光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达

为了进一步探讨光照对母鸡生产性能的影响机制,用c-fos法研究了不同日龄母鸡脑部对光照刺激的反应。对14、60、120和180日龄母鸡右眼遮光7 d后,接受20 lx的光照刺激1.5 h,暗适应1.5 h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化方法检测c-fos基因在中脑和间脑的表达。结果显示,光照刺激后在母鸡视顶盖中央灰质层(SGC),圆核(ROT),外侧膝状腹侧核(Glv),峡核大细胞部(Imc),峡核小细胞部(Ipc),室旁核(PVN),弓状核(ARC)均见有Fos样免疫反应阳性神经元,阳性神经元主要出现在脑左侧。不同日龄母鸡中脑和间脑Fos样免疫反应的程度不同。在SGC,ROT,Glv,Imc,Ipc中,14,60日龄免疫反应阳性神经元的密度最大,120,180日龄保持较高水平,300日龄明显下降。在PVN,ARC,120,180日龄表达强度最大,14,60日龄次之,300日龄最低。其中在14和60日龄与其它3个日龄组之间差异显著。表明在中枢神经内,不同日龄母鸡对光照刺激的反应不同。     

光照刺激对母鸡间脑c-fos基因表达的影响

为了解光照对鸡产蛋的影响机理,探讨了间脑内光信息传导通路。将60日龄母鸡右眼遮光7 d后接受20 lx的光照刺激1.5 h,暗适应1.5 h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,通过免疫组化方法检测c-fos基因在间脑的表达。结果显示,间脑内有大量Fos样免疫反应阳性神经元,主要见于左侧,分布于圆核(ROT)、室旁核(PVN)和缰核(HB)等核团内,其中ROT和PVN内最多,表明这些核团的神经元在光信息传递中起重要作用。     

不同强度光照对母鸡离顶盖通路c-fos基因表达的影响

为进一步探究光照对母鸡生产性能影响的神经调节机制,采用神经标记和免疫组化技术相结合的方法,对不同强度光照对母鸡离顶盖通路c-fos基因表达的影响进行了观察研究.将120日龄母鸡右眼遮光5d后向丘脑圆核引入微量30%HRP,48 h后解除遮光并给予不同强度的光照刺激1～1.5 h,暗适应1.5h后灌流固定,取脑制作连续冰...     

不同波长光照对开产初期母鸡间脑c-fos基因表达的影响

为深入了解不同波长光照对母鸡生产性能的影响机理,用c-Fos法探讨了母鸡间脑对不同波长光照的反应,同时检测GnRH免疫反应神经元的动态变化。将150日龄母鸡右眼遮光7 d后接受20 lx的不同波长光照刺激1.5 h,暗适应1.5 h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化方法检测Fos蛋白和GnRH样免疫反应阳性神经元在间脑的分布。结果显示,不同波长光照均影响c-fos基因表达和GnRH的释放,绿光组和蓝光组的表达均高于红光组。     

c-fos基因在内脏高敏感大鼠中的表达

研究检测c-fos在在肠易激综合征中的表达,探索肠易激综合征内脏感觉过敏的神经机制。用经新生期母婴分离方法建立内脏感觉过敏大鼠模型,成年后(出生后60 d)给予结直肠球囊扩张(colorectal distension,CRD),用免疫组化方法检测脑干中缝背核、脊髓腰骶节段背角c-fos蛋白的表达量。结果表明:母婴分离组CRD后中缝背核和脊髓背角c-fos疫反应阳性细胞的数量均较对照组显著增加,由此反映出早期生活事件所致脑-肠轴表达异常可能在肠易激综合征内脏感觉过敏发生机制中起重要作用。     

小鼠海马区c-fos基因在记忆功能增强过程中的作用

为研究记忆训练功能是否与小鼠海马区c-FOS蛋白有关,并探究胆碱能受体激动剂和阻断剂与小鼠海马区c-fos基因转录和c-FOS蛋白表达之间是否存在相关性。以小鼠水迷宫学习记忆测试平台为基础,将小鼠随机分为空白组、模型组、逃生组,应用实时荧光定量PCR方法,观察逃生记忆结果与小鼠中枢海马区c-fos基因表达水平变化的相关性。并通过小鼠尾静脉注入毛果芸香碱和阿托品后,测定小鼠海马区c-fos基因转录水平和c-FOS蛋白表达量的变化,探讨对记忆功能有影响的胆碱受体激动剂和抑制剂对记忆的影响是否与c-FOS蛋白表达有关。结果表明：经7d逃生训练试验后小鼠逃生速度极显著大于对照组（P<0.01）,且逃生训练组小鼠c-fos基因转录水平极显著高于空白组和模型组（P<0.01）,提示小鼠c-fos基因可能与小鼠逃生记忆产生有关。毛果芸香碱可升高小鼠海马区c-fos基因转录水平、阿托品可降低小鼠海马区c-fos基因转录水平,在2.5h达到作用峰值（P<0.01）,且具有较好的量效关系;毛果芸香碱可极显著地升高海马区的c-FOS蛋白含量（P<0.01）,且此升高作用与捉持和尾静脉...     

转移抑制基因nm23—H1在涎腺癌中的表达

目的：观察ｎｍ２３－Ｈ１基因表达与涎腺癌发生和转移的关系。方法：采用免疫组织化学法。结果：ｎｍ２３－Ｈ１基因在涎腺癌中表达阳性率为８８．３３％，癌旁涎腺组织为３７．５０％；ｎｍ２３－Ｈ１表达的阳性率与涎腺癌发生的部位、肿瘤大小及临床分期无关，而ｎｍ２３－Ｈ１高表达与颈淋巴结转移呈负相关。结论：ｎｍ２３－Ｈ１基因与涎腺癌发生有关；ｎｍ２３－Ｈ１高表达对涎腺癌颈淋巴结转移具有抑制作用。     

P16基因在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及其意义

目的：探讨抑癌基因Ｐ＾１６的表达水平与妊娠滋养细胞肿瘤的形成及转移倾向的相关性。方法：采用免疫组织化学方法，检测葡萄胎３０例，侵蚀性葡萄胎２５例，绒毛 ２６例及正常绒毛２５例的滋养细胞中Ｐ＾１６的表达。结果：（１）Ｐ＾１６在妊娠滋养细胞肿瘤中有较高的表达，阳性率为７４．５％（其中侵蚀性葡萄胎７２．０％，绒毛膜癌７６．９％），高于葡萄胎组（２０．０％）和正常绒毛组（１６．０％），差异有高度显著性；（     

Claudin-6基因在食管鳞状细胞癌组织中的表达

目的 观察Claudin-6基因在食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织中的表达,探讨claudin-6基因与食管鳞状细胞癌发生及进展的关系.方法 应用免疫组织化学法及原位杂交法检测claudin-6及其mRNA在食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织中的表达.结果 在正常食管上皮组织及食管鳞状细胞癌中,claudin-6及mRN...     

牦牛与黄牛胃中脑红蛋白表达的比较研究

为了探讨脑红蛋白(NGB)在牦牛与黄牛胃中的表达差异,试验选择健康成年牦牛与黄牛各5头,利用免疫组织化学染色SP法,观察脑红蛋白在牦牛与黄牛瘤胃、网胃、瓣胃及皱胃组织中的表达差异.结果表明:NGB在牦牛和黄牛胃中均有分布,分别表达于瘤胃、网胃、瓣胃的黏膜上皮和固有层,以及皱胃的黏膜上皮和胃底腺.牦牛和黄牛瘤胃、网胃、瓣胃黏膜上皮NGB的表达强度均高于固有层,皱胃黏膜上皮和胃底腺NGB的表达强度相当.半定量分析结果表明,NGB在牦牛瘤胃、瓣胃黏膜上皮和固有层以及皱胃黏膜上皮和胃底腺中的阳性表达强度均显著高于黄牛(P0.05),而在网胃黏膜上皮和固有层中牦牛与黄牛的NGB阳性表达差异不显著(P0.05).NGB在牦牛与黄牛胃中的表达,提示其在胃部生理活动尤其是氧代谢环节中发挥着重要作用.牦牛胃部分组织中NGB的表达强度高于黄牛,可能与其对高原低氧环境的适应性有关.     

鸡PLA2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备

【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-PLA2融合蛋白。将GST-PLA2融合蛋白免疫青年蛋鸡,每次0.3mg/只,共免疫4次,收集鸡蛋,提取卵黄抗体,采用West-ern Blotting检测抗体的特异性。【结果】成功克隆出了鸡PLA2基因,构建了pGEX-4T-1-PLA2原核表达载体,并诱导表达了分子质量为44.59ku的GST-PLA2融合蛋白。GST-PLA2融合蛋白免疫蛋鸡后获得了卵黄抗体,经West-ern Blotting检查,制备的卵黄抗体具有很好的特异性。【结论】构建了表达鸡PLA2基因的表达系统,并成功的制备了抗鸡PLA2的卵黄抗体。     

鸡PLAM2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备

【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-PLA2融合蛋白。将GST-PLA2融合蛋白免疫青年蛋鸡,每次0.3mg/只,共免疫4次,收集鸡蛋,提取卵黄抗体,采用West-ern Blotting检测抗体的特异性。【结果】成功克隆出了鸡PLA2基因,构建了pGEX-4T-1-PLA2原核表达载体,并诱导表达了分子质量为44.59ku的GST-PLA2融合蛋白。GST-PLA2融合蛋白免疫蛋鸡后获得了卵黄抗体,经West-ern Blotting检查,制备的卵黄抗体具有很好的特异性。【结论】构建了表达鸡PLA2基因的表达系统,并成功的制备了抗鸡PLA2的卵黄抗体。     

光照对小鼠下丘脑视上核及乳腺组织钟基因Clock表达的影响

分析光照对泌乳期小鼠下丘脑视上核(SCN)及乳腺组织内生物钟基因Clock表达的影响.采用荧光定量RT-PCR法测定不同光照条件下SCN和乳腺组织中Clock基因的昼夜表达规律.试验发现Clock基因的mRNA不但在SCN,而且在乳腺组织也具有昼夜节律性表达.在光照-黑暗交替光制下,SCN和乳腺组织Clock基因的mRNA表达的峰值相位存在约6 h的相位差;在全黑暗条件下,Clock基因的mRNA表达存在昼夜节律,SCN和乳腺组织Clock基因的mRNA表达的峰值相位基本同步.结果显示,Clock基因的昼夜节律表达具内源性特征;光照影响Clock基因mRNA的表达.     

高糖培养对乳鼠海马神经元存活及c-fos蛋白表达影响

目的探讨高糖培养对乳鼠海马神经元存活及c-fos蛋白表达影响。方法无血清体外培养方法获得新生SD乳鼠海马神经元,分为正常组和高糖6、12、18、24h共5组。分别用PI/Hoechest33342染色法、免疫荧光细胞化学法检测检测海马神经元存活率及c-fos蛋白表达。结果高糖24h组海马神经元存活率明显低于正常组及高糖6、12、18h组(P<0.01)。高糖处理后,c-fos蛋白表达在6h开始出现,12h达高峰,此后逐渐下降(P<0.01)。结论高糖培养导致的乳鼠海马神经元存活率下降与c-fos蛋白表达有关。     

夏季种鸡日粮中添加小苏打对生产繁殖性能的影响

试验旨在研究夏季日粮中添加小苏打对种鸡生产繁殖性能的影响。经过32d的饲养并记录各种数据,综合结果分析表明：日粮中添加小苏打对种鸡的生产繁殖性能的提高有一定的作用效果,其中,以0．3％小苏打添加量作用效果最好。     

光照强度对樱桃谷肉鸭c-fos、生物钟基因表达及褪黑激素的影响

【目的】研究持续黑暗下给予樱桃谷肉鸭不同强度的瞬时光照,对下丘脑、间脑、垂体和中脑中c-fos基因及相关生物钟基因的表达及血浆和肝脏中褪黑激素含量的影响。【方法】选用144只健康且体重接近的1日龄樱桃谷肉鸭饲养至21日龄,22日龄时随机分为2组,每组6个重复,持续黑暗7 d,期间自由采食和饮水,分别采用10 Lx和80 Lx的LED白光刺激1.5 h,暗适应1.5 h后立即从每个重复选取1只接近平均体重的肉鸭,检测下丘脑、间脑、垂体和中脑c-fos和生物钟基因的表达量,检测血浆和肝脏褪黑激素含量。【结果】10 Lx组的下丘脑和中脑c-fos表达量显著高于80 Lx光照组(P<0.05),间脑中c-fos的表达量显著低于80 Lx光照组(P<0.05),两组垂体组织中c-fos表达无显著影响(P>0.05)。与80 Lx组相比,10 Lx组下丘脑生物钟基因Bmal1、Bmal2、Clock和Per2表达量均显著提高(P<0.05),Cry1表达量也有提高的趋势。10 Lx组间脑Bmal1的表达量显著提高(P<0.05),Bmal2、Clock、Per2和Cr...