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1.
以黄瓜白粉病菌为试验材料,比较分析了改良CTAB法、SDS法和真菌试剂盒法对黄瓜白粉病菌基因组DNA提取的效果。结果表明,CTAB法提取的黄瓜白粉菌基因组DNA在纯度(R=A260 nm /A 280 nm)和产量上均优于SDS法和真菌试剂盒法,且杂质少。CTAB法提取的黄瓜白粉菌基因组DNA产率为204.3 μg/g,而SDS法和真菌试剂盒法分别为147.7、117.7 μg/g,且方法产率之间差异极显著。采用CTAB法提取的DNA纯度较高,为1.969 6;SDS法和真菌试剂盒法提取的DND纯度较低,分别为1.832 2和1.507 9。 相似文献
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以扁桃(Amygdalus conmmuis L.)幼叶为试材,通过7种保存方法并采用改良2×CTAB法、3×CTAB法和SDS法对其DNA进行提取,用琼脂糖凝胶电泳检测其DNA完整性,分光光度计测其产量和纯度,以探讨不同保存方法和不同提取方法对扁桃DNA提取质量的影响。结果表明,扁桃新鲜幼叶、压干幼叶后在-75℃保存、45℃烘干幼叶后在-75℃保存以及硅胶干燥幼叶后在-75℃保存三个月均可以用三种提取方法可获得完整的DNA,纯度和产量均高,其保存和提取方法简便易行且获得高质量DNA。扁桃鲜叶直接放在-20℃保存比-75℃保存更易获得DNA,而压干后的扁桃叶片-20℃保存三个月并采用SDS法提取,获得高产量、高纯度的DNA,不影响提取效果。SDS法和改良3×CTAB法均可获得扁桃DNA,但SDS法优于3×CTAB法,其操作简单、耗时少;改良2×CTAB法提取扁桃成功率较低,不稳定,产量比其它两种方法低。 相似文献
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甘蔗基因组DNA简单和快速提取方法 总被引:9,自引:0,他引:9
目前国内外关于提取DNA的方法很多(Honeycutt et al.,1992;顾红雅和瞿礼嘉,1998),但因研究的对象和目的不同而有所差异。甘蔗含有大量的酚和多糖等有机物质,由于这些物质的干扰,按照常规提取植物组织总DNA的方法提取甘蔗基因组DNA,常常因产量小和纯度低而不能满足实验要求。本实验在前人研究的基础上(Honeycutt et al.,1992;顾红雅和瞿礼嘉,1998),对所用药品及技术进行改进,摸索出一套快速、简便且可获得高质量基因组DNA的改良方法。用此方法提取的DNA进行酶切、RAPD和Southem杂交分析,都取得了良好的效果。 相似文献
5.
苹果基因组DNA的快速提取 总被引:7,自引:0,他引:7
提出了一种适用于苹果(Malus pumila Mill)RAPD分析的基因组DNA的快速提取方法。用本法提取的DNA质量高,简便,快速,经济,每天可提取200个DNA样品,每个DNA样品可供50-100次PCR反应,用10个碱基随机引物进行PCR扩增,95%以上的样品都才扩增出3-10条清晰的泳带。 相似文献
6.
本研究采用改良SDS法、常规CTAB法和改良CTAB法(1.5×CTAB,2×CTAB,3×CTAB)提取大青杨基因组DNA,并用紫外光普分析、凝胶电泳、限制性内切酶消化和RAPD方法进行鉴定。结果表明:5种方法中,改良SDS法DNA提取率最高,但CTAB法比改良SDS法提取获得的DNA纯度高,OD260/OD280为1.73~1.81。与常规CTAB法比较,改良SDS法和改良CTAB法能有效去除蛋白、多糖、酚类及次生代谢物质。综合分析确定改良2×CTAB法为大青杨基因组DNA的最佳提取方法。 相似文献
7.
适用于RAPD分析的蚕卵基因组DNA快速提取方法的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
目前所报道的家蚕基因组DNA的提取方法(Sharp et a1,1988;Yang et al,1993;夏庆友等,1996;王韵等,1997)基本上都是先应用离子型表面活性剂(SDS)及蛋白酶K去除结合在核酸上的蛋白质,然后用酚、氯仿变性除去蛋白,RNase去除RNA,最后乙醇沉淀DNA获得.这些方法操作过程繁复、耗时多,需用酚、氯仿等有毒试剂.本实验尝试进行改良,寻找适用于大量样品作RAPD分析并简单、快捷、低成本的蚕卵基因组DNA的提取方法. 相似文献
8.
为了研究干制加工羊肉基因组DNA的最佳提取方法,本试验采用传统酚-氯仿法、磁珠法、改良CTAB法、离心柱法分别提取干制处理后的羊肉基因组DNA,并对4种方法提取的羊肉基因组DNA浓度、纯度、完整性以及提取所需时间、PCR扩增效果等进行比较。结果表明,采用磁珠法提取DNA的效果更好,DNA浓度为118.87 ng·μL-1,A260/A280值为1.89,而且此方法具有提取时间短、效率高、污染小等特点。本研究结果为干制加工羊肉基因组DNA的大批量提取和检测提供了参考依据。 相似文献
9.
本文以一串红的叶片、茎段、花为材料,分别采用高盐低pH法、十二烷基硫酸钠(SDS)法、改良十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法、核DNA法和十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)区室法等5种不同方法对其进行了基因组DNA提取效果的比较分析。结果表明,除用高盐低pH法在一串红花中未提取出DNA外,其它均可提取出DNA,都能进行RAPD扩增。5种方法在一串红DNA提取中,提取效果由高到低依次为:核DNA法、改良CTAB法、SDS法、CTAB区室法、高盐低pH法;3个部位提取结果显示:叶片较容易得到高质量的DNA,茎段次之,花最差。 相似文献
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土壤微生物总DNA提取方法的比较 总被引:26,自引:0,他引:26
采用4种土壤DNA提取方法提取了5种类型土壤的微生物总DNA,并对4种提取方法的DNA提取效果进行综合分析,进一步通过PCR—DGGE扩增提取DNA中的细菌16S rDNA片段,并对扩增产物进行DGGE电泳分析。结果表明,SDS-高盐缓冲液法抽提的DNA得率最高,SDS-酚氯仿抽提法的DNA得率最低。DNA的纯度,以BIO-101 DNA Extraction Kit试剂盒法最高,改进试剂盒法纯度最低。通过PCR-DGGE分析土壤微生物多样性结果表明,BIO-101 DNA Extraction Kit试剂盒法提取的DNA代表的微生物多样性最全,而SDS酚氯仿法抽提的DNA代表性最差。 相似文献
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分光光度法测定叶绿素含量的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
杨振德 《广西农业生物科学》1996,(2)
应用分光光度法研究了不同提取液对叶绿素含量测定的影响。结果表明,用不同提取液提取叶绿素,其吸收光谱相似。但对叶绿素的得率及稳定性的影响较显著,随着提取液中含水量的提高,叶绿素提取速度、效率及叶绿素提取液的稳定性显著下降。在各种提取液中,叶绿素b比叶绿素a相对较稳定。植物材料的含水量对叶绿素含量测定及稳定性无明显影响。含水量为零的丙酮和无水乙醇2:1混合提取液是较佳的提取液,可适合于大批量样品的测定。 相似文献
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脂氧合酶与枣果成熟软化的关系 总被引:14,自引:2,他引:14
以梨枣和郎枣为试验材料,测定了枣果成熟衰老过程中脂氧合酶(LOX)、SOD、CAT、PE活性以及呼吸动态、硬度等的变化。结果表明,枣果采后在20℃下贮藏,后熟软化进程很快,随枣果成熟软化,呼吸强度、LOX、PE活性呈上升趋势;硬度、SOD、CAT活性呈逐渐下降趋势。0℃低温可显著抑制LOX、PE活性,有效延缓软化。同时试验表明,LOX活性与呼吸强度、PE活性呈正相关关系(r=0.9805,0.9471),而与SOD,CAT活性呈负相关关系(r=-0.8907,-0.7172)。LOX是引起枣果成熟衰老的关键因素 相似文献
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为延长临泽小枣鲜果市场供应期。以临泽小枣为试验材料,采用正交试验方法,在常温(20~25 ℃)条件下,研究不同浓度的氯化钙、植酸、柠檬酸复配保鲜剂组合以及壳聚糖涂膜处理对贮藏临泽小枣果实品质的影响。结果表明,采后用复配保鲜剂组合1% CaCl2 + 0.3% 植酸 + 3% 柠檬酸处理能有效减少临泽小枣烂果率,并延缓有机酸、TSS、Vc含量下降,为最佳复配保鲜剂组合;而用1% 壳聚糖制成涂膜处理则具有更好的保鲜效果,能够显著降低烂果率,保持果实硬度,并延缓TSS和Vc含量下降。综合分析,使用1%壳聚糖制成涂膜处理对临泽小枣的保鲜效果最佳。 相似文献