肚菌3个菌株均能够很好地利用其他5种氮源,不同产地的羊肚菌菌株对氮源的利用各不相同,羊肚菌菌株QYY、 XF、 FS的最适氮源分别为硝酸钾、硝酸铵、硝酸钾,菌丝生长速率分别为4.56 mm·d~(-1)、 9.92 mm·d~(-1)、 6.63 mm·d~(-1),菌丝生长指数分别为22.83、 49.58、 26.50。     

葡萄园仿生栽培羊肚菌技术

正目前福建省宁德市葡萄种植面积已达到0.35万km~2,葡萄园仿生栽培羊肚菌,充分利用葡萄种植园冬春空闲时间,实现用地与养地相结合,促进农业生态良性循环。如何合理利用冬春空闲葡萄种植园已成为研究的热点。现将葡萄园栽培羊肚菌技术总结如下。1羊肚菌生长环境条件1.1温度羊肚菌属低温高湿型真菌,羊肚菌菌丝生长最     

不同农作物秸秆人工栽培羊肚菌试验

选用了水稻秸秆、小麦秸秆、大豆秸秆、玉米秸秆、花生藤、棉花杆、甘蔗渣7种农作物秸秆作为培养基人工栽培羊肚菌。结果表明:小麦草粉上羊肚菌菌丝生长最快,菌丝浓密,大豆杆粉上羊肚菌子实体形成最早,生物转化率最高。     

尖顶羊肚菌母种培养基的筛选

探讨了2种尖顶羊肚菌菌株在5种培养基中的生长情况。结果表明:尖顶羊肚菌M-1、M-2菌株采用胡萝卜黄豆粉培养基,菌丝生长最快,菌丝干重最高。