2株鱼源芽孢杆菌的生物学特性研究

体外研究了2株分离自斜带石斑鱼肠道的芽孢杆菌(DE5和SE5)的生长曲线、对模拟胃肠道环境的耐受能力及对潜在致病菌的抑制效果.结果显示,SE5生长速度明显快于DE5,SE5培养4 h进入对数生长期,而DE5培养8 h进入对数生长期.人工胃液耐受试验表明,DE5对人工胃液(不同pH值、胃蛋白酶)的耐受能力较强,pH 2.0的人工胃液处理4 h,其活菌数超过104cfu/ml,pH 3.0和4.0的人工胃液对DE5的生长几乎没有影响;SE5对人工胃液的耐受能力相对较差,pH 2.0的人工胃液处理2 h后未检测到活菌,但pH 3.0和4.0的人工胃液处理4 h后SE5的活菌数超过105cfu/ml.SE5和DE5对人工肠液(不同质量分数胆盐、胰蛋白酶)均有很强的耐受能力,经含0.1%～0.7%胆盐的人工肠液处理3 h后,2株菌的存活数均超过107cfu/ml,且SE5的耐受能力略强于DE5.抑菌试验显示,2株芽孢杆菌对多株潜在致病菌具有一定抑制作用.因此,2株芽孢杆菌均具有生长速度较快,对胃肠道环境耐受能力强特点,且对潜在致病菌具有一定抑制效果,具有作为益生菌应用的潜力.     

斜带石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交子代仔、稚鱼的异速生长

应用实验生态学的方法研究斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)(♀)×鞍带石斑鱼(E. lanceolatus)(♂)杂交子代(青龙斑)仔、稚鱼阶段的生长模式。利用Q-Capture Pro 6软件对仔、稚鱼(0~28日龄)的全长、肛前长、体高、头长、眼径、口径、第二背鳍棘、腹鳍棘、胸鳍、臀鳍和尾鳍等11个可量性状进行拍照和测量。研究表明青龙斑全长的生长可分为3个阶段, 不同阶段生长速率存在显著差异(P<0.05)。各功能器官均表现为异速生长。在11个可量性状中, 肛前长为等速生长, 头长和体高的生长由正异速生长分别转变为等速生长和负异速生长; 头部器官(口径和眼径)生长在20 ~22日龄时出现拐点, 拐点后分别转变为等速生长和负异速生长; 运动器官在拐点前均为正异速生长, 除臀鳍外, 其他各鳍的生长均存在不同的拐点。通过对青龙斑仔、稚鱼异速生长的研究, 发现在早期发育过程中, 有关摄食、感觉、运动等功能器官得到优先发育。在人工繁殖苗种的培育中, 可根据青龙斑重要器官发育的优先性, 创造有利的外部环境, 提高苗种的成活率。

     

斜带石斑鱼溶藻弧菌病的研究

从患病的斜带石斑鱼肝和肾组织分离的两株病原菌,进行纯化培养、人工感染、VITEK-AMS-32自动微生物分析鉴定及药敏试验,经形态和生理生化测定,确定为溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)。组织病理变化主要表现为鳃、肝和肾细胞变性、坏死,病变组织炎性细胞浸润,呈变质性炎症。     

斜带石斑鱼池塘育苗水体中桡足类的变化规律

为了解桡足类在池塘育苗模式下的动态变化规律,研究了在斜带石斑鱼池塘育苗生态系统中浮游桡足类的种群增长情况、生产率和呼吸率。试验结果:2口试验池塘中的桡足类主要有7种,其中矮拟哲水蚤(Paracalanus nanus)、小拟哲水蚤(P.parvus)这两种小型桡足类为优势种;育苗期间,桡足类的生物量呈现出前10天逐渐升高、第10 d达到最大值、之后逐渐降低的特点;育苗池中桡足类的平均世代时间为42.312 h,平均生产率为4. 560 mg/(L·d),平均日P/B系数为0. 723 5;育苗全过程桡足类的呼吸率为0.074 4 mg/(L·d),单只桡足类的平均呼吸率为4.055×10^-5mg/(L·d)。结果表明,到育苗后期,自然增长的桡足类远不能满足鱼苗摄食的需要,需每天向池塘增加投放桡足类及轮虫等。     

一株斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）病原菌的分离与鉴定

2011年7月,福建省晋江某养殖场养殖的斜带石斑鱼( Epinephelus coioides )发病,病鱼体重3~10 g,症状为鱼体色变深,拒食,离群缓慢游动,背鳍下方局部鳞片脱落、表皮溃烂,肝脏点状发红。2011年7月从濒死病鱼肝脏、肾脏中分离到2株细菌,分别命名为201107-I与201107-II,经生理、生化指标和16S rRNA 基因鉴定,这两株均为哈维氏弧菌( Vibrio harveyi )。毒性实验发现这两株菌都能引起斜带石斑鱼表皮溃烂症,其中201107-II毒性较强,被用于后续感染实验。通过肌肉注射、腹腔注射与创伤浸浴3种方式进行回归感染实验,得到3种方式对石斑鱼的半致死量LD50分别为4．3×104、2．9×105和5．4×106 cfu/g鱼体重。从人工感染的石斑鱼肾脏中再次分离到该菌,经生理、生化指标和16 S rRNA 基因鉴定,为同株菌。药敏实验结果表明,该菌株对红霉素、大观霉素、氯霉素等16种抗生素高度敏感,对呋喃唑酮、克拉霉素、环丙沙星等9种抗生素中度敏感,对苯唑西林、青霉素G、万古霉素等13种抗生素不敏感。本研究对石斑鱼病害防治与健康养殖具有一定的指导意义。     

鞍带石斑鱼生产性育苗技术研究

一、前言鞍带石斑鱼隶属鲈形目(Perciformes),科(Serranidae),石斑鱼亚科(Epinephelinae),石斑鱼属(Epinephelus),俗称龙胆石斑。它是石斑鱼中体型最大的种类之一。     

5种胃肠激素样内分泌细胞在斜带石斑鱼稚鱼期消化道中的定位

5-Hydroxytryptamine, 5-HT）、生长抑素（）、P物质（     

芽孢杆菌在日本对虾育苗中的应用试验

<正>芽孢杆菌微生物制剂已在水产养殖中广泛使用,不仅在改善养殖水体环境、促进水生动物生长、提高成活率与产品品质、防病治病方面有显著的效果,而且在节能减排、降低养殖对周围环境影响方面也有积极作用。但微生物制剂在水产育苗中还未得到很好的应用,     

芽孢杆菌对弧菌的抑制作用及其应用

采用牛津杯抑菌圈检测法,探讨了4株芽孢杆菌(K、S、BA、SN)代谢产物对溶藻弧菌的抑制能力,用三角烧瓶稀释法模拟养殖水体,探讨了枯草芽孢杆菌SN对溶藻弧菌的抑制效果.结果显示,K、S、BA没有抑菌活性,SN有明显抑菌活性,在模拟养殖水体中,104~l06 cfu/ml的SN溶液对溶藻弧菌有明显的抑制作用,其抑制作用随溶藻弧菌菌量的增大而减弱.进一步尝试用SN培养液来控制鲍养殖池中底栖硅藻上弧菌的数量,104 cfu/ml的SN对弧菌有较好的抑制作用.     

基于宏基因组比较分析石斑鱼育苗两种模式水体中的菌群多样性和分布特点

为比较分析石斑鱼育苗新旧模式水体中菌群的分布差异性,研究应用高通量测序技术测定六批次(A1、A2、B1、B2、C1和C2)水样的菌群16S r DNA V4变异区序列,并使用Qiime和Mothur等软件整理和统计样品序列数目和操作分类单元(OTUs)数量,分析物种的丰度、分布和Alpha多样性以及物种丰度的差异性。结果显示,获得用于分析的序列和OTU数为667 27/3 724(A1)、66 418/3 391(A2)、87 403/3 980(B1)、57 519/3 438(B2)、62 349/3 530(C1)和66 673/3 004(C2);稀疏曲线表明测序深度充分,OTU的数量接近实际情况。A1、A2、B1、B2、C1和C2六个样品的丰富度指数分别为6 535.21/8 872.16、6 583.85/8 855.40、8 062.60/10 640.49、6 878.85/9 352.25、6 859.85/9 295.45和5 291.87/6 868.28,多样性指数分别为0.05/4.72、0.04/4.77、0.04/4.69、0.04/4.74、0.05/4.45和0.08/4.06。传统模式育苗场暴发石斑鱼病毒性神经坏死病的同一时期,对两种模式育苗水体中的菌群在门、属水平分别进行单样品物种丰度、多样品物种分布和物种丰度差异性分析。在门水平,两种育苗模式育苗水体的优势菌群分布相似,但在属水平,传统模式育苗水体的优势菌群中易致病菌假单胞菌属含量显著高于新模式育苗水体。获得了暴发病毒性神经坏死病前后,石斑鱼育苗新旧两种模式共6批次育苗水样的细菌均匀度、丰富度和菌群结构,推测石斑鱼"生态优化及病害防控人工育苗创新模式"可能有利于抑制致病菌,富集益生菌。     

Quantitative l-lysine requirement of juvenile grouper Epinephelus coioides

An 8‐week feeding trial was conducted to determine the quantitative lysine requirement of juvenile grouper Epinephelus coioides (initial mean weight: 15.84 ± 0.23 g, mean ± SD) in eighteen 500‐L indoors flow‐through circular fibreglass tanks provided with sand‐filtered aerated seawater by feeding diets containing six levels of l ‐lysine ranging from 19.2 to 39.5 g kg^?1 dry diet in 4 g kg^?1 increments. The diets, in which 250 g crude protein kg^?1 diet came from fish meal and soybean protein concentrate, and 230 g kg^?1 from crystalline amino acids, were formulated to simulate the amino acid profile of 480 g kg^?1 whole chicken egg protein except for lysine. Each diet was assigned to three tanks in a completely randomized design. Grouper were fed to apparent satiation twice daily during the week and once daily on weekends. Weight gain and specific growth rate increased with increasing levels of dietary lysine up to 27.2 g kg^?1 (P < 0.05) and remained nearly the same thereafter (P > 0.05). Feed efficiency was the poorest for fish fed the lowest lysine diet (P < 0.05) and showed no significant differences among other treatments (P > 0.05). Survival could not be related to dietary treatments. Body composition remained relatively constant except for lipid contents in muscle and liver. Total essential amino acid contents in liver increased with dietary lysine level although there was a slight decline for fish fed the highest lysine level of diet. Plasma protein content increased with increasing dietary lysine level (P < 0.05), but cholesterol, triacylglycerol and glucose contents were more variable and could not be related to dietary treatments. Dietary lysine level significantly influenced morphometrical parameters (condition factor, hepatosomatic index and intraperitoneal fat ratio) of juvenile grouper (P > 0.05). Broken‐line analysis of weight gain indicated the dietary lysine requirement of juvenile grouper to be 28.3 g kg^?1 diet or 55.6 g kg^?1 dietary protein.     

副溶血弧菌对斜带石斑鱼血清中一氧化氮合酶活力的影响

为了研究感染副溶血弧菌对斜带石斑鱼体内一氧化氮合酶活力的影响 ,分别对斜带石斑鱼腹腔注射浓度为 5× 10 8cfu/ml、5× 10 7cfu/ml、5× 10 6cfu/ml的副溶血弧菌悬浮液 ,在注射后 2 4h、4 8h、72h、12 0h和 192h尾部取血 ,测定其血清中NOS活力的变化情况。结果表明 ,注射副溶血弧菌后斜带石斑鱼血清中NOS活力显著高于对照组 ,并且高浓度组NOS活力显著高于低浓度组 ,证明注射副溶血弧菌可以诱导斜带石斑鱼体内NOS活力的升高。     

斜带石斑鱼病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定

从患病斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)肝脏组织分离到EcGY0 2 0 4 0 1菌株 ,经人工感染、回归感染实验证实为致病菌。通过API系统和菌体常规形态特征、培养特性和生理生化反应指标测定以及 16SrRNA测序分析等综合鉴定 ,Ec GY0 2 0 4 0 1菌株为弧菌属哈维氏弧菌 (Vibrioharveyi) ,其半致死剂量LD50 为 2 .7× 10 6CFU/g鱼体重。药敏试验结果表明 ,EcGY0 2 0 4 0 1菌株对利福平、四环素、喹诺酮类及头孢曲松等抗生素较为敏感     

石斑鱼仔稚鱼微粒子配合饲料系列产品研制

根据石斑鱼仔稚鱼的营养需求,精选原料,筛选配方,研制出石斑鱼仔稚鱼微粒子配合饲料,通过测定其散失率和沉降速度,筛选出较适宜的粘合剂配方为褐藻胶1.5%,胶原蛋白3.5%混合使用。分析石斑鱼仔稚鱼微粒子配合饲料的脂肪酸和氨基酸组成,结果表明其n3HUFA组成占19.4%,与小球藻轮虫的20%～28%非常接近;10种必需氨基酸的组成合理。所研发的饲料安全限量符合NY5072《无公害食品渔用配合饲料安全限量》的要求,第20d到第45d,投喂微粒子配合饲料的点带石斑鱼鱼苗成活率3.3%,优于对照组的3.1%。     

深水抗风浪网箱斜带石斑鱼生长研究

研究深水抗风浪网箱养殖斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的生长特性。经过125 d的养殖,斜带石斑鱼体重由15.2 g增加到102.8 g,平均日增长率为4.610%,体重和时间的关系式为M=12.247e0.014 7 t;全长由9.67 cm增加到19.36 cm,平均日增长率为0.802%,全长与时间的关系式为L=0.063 7 t+9.186 3;体重和全长的关系式为M=0.012 7 L3.051 1。     

石斑鱼人工育苗技术研究

通过对点带石斑鱼人工育苗生产试验,从饵料准备、环境条件控制、管理措施等方面进行了探索。共培育出规格5～8cm的石斑鱼苗60多万尾。     

斜带石斑白细胞cDNA文库的构建

用Tripure试剂盒提取斜带石斑白细胞总RNA,反转录合成第一链cDNA,进行长距离PCR,蛋白酶K消化,Sfi I酶切,通过CHROMASPIN-400柱,回收大于500bp的cDNA,与λTripIEx2载体连接,体外包装后构建了斜带石斑白细胞的cDNA文库.库容1.65×1.06,重组频率82%,扩增后滴度7.5×109pfu·mL-1.插入片断长度500～2300bp,最多的是在750～1000bp范围.本文库可作为筛选斜带石斑细胞因子基因的重要资源.