没食子儿茶素没食子酸酯制备新工艺的研究

为得到富含没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的茶多酚,以分离EGCG单体,在传统的有机溶剂提取茶多酚的基础上,采用等体积的柠檬酸水溶液酸洗,使所获茶多酚产品中EGCG的含量由40％～50％上升到80％左右。再以该茶多酚为原料,应用HSCCC分离纯化儿茶素单体,所得EGCG产品的纯度达到98％以上。还分别以常规有机溶剂提取方法和新方法所得茶多酚为原料,进行HSCCC分离,结果表明,在相同进样量的情况下,以新方法所得的茶多酚为原料在相同条件下进行HSCCC分离,EGCG的得率提高了169％。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人肝细胞氧化损伤的保护作用

通过测定细胞存活率及细胞培养上清液中谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人肝细胞（L02）损伤的保护作用。结果表明,与对照组相比,肝细胞损伤模型组的SOD活性显著降低,MDA含量极显著升高,EGCG各剂量组均可显著降低MDA含量,其培养上清液中ALT和LDH含量显著升高。     

表没食子儿茶素没食子酸酯和维生素C联用对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响

以KM雄性小鼠为研究对象,酵母膏（7.5 g·kg^-1）和氧嗪酸钾（250 mg·kg^-1）联合给药建立高尿酸血症小鼠模型,探究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和维生素C（Vc）联用对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响。将小鼠随机分为6组（n=6）：空白组、模型组、别嘌呤醇组（阳性药组）、EGCG组、EGCG联合Vc组和Vc组,连续给药7 d后测定生化指标。结果表明,与模型组相比,EGCG联合Vc组小鼠的血尿酸值（UA）,血尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平均明显降低（P<0.001）;EGCG与Vc联用明显抑制了肝脏中腺苷脱氨酶（ADA）和黄嘌呤氧化酶（XOD）的活性（P<0.05或P<0.01）,并显著下调了肾脏中葡萄糖转运蛋白9（GLUT9）mRNA的表达（P<0.001）;肾脏切片显示EGCG和Vc联用显著改善高尿酸血症小鼠的肾脏损伤。此外,EGCG与Vc联用对高尿酸血症小鼠的作用效果优于EGCG。     

混菌发酵绿茶产脂肪酶及其对酯型儿茶素的水解作用分析

微生物的发酵作用导致黑茶加工过程中儿茶素的生物转化和总茶多酚含量的下降,这一转化过程的代谢途径和调控机制尚不清楚。通过添加冠突曲霉(Aspergillus cristatum)菌株PE-1和黑曲霉(A. niger)菌株PE-4混合发酵绿茶,采用鉴别培养基平板检测、酶活性测定和酶蛋白分离纯化,研究脂肪酶活性及其对酯型儿茶素的水解作用。两个菌株单菌发酵和混合菌种发酵绿茶条件下均可以检测到脂肪酶活性,混菌发酵酶活力高于两个菌株单菌发酵的酶活力。混菌发酵条件下获得一个分子量约为37 kDa的脂肪酶,对EGCG和ECG有不同的生物转化作用。UPLC检测结果表明,该脂肪酶对EGCG有较好的底物选择性,EGCG的水解率为94.46%,EGC的产率为63.33%;ECG的水解率为15.45%,EC的产率为4.15%。脂肪酶对EGCG和ECG的生物转化将为儿茶素代谢途径的研究和单体儿茶素的生产起到促进作用。     

茶叶中甲基化儿茶素的分离、纯化和高效液相色谱法分析

以日本Benifuji绿茶为原料,用50％乙腈提取茶叶有效成分,提取液经氯仿脱咖啡碱和色素、乙酸乙酯和HP-20大孔树脂富集儿茶素,得多酚含量高于80％的茶多酚粗品,再经Toyopear HW-40S柱层析分离纯化,得EGC、ECG、EGCG、EC及两种未知成分,经H-NMR、MS和HPLC等分析,两种未知成分为（-）-表没食子儿茶素3-O（3-O-甲基）没食子酸酯（EGCG3”Me）和（-）-3-O-甲基-表儿茶素没食子酸酯（ECG3’Me）。