酶法提取枸杞多糖及脱色方法研究

研究了酶法提取枸杞多糖及脱色工艺方法。采用纤维素酶、木瓜蛋白酶复合处理提取枸杞多糖,采用正交试验确定最佳脱色工艺条件为:活性炭用量2%,脱色温度30℃,酶解液pH值5,脱色时间1.5 h。     

玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较

玉米组织蛋白质的提取及其浓度测定是进行玉米蛋白质组学研究的关键步骤。本研究以玉米叶片和花丝为试材,从总蛋白提取数量和质量方面比较分析了磷酸缓冲液法、Tris法、改进Tris法、TCA-acetone(三氯醋酸-丙酮沉淀)法、Plant Total Protein Extraction Kit试剂盒法及其改良法等6种玉米总蛋白质提取方法。同时,又比较分析了Bradford法、2-D Quant Kit试剂盒法和紫外分光光度法(UV法)等3种方法测定蛋白质浓度的准确性。结果表明:(1)总蛋白提取数量按大小顺序为:试剂盒法试剂盒改良法改进Tris法Tris法TCA-acetone法磷酸缓冲液法;(2)总蛋白提取质量依质量优劣为:试剂盒法试剂盒改良法TCA-acetone法改进Tris法Tris法磷酸缓冲液法;(3)Bradford法与2-D Quant Kit法测定的蛋白质浓度均是准确的,且没有显著差异;但是UV法测定的蛋白质浓度欠准确。经综合考虑,改进Tris法用于SDS-PAGE分析,试剂盒改良法用于2-DE分析,Bradford法用于测定蛋白质浓度是经济有效的方法。这对玉米蛋白质组学的研究具有参考价值。     

适于SDS-PAGE分析的苹果叶片蛋白质提取方法

为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HC1法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HC1法等5种蛋白质的提取方法.制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色.结果表明,改良的Tris-HC1法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 mln增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条.利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白质差异带,分子量分别为71.9,60.5,52.6,41.1,35.3,18.5 kDa,条带清楚,背景清晰.因此,改良的Tris-HC1法适用于苹果叶片的SDS-PAGE分析.     

诺木洪枸杞根腐病病原菌的分离与鉴定

近年来,青海省诺木洪农场发生了严重的枸杞根腐病.为了确定其病原菌,本研究在诺木洪农场枸杞种植区采集典型病株,采用组织分离的方法对病原菌进行分离培养,根据柯赫法则(Koch's postulates)进行致病性检测.结果表明,菌株R和菌株W都可使健康的枸杞植株患病,与田间发病情况一致,且可能存在复合侵染.对菌株W和菌株R...     

碎米中提取蛋白质优于牛奶

针对含有三聚氰胺的奶粉给婴幼儿带来的危害，中国科技大学应用化学系教授钱生球经过研究发现，提取碎米中的蛋白质不仅非常有营养，而且不会过敏，优于牛奶。钱教授说，有的人对大豆和牛奶中的蛋白质会过敏。     

宁夏枸杞果实生长发育初探

宁夏枸杞果实发育可分3个阶段:快速生长期,缓慢生长期,第二次快速生长期,生长类型属双"S"型.在果实发育过程中,糖分的积累主要在第二次快速生长期.果实重量与果实纵径、横径三者中两两之间均呈极显著的正相关,且果实重量与可溶性总糖增长也呈极显著的正相关.     

种子蛋白质电泳在品种纯度鉴定中的应用

近10几年来,随着生化技术的飞速发展及其在农业上的广泛应用,电泳已成为作物品种纯度鉴定的有效手段,它准确、可靠、快速,是今后的发展方向。目前,国外用于品种纯度鉴定的电泳分析技术有两种,即同工酶电泳和蛋白质电泳。在我国,用同工酶电泳技术进行品种的真实性和纯度鉴定已进行了较多的研究,并已用于种子检验工作,特别是用酯酶同工酶和过氧化物同工酶鉴定水稻三系及杂交种、玉米杂交种及自交系已取得一定成果。但是,利用种子蛋白质电泳技术进行品种纯度鉴定工作在我国还没有开展。现就蛋白质电泳的基本原理及国外近年来蛋白质电泳在品种鉴定上的研究应用概况予以综述,以便使该项技术尽快在我国得到应用。     

食用菌汁中芳香成分提取分离与鉴定方法

食用菌汁中绝大部分营养成分对人体十分有益,其中包括芳香物质。所谓食用菌芳香物质,指的是食用菌在成熟过程中形成的各种气味宜人的挥发性香味成分,如酯、醛、酮、醇、挥发性酸类物质等,构成了各种食用菌甚至某个品种特有的典型香味。尽管食用菌中芳香物质含量很低,却是区别各种食用菌汁最重要的特征参数,在判断食用菌汁饮料质量中起决定性作用。目前,比较典型的取汁工艺中无一不把芳香物质回收作为其中不可缺少的内容,以实现产品的天然完美。在芳香物质研究领域中,研究方法各有差异,但都围绕着3个主要环节进行,即芳香成分的提取、分离与鉴…     

响应面法优化枸杞总黄酮提取工艺的研究

采用响应面法对索氏法提取枸杞总黄酮的工艺条件进行优化。在单因素试验的基础上,以枸杞总黄酮提取量为响应值,对提取工艺中显著影响提取效果的液料比、粒径、提取时间3个因素进行考察。优选的最佳工艺条件为:粒径70目,液料比17.59∶1(m L/g),提取时间2.5 h,该条件下枸杞总黄酮的平均提取量为14.57 mg/g,与模型预测值基本相符。结果表明:响应面法优选枸杞总黄酮提取工艺稳定、简便、合理,具有较高的精确度,可为生产提供科学的依据。     

宁夏枸杞

枸杞在宁夏已有二百多年的栽培历史,以果大、肉厚、皮薄、色泽红润、味甘甜,水溶性浸出物含量高(55.5~58.0％)等特点,蜚声中外,目前全区枸杞面积达2.3万亩,主产区的中宁县平均亩产157斤。 枸杞全身是宝,果实是主要利用部分。其根、叶、果、柄也都含有人体所需要的维生素A、B、B₂、C、18种氨基酸、脂肪、蛋白、     

土壤盐胁迫下宁夏枸杞的生理反应

以宁夏枸杞(LyciumbarbarumL.)主要栽培品种宁杞一号为试验材料,研究了不同浓度土壤盐胁迫下宁夏枸杞渗透调节、光合作用、抗氧化保护系统和糖代谢等生理性状的变化,结果显示:Na鄄Cl胁迫下,宁夏枸杞渗透调节物质以无机离子为主,主要为Na 和Cl-,并随外界盐浓度的增加而增加,K 则呈现下降的趋势,叶部积累的无机离子总量高于根部,枸杞根系质膜和液泡膜H -ATPase活性逐渐增强,且液泡膜H -ATPase活性高于质膜H -ATPase活性;在等渗的PEG6000处理下,有机溶质(甜菜碱,氨基酸,可溶性糖,有机酸)含量明显增加。盐胁迫下枸杞叶片光合作用总体呈现下降的趋势,在土壤盐浓度小于6g/kgNaCl胁迫范围时,光合作用PSⅡ的光化学活性保持较强的稳定性,Pn的下降主要受气孔限制,在盐分浓度大于6g/kgNaCl时,Pn的下降的原因是非气孔限制因素引起的。外源甜菜碱对盐胁迫下枸杞叶片膜质过氧化具有较好的缓解作用。通过钌红标记定位电镜观察发现盐胁迫下枸杞叶片细胞壁表面糖蛋白层明显增厚,并且随NaCl浓度增加而增厚、致密,当浓度超过9g/kgNaCl时,其细胞璧糖蛋白层开始疏松并大量的脱落。     

波缘烟草和枸杞属间原生质体融合再生杂种小植株

分别利用碘乙酰胺（ＩＯＡ）和６０Ｃｏ－ｙ射线失活波缘烟草和枸杞的原生质体，然后用改良ＰＥＧ方法诱导融合。结果表明，异种融合频率为３％左右。利用超氧歧化酶对５０个随机选取的细胞系进行同工酶分析发现，９个细胞系为可能的杂种细胞系。对其中４个分化出小植株的可能杂种细胞系进行叶片酯酶同工酶分析，证实它们均为体细胞杂种，杂种小植株在形态上兼有以亲特点且难以生根。细胞学观察指出，这４个杂种细胞系中的３个为可能     

枸杞花药线粒体分离纯化方法

为了获得高质量的枸杞花药线粒体,本文介绍了一种差速离心分离纯化枸杞花药线粒体的方法。通过Jannus Green B显色反应、线粒体跳动特性以及电镜观察鉴定,结果表明采用本差速离心法提取的线粒体纯度高、活性强、结构完整。进一步通过琼脂糖电泳、光密度值及核特异引物PCR检测表明,由该线粒体裂解的mtDNA不仅纯度高、质量好,而且得率高。本差速离心法具有简捷、高效和经济等优点。用该方法获得的线粒体完全能够满足线粒体基因组、蛋白质组等相关分子生物学研究要求。     

多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞的研究

为研究多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞,本研究利用农杆菌介导技术,利用叶盘转化法,将构建有GUS、BAR、KC1、CAF14个功能基因的表达载体KCTB转化宁夏枸杞,并获得了23株抗性植株;GUS组织化学染色显示,在转基因植株的根、茎、叶中都有表达,PCR结果显示,分别检测到了BAR、KC1、CAF1基因,说明多基因表达载体KCTB已经完全整合到了宁夏枸杞的基因组中。     

柴达木枸杞的农业气象观测方法研究与标准制定

依据连续性、广泛适用性和可操作性原则,制定《柴达木枸杞农业气象观测方法》,结合《农业气象观测规范》和柴达木地区枸杞观测试验,制定观测及评定枸杞各个发育期和生长状况、生长量和产量、相关农业气象灾害和病虫害等方法与标准。同时根据实际观测中存在的问题,提出低温冻害、病虫害危害等特殊情况下的解决方法,进一步优化观测标准,实现柴达木地区枸杞气象观测、科研、服务等相关工作的规范性和理论性,以期为高产优质的枸杞特色农业生产提供科技支撑。     

不同种植年限对枸杞根系及土壤环境的影响

宁夏枸杞是西北干旱地区重要的经济作物, 为了进一步明确不同种植年限枸杞根系及土壤环境的动态变化, 以不同种植年限‘宁杞1号’苗木及其根际土壤为试验材料, 研究枸杞根系生理特性以及土壤酶活性、有机碳、微生物数量和多样性等根际土壤理化特性的变化规律。结果表明, 随着种植年限的增加, 根系比导率先逐渐增大, 种植5年开始逐年减小; 根系活力逐渐减小, 根系相对电导率逐渐增大, 虽然7年生植株根系相对电导率减小, 但减小程度不显著; 根围0~150 cm深处土壤平均含水量在前5年内逐渐增大, 种植7年地块60 cm以上浅层土壤水分显著降低; 根围0~100 cm深处土壤孔隙度不断减小; 土壤微生物总量趋于上升, 其中, 土壤细菌和真菌数量趋于上升, 放线菌数量变化不显著; 土壤微生物平均颜色变化率(AWCD)逐年降低, Shannon指数(H)和丰富度指数(S)变化趋势相对一致, 为先下降后上升; 土壤有机碳活性逐渐下降, 虽然种植5年地块的LFOC活性和种植7年地块的DOC活性有小幅上升, 但总体趋势一致; 土壤脱氢酶活性相对稳定, 没有出现显著的增大或降低; 土壤磷酸酶活性一直处于增大趋势; 土壤脲酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶以及土壤蔗糖酶活性变化趋势相对一致, 均先减小后增大。综合分析表明, 随着种植年限的增加, 土壤活性、肥力和土壤微生物多样性降低, 土壤微环境对根系生物活性的毒害作用增大; 根系生存环境的变化使根系活性降低, 影响枸杞根系导水率和植株对土壤的水分利用。     

枸杞LbCO基因的克隆与生物信息学分析

CONSTANS(CO)基因是高等植物叶片中光周期途径的关键成分,生物钟及光信号控制CO基因的表达。本研究以宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)品种之一‘宁杞7号’叶片为实验材料,通过转录组测序结果筛选,利用RT-PCR技术扩增得到‘宁杞7号’的CO基因cDNA全长序列,命名为LbCO。利用生物信息学手段对所获得的序列进行结果及功能预测,结果显示:LbCO基因的cDNA序列全长1224 bp,编码407个氨基酸,分子质量为44.83 k D,理论等电点pI=5.58,不稳定指数为39.66,是一种稳定的非分泌蛋白。该蛋白亚细胞定位于细胞核,二级结构中无规则卷曲占比最高(54.48%),其次为α-螺旋(28.99%)。系统进化分析表明枸杞LbCO蛋白与其它物种的CO蛋白具有较高的同源性,其中与辣椒属CO蛋白亲缘关系最近。本研究为后续进一步探讨该基因编码的蛋白在调控枸杞花期研究方面提供理论参考。     

枸杞抗坏血酸合成酶基因的表达特征与含量的相关分析

本研究采用紫外分光光度法和实时定量PCR法,分别测定了枸杞各组织中(叶,茎,花,青果,红果)主要抗坏血酸(ascorbic acid,As A)含量以及抗坏血酸合成过程中3个相关酶基因的表达情况,分析了As A含量与各基因表达量之间的相关性。结果表明,枸杞As A在叶和茎中含量最低,青果和红果次之且表达水平较为一致,花中含量最高。As A合成过程中3个关键酶基因协同表达且各酶基因相对表达量变化规律相似。此外,发育过程合成相关酶基因表达量与As A含量相关性分析表明,GLDH、AAO、APX 3个基因共同调控了枸杞各个组织部位中As A的合成与积累,其表达量和As A含量呈现正相关,且有协同增减的表达趋势,导致不同生长时期植物组织中As A含量存在差异。进一步说明,在生态因子调控下,枸杞As A合成关键酶基因的表达影响枸杞As A的合成与积累。     

土壤生态因子与宁夏枸杞中甜菜碱含量变化的关系

以宁夏枸杞的主栽品种宁杞1号为材料,于2004年7月采用高效液相色谱（HPLC）法测定了同心、中宁、惠农、园林场四个产地的宁夏枸杞中甜菜碱的含量并进行了比较。通过对宁夏枸杞果实中甜菜碱含量与产地土壤理化因子分析,研究不同产地土壤理化因子对枸杞有效成分甜菜碱含量的影响。结果表明：宁夏四个主要产地的宁夏枸杞中甜菜碱含量差异显著,其中中宁含量最高,惠农含量最低;四个产地宁夏枸杞中甜菜碱含量与肥力因子中的速效磷和速效钾有显著正相关,与有机质无显著相关性;宁夏枸杞中甜菜碱含量与土壤盐分含量呈正相关。