家兔兔瘟HI抗体水平对猪瘟活疫苗效力检验结果的影响

按照《兽用生物制品规程》方法,应用具有不同兔瘟HI抗体水平的家兔进行猪瘟活疫苗的效力检验。实验结果表明,家兔的兔瘟HI抗体水平对其接种猪瘟活疫苗后诱发的体温反应无干扰作用。     

猪瘟兔化弱毒疫苗效力检验替代方法研究Ⅰ家兔效力检验ELISA方法初探

通过检测接种后不同时期的家兔血清猪瘟抗体水平,确定了家兔猪瘟抗体检测时间为10d.监测注射不同稀释度猪瘟兔化弱毒后家兔体温反应变化,同时检测第10天家兔血清中猪瘟抗体水平.比较两项结果表明,家兔体温反应与ELISA抗体检测结果具有较高的正相关性,在24组出现典型的热反应家兔中,有23组血清猪瘟抗体检测结果均为阳性,两者符合率为95.83％,4组未出现典型的热反应的家兔猪瘟抗体ELISA结果比体温反应表现出更好的的敏感性和准确性.这一结果为猪瘟兔化弱毒疫苗家兔效力检验ELISA方法的建立提供了依据.     

运用反向间接血凝方法对猪瘟细胞毒原液效检试验

猪瘟细胞苗生产过程中，细胞毒效价的测定一直采用家兔兔体热型反应来实现，由于试验动物本身诸多因素的影响（特别是注兔瘟苗后抗体水平的影响），家兔常表现钝感，使试验结果出现误差，另外检验周期也要５～７ｄ，为避免这些缺点，本试验探讨了以反向间接血凝方法代替兔...     

在猪瘟活疫苗生产中用反向血凝与家兔检验进行中间检测结果的比较

在猪瘟活疫苗生产中用反向血凝与家兔检验进行中间检测结果的比较姜昌筠何琨安徽生物药厂合肥２３００２２我厂生产猪瘟活疫苗中间检测一直用家兔测定猪瘟兔化毒的毒价。从１９９５年开始，才将反向血凝试验用于中间检测，作者对这两种方法进行了试验比较，现报告如下。１...     

兔瘟免疫失败原因及防制措施

在家兔生产过程中,尽管家兔已接种了兔瘟疫苗,但在规定的免疫期内仍发生兔瘟或抗体监测时达不到应有的抗体水平,甚至有发生整个兔群暴发兔瘟的情况.那么为什么会发生免疫失败?笔者在多年的生产实践过程中进行了深入调查,对家兔免疫失败的原因进行了分析和总结,并提出了相应的对策.     

法氏囊活性肽对兔瘟灭活疫苗免疫效果影响的研究

采用超滤浓缩技术制备纯化的鸡法氏囊活性肽（分子量1kDa以下，主要成分为法氏囊活性肽），以不同的剂量肌肉注射45日龄母兔，同时颈部皮下接种兔瘟灭活疫苗，观察法氏囊活性肽对兔瘟疫苗免疫效果的影响。结果表明：纯化的法氏囊活性肽能够加快兔瘟抗体产生的速度，缩短诱生抗体时间，提高抗体水平，延长抗体维持时间。实验期间，4mL法氏囊活性肽组的兔瘟HI抗体水平比对照组平均高2－3个滴度。淋巴细胞转化试验结果表明：禽法氏囊活性肽可以短暂地促进T－淋巴细胞的活化。因此，法氏囊活性肽主要对体液免疫具有增强作用。     

兔瘟精制卵黄抗体的实验室制备及检验

选用免疫原性良好的兔瘟抗原制备成兔瘟灭活疫苗,按特定的免疫程序接种健康商品蛋鸡群,通过HI检测免疫鸡群血清和卵黄的兔瘟抗体效价,收集合格的高免蛋,制备兔瘟精制卵黄抗体。经实验室检验,本品安全性良好,     

中国白兔IL-6基因真核表达质粒的构建及其对兔瘟组织灭活苗免疫效果的影响

研究兔白介素-6基因真核重组质粒(pcDNA-IL-6)对兔瘟组织灭活苗免疫效果的影响。本文构建了真核重组质粒pcDNA-IL-6,并将其与兔瘟组织苗共同免疫家兔,以兔瘟组织灭活苗和质粒pcDNA3.1(+)作对照,用血凝抑制试验检测家兔抗RHDV特异性抗体水平。结果:在免疫后的7～70d,兔瘟组织灭活苗与真核重组质粒pcDNA-IL6注射免疫组抗体水平高于只免疫兔瘟组织灭活苗组,差异均显著p0.05或极显著p0.01。真核重组质粒pcDNA-IL-6对兔瘟组织灭活苗表现出来明显的免疫佐剂效应。     

STK猪瘟活疫苗与ST细胞苗及脾淋组织苗免疫效果试验

将STK猪瘟活疫苗、ST猪瘟活疫苗、猪瘟脾淋组织苗和生理盐水(对照组)分别接种CSFV血清学阴性(CSFV抗体阻断率≤30%)的断奶仔猪,用美国IDEXX公司的猪瘟抗体检测试剂盒检测其抗体水平的动态变化差异,并分析抗体合格率(或阳性率)、阻断率等指标。结果表明:仔猪二次免疫STK猪瘟活疫苗后25天(即90日龄),猪瘟抗体的合格率达到100%,其中85%仔猪的抗体水平达到了比较高的滴度(阻断率≥60%),且二次免疫后在整个生长期都能维持较高的抗体水平。免疫ST猪瘟活疫苗及猪瘟脾淋组织苗后,在90日龄猪瘟抗体的合格率虽能达到或接近100%,但抗体水平处于高滴度的比例不大:ST细胞苗40%仔猪抗体阻断率≥60%,脾淋苗只有35%仔猪抗体阻断率≥60%,均低于免疫STK猪瘟活疫苗的抗体水平,且较高抗体水平维持的时间短于STK猪瘟活疫苗。各项结果表明,STK猪瘟活疫苗对仔猪有很好的免疫效果,能产生较高水平及较长时间的免疫保护力,且免疫效果优于ST猪瘟活疫苗和猪瘟脾淋组织苗。     

黄芪多糖注射液对猪瘟耐热保护剂活疫苗在兔体内免疫效果的影响

试验旨在研究黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)注射液作为猪瘟疫苗稀释液及黄芪多糖作为疫苗佐剂提供数据支持。用1%的黄芪多糖注射液、猪瘟疫苗专用稀释液、生理盐水3种不同猪瘟疫苗稀释液稀释兔源猪耐热保护剂活疫苗免疫兔体,比较免疫后不同时间段内血液中的淋巴细胞的活性及血清中的猪瘟抗体、白介素2(interleukin 2,IL-2)、白介素6(interleukin 6,IL-6)、γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)、新蝶呤(neopterin,Npt)水平,综合评价3种不同猪瘟疫苗稀释液对兔源猪瘟耐热保护剂活疫苗在兔体内免疫效果的影响。结果表明,黄芪多糖能不同程度的提高抗体水平和多种细胞因子的含量。因此,黄芪多糖注射液可以作为猪瘟疫苗稀释液或改良现有猪瘟疫苗稀释液,黄芪多糖也可以作为猪瘟疫苗佐剂。     

间接ELISA检测试剂盒在兔瘟抗体监测中的效果评价

兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。     

猪瘟活疫苗(脾淋源)污染外源性兔出血症病毒的检测与启示

在进行2批猪瘟活疫苗（脾淋源）效力检验时,出现效力检验家兔突然死亡现象,为了查明家兔死亡原因,采用无菌检验、支原体检验、血凝试验、兔体中和试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）对疫苗或注苗后死亡家兔肝脏、脾脏混合病料进行了检测。结果显示,疫苗的无菌检验、支原体检验结果均为阴性;疫苗及注射疫苗死亡家兔肝脏、脾脏混合病料具有较低的血凝价,血凝试验结果均为可疑;在兔体中和试验中,中和组家兔2／2健康存活,未中和的疫苗对照组家兔2／2死亡;疫苗及注射疫苗死亡后家兔肝脏、脾脏混合病料的ELISA检测结果均为阳性。检测结果证实疫苗中含有兔出血症病毒（Rabbit Haemorrhagic Disease Virus,RHDV）。猪瘟活疫苗（脾淋源）污染RHDV的现象启示：应该加强猪瘟活疫苗（脾淋源）抗原制备过程的控制;同时有必要对猪瘟活疫苗（脾淋源）质量标准进行修订使之进一步补充完善。     

不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比试验

试验随机选择了5窝断奶仔猪,每窝6头,共30头。随机分成3个组,每组10头,其中试验1组接种猪瘟兔化弱毒细胞苗(猪瘟活疫苗Ⅱ系),试验2组接种猪瘟组织苗(猪瘟活疫苗Ⅲ系),试验3组接种猪瘟脾淋苗(猪瘟活疫苗Ⅰ系),每头仔猪均接种剂量2头份。在免疫15d后,分别采血、分离血清、检测猪瘟抗体水平。检测结果,试验1组、试验2组、试验3组的平均抗体水平分别为1∶56、1∶60、1∶194。统计分析表明:猪瘟脾淋苗免疫效果最好(P<0.01),而猪瘟细胞苗和组织苗两者抗体水平差异不显着(P>0.05),但从总体上看3种疫苗使用2头份剂量免疫15d后都能使仔猪获得良好的保护力。     

兔瘟免疫失败的原因分析及预防措施

近年来，在养兔生产中，虽已接种了兔瘟疫苗，但在规定免疫期内仍可能发生兔瘟或抗体检测不达标，甚至整个兔群仍可能暴发兔瘟等情况。笔者在生产实践中进行深入调查，对家兔免疫失败原因进行分析，现总结如下，供参考。     

高效制备霍乱弧菌菌影及其增强猪瘟疫苗免疫效果的研究

为评价霍乱弧菌菌影(VCG)对猪瘟活疫苗及猪瘟病毒E2蛋白抗原区(BC和AD区)亚单位疫苗免疫增强效果的作用,本实验首先利用含有裂解质粒的霍乱弧菌制备VCG,通过对细菌裂解前后进行平板计数及透射电镜检测VCG裂解效果,结果显示所制备的VCG裂解率高,且基本形成一个完整的细菌空壳。在确定最佳猪瘟活疫苗使用量后探究VCG对猪瘟活疫苗(CFS ST)免疫效果的影响,实验分别用VCG+CFS ST和CFS ST免疫家兔一次,设置对照组,并在免疫第42 d后攻毒。本研究还探究了VCG作为佐剂对猪瘟E2蛋白主要抗原区蛋白亚单位疫苗免疫效果的影响,实验分别用完全弗氏佐剂(CFA)和VCG联合E2蛋白主要抗原区蛋白,通过间隔两周的方式分4次免疫家兔,设置对照组,并在免疫第56 d后攻毒。通过阻断ELISA方法每周检测家兔血清的抗体阻断率,免疫后以500 RID_(50)的猪瘟病毒弱毒株通过耳缘静脉注射方式对家兔攻毒。结果显示,50 RID_(50)的猪瘟活疫苗组家兔血清抗体阻断率显著降低(p0.001);VCG+CFS ST组家兔猪瘟抗体阻断率在免疫14 d后大部分时间点显著高于CFS ST组(p0.05),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应;CFA(E2)组和VCG(E2)组的家兔猪瘟抗体阻断率均显著达到较高水平(p0.001),并且攻毒后仅对照组出现定型热反应。以上结果表明VCG可作为免疫佐剂增强猪瘟活疫苗的免疫效果;VCG联合猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区亚单位疫苗在家兔中也具有较好的免疫效果。本研究为研发廉价高效的疫苗佐剂提供重要的实验依据。     

兔瘟抗体检测卡的研究及应用

正兔病毒性出血症又名兔瘟,是兔的一种急性、致死性的病症,具有高度接触性,以实质器官水肿、淤血和出血性变化为特征。针对本病危害严重,都用兔病毒性出血症组织灭活苗,对家兔进行免疫接种,但是,疫苗免疫后还有大量养殖场发生兔瘟,造成很大的经济损失。为此我们设想,有没有一种简便的检测兔瘟抗体的方法,一般实验室血凝检测方法在养殖户条件下操作性低,难以保证兔子兔瘟抗体的水平和防疫的有效性。笔者开展了兔     

“兔瘟”疫苗中不同佐剂对免疫效果的影响

利用“兔瘟”病毒枣(?)毒株(RVZ85)制备的不含佐剂疫苗,甘油佐剂疫苗、氢氧化铝佐剂疫苗和矿物油佐剂疫苗免疫接种易感家兔,定期测 HI 抗体效价并进行人工攻毒试验.结果证明,不含佐剂的疫苗产生的保护力最早,免疫后三天即4/4保护.用四种疫苗免疫接种后一年内,对攻毒的保护率均为100%.四种疫苗中,以矿物油佐剂疫苗免疫兔的HI抗体效价最高,氢氧化铝佐剂疫苗次之,甘油佐剂疫苗及不含佐剂疫苗的HI效价较低。氢氧化铝佐剂疫苗在室温保存8.5个月,免疫兔4/4保护;室温保存14个月.免疫兔2/3保护:4℃保存14个月,免疫兔4/4保护.     

兔出血症病毒两种感染途径的致死性比较研究

为提高猪瘟活疫苗的外源性兔出血症病毒(RHDV)的检测敏感性,进行了RHDV对家兔感染途径的致死性比较试验,以便筛选出具有较高致死性的感染途径。将RHDV通过皮下、静脉两种途径感染家兔,比较了家兔两种感染途径的半数致死量(LD_(50)),同时对1批污染RHDV的脾淋源猪瘟活疫苗采用皮下、静脉两种途径注射家兔进行RHDV检测。结果表明,静脉途径对家兔的LD_(50)是皮下途径的126倍;污染疫苗的检测应用也表明家兔感染的静脉途径比皮下途径更加敏感,提高了猪瘟活疫苗外源性RHDV污染的检出率;RT-PCR证实了注苗死亡家兔的肝脏组织含有RHDV。本试验可为《中国兽药典》的修订提供数据参考。     

现行两种猪瘟免疫方案效果监测分析

近年来猪瘟的发生时有报道,究其原因是多方面的,其中免疫程序的合理性是重要原因之一。我国一直以来均采取猪瘟兔化弱毒活疫苗对仔猪进行首免,其中免疫时机的选择尤为重要。从理论上说,仔猪猪瘟母源抗体水平下降至中和效价为1∶16的临界水平     

两种不同检测法对猪瘟抗体阴性猪筛检的比较

猪瘟抗体阴性猪是猪瘟活疫苗安检的重要实验动物,目前对于猪瘟抗体阴性猪筛选是采用兔体中和反应法,实验复杂,工作量大并且易受实验兔个体差异等因素影响。随着生物学及其技术的发展,ELISA被广泛用于生物制品的各个领域。本试验应用ELISA法和兔体中和反应法对猪瘟抗体阴性猪进行筛选,共检测160份血清,检测结果显示两种方法结果有很高的一致性,但ELISA法更为敏感,快捷,更适用于猪瘟抗体阴性猪的筛选。