光棘球海胆和中间球海胆早期发育的形态差异

球海胆属（Sh。楷叫优。ntrotu抓9海胆世界上共有十几种,光棘球海胆（S.n。;d u s）和中间球海胆（S.fll。。。。巾l。）是我国北方主要的经济品种,其营养价值和经济价值高,国际市场需求量大,开展海胆人工育苗和增养殖是海胆产业可持续发展的重要举措。而掌握其胚胎和幼虫生长发育的区别,不仪对苗种生产有帮助,而且对海胆资源的保护利用十分有利。 1卵及胚胎 光棘球海胆的卵径为106 pITI左右,黄色;中间球海胆90 pill左右,橙色,其卵径比光棘球诲胆小一点。受精膜举起后,光棘球海胆的卵径为     

光棘球海胆(♀)×中间球海胆(♂)杂交育苗试验

以光棘球海胆为母本,中间球海胆为父本进行杂交试验及苗种培育.试验结果表明,通过筛选同时得到自然成熟的父母本精、卵,在比正常海胆自交精子量高40倍以上的精子作用下,杂交受精率为2.5%.在适宜的水温、光照及饵料等的培养条件下,杂交海胆能够生长附着变态,变态时间与母本相近.培育出的杂交海胆外部颜色及棘色、棘长介于两亲本之间.杂交海胆经过6～7个月的中间暂养,出苗量为0.6×10~4个/m~3,个体壳径3～30 mm,平均壳径8.8 mm.     

中间球海胆与光棘球海胆规模化杂交育苗技术

海胆规模化杂交育苗,受精率为33%,适宜的水温、光照及饵料等培养条件下,杂交海胆能够正常生长和附着变态,变态时间与母本相近。用0.1mol/L的KCl诱导5 min,杂交海胆全部变态。杂交海胆壳径>2~3 mm剥离进入网箱培育,有利于快速生长。稚胆培养温度以12~15℃为宜。     

中间球海胆（♀）X光棘球海胆（♂）F1代的生殖腺特征

对中间球海胆（♀）与光棘球海胆（♂）杂交F1代的生殖腺特征进行了研究，并与母本中间球海胆进行了比较。试验结果表明，中间球海胆的生殖腺颜色一般呈橙色或橘黄色（不同发育时期有所不同），结构致密；杂交海胆中有约90％表现为橙色和橘黄色，约10％呈黄色和浅棕色，约20％的个体生殖腺结构疏松，且和发育周期及色泽无关。杂交海胆的生殖腺指数与中间球海胆的变化基本一致，并且雌雄个体差别不明显。杂交海胆在生殖腺发育的整个过程中，生殖腺指数虽然也出现周期性的变化，但组织切片观察发现杂交海胆生殖腺发育不能象母本一样有明显分期，只有个别雌性个体能产生成熟卵细胞，雄性个体未见成熟精子。     

中间球海胆(♀)×光棘球海胆(♂)F1代的生殖腺特征

对中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)杂交F1代的生殖腺特征进行了研究,并与母本中间球海胆进行了比较。试验结果表明,中间球海胆的生殖腺颜色一般呈橙色或橘黄色(不同发育时期有所不同),结构致密;杂交海胆中有约90%表现为橙色和橘黄色,约10%呈黄色和浅棕色,约20%的个体生殖腺结构疏松,且和发育周期及色泽无关。杂交海胆的生殖腺指数与中间球海胆的变化基本一致,并且雌雄个体差别不明显。杂交海胆在生殖腺发育的整个过程中,生殖腺指数虽然也出现周期性的变化,但组织切片观察发现杂交海胆生殖腺发育不能象母本一样有明显分期,只有个别雌性个体能产生成熟卵细胞,雄性个体未见成熟精子。     

光棘球海胆胚胎发育生物学零度和有效积温的初步研究

通过室内试验和数理统计的方法,研究了光棘球海胆受精卵发育的生物学零度及有效积温。试验结果表明:光棘球海胆受精卵发育的生物学零度为4.66℃;受精卵发育至棱柱幼体的有效积温为482℃.h;受精卵发育至初期稚胆的有效积温为350℃.d。     

中间球海胆与光棘球海胆杂交及子一代人工育苗技术

研究结果表明，虽然中间球海胆与光棘球海胆的繁殖时间有差异。但通过筛选能够同时得到自然成熟的精卵，在比正常海胆自交精子量高20-40倍的精子作用下，中间球海胆为母本，光棘球海胆为父本，杂交受精率为47.1%，而反交的受精率为1.9%，正反交受精率均低于自交组。在适宜的水温，光照及饵料等培养条件下，两杂交组均能够生长，附着变态，并且变态时间与母本相近。     

中间球海胆与光棘球海胆杂交子一代的生长比较研究

通过海胆杂交子一代与两亲本的中间育成、海上筏式养殖的生长对比,表明海胆杂交子一代具有杂交优势,养殖成活率比其母本高10%,且生长快、生殖腺指数高、颜色鲜艳。大连长海县獐子岛杂交海胆达5cm时间比大连凌水养殖的母本中间球海胆提前7个月。     

二价金属离子对光棘球海胆免疫相关酶活力的影响

二价金属离子在海洋无脊椎动物免疫相关酶的活力调控中发挥重要作用。为了解二价金属离子对光棘球海胆免疫相关酶活力的影响,采用生化方法研究了8种二价金属离子在体外不同浓度下对光棘球海胆体腔液中酸/碱性磷酸酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、酚氧化酶和髓过氧化物酶活力的影响。结果显示,Cu~(2+)可明显增强碱性磷酸酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶的活力;Mn~(2+)对酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和髓过氧化物酶有强烈的激活作用;Zn~(2+)对超氧化物歧化酶和酚氧化酶有强烈的抑制作用;Fe~(2+)抑制过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力;Ca~(2+)对酸性磷酸酶和髓过氧化物酶有抑制作用;Mg~(2+)对碱性磷酸酶有抑制作用;Cd~(2+)对超氧化物歧化酶和酚氧化酶有抑制作用;Pb~(2+)对过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶有抑制作用。试验结果表明,适宜浓度的Mn~(2+)和Cu~(2+)对光棘球海胆的非特异性免疫系统可能有促进作用,而Fe~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Pb~(2+)和Cd~(2+)可能会削弱光棘球海胆的免疫应答能力。     

光棘球海胆3个地理亚群的遗传多样性AFLP分析

应用AFLP技术对光棘球海胆的大连长海县群体、大连旅顺群体及日本青森县群体进行遗传多样性分析。试验结果表明,4对引物组合扩增得到231个扩增位点,其中168个多态位点,多态位点总比例为72.73%;3个群体的遗传多样性指数分别为0.3020±0.1925、0.2995±0.1977和0.2945±0.1935;Shannon多样性指数分别为0.4390±0.2767、0.4344±0.2820和0.4298±0.2766;群体内遗传变异系数为0.2987±0.0366,群体间遗传分化系数为0.0230,说明群体内的遗传多样性比较丰富。3个群体之间的遗传距离无显著差异,遗传相似度基本一致,用UPGMA方法对3个群体的143个个体的聚类分析显示,3个群体的个体交互混杂在一起,3个群体间没有因为地理隔离而产生明显的遗传分化。     

皱纹盘鲍与光棘球海胆筏式混养研究

皱纹盘鲍与光棘球海胆的混养可有效地防治污损生物的附着。综合分析鲍与海胆的生长、存活及防污损生物附着的效果,在生长期、高温期和恢复生长期混养海胆的最适密度分别为１５．２０个／格和１５－２０个／格。     

光棘球海胆与虾夷马粪海胆摄食与吸收的初步研究

在同等摄食条件下,虾民粪海胆的生长明显快于光棘球海胆;虾夷马粪海胆的平均日摄食率,粗同化率高于光棘球海胆;     

3种重金属离子和2种杀虫剂对梭鲈胚胎发育的影响

在常温静水条件下,研究了铜（Ｃｕ）、锌（Ｚｎ）、镉（Ｃｄ）３种重金属离子和甲醛、晶体敌百虫２种杀虫剂对梭鲈（Ｓｔｉｚｏｓｔｅｄｉｏｎｌｕｃｉｏｐｅｒｃａ）胚胎发育的影响。结果表明,３种重金属离子对梭鲈胚胎的毒性大小依次为：Ｃｄ２＋ ＞Ｃｕ２＋ ＞Ｚｎ２＋;当甲醛浓度为１０００ｍｇ／Ｌ时,对梭鲈胚胎的毒性影响较强,而高浓度的晶体敌百虫对梭鲈胚胎有明显的毒性作用。在梭鲈繁殖用水中使用杀虫剂时,甲醛和晶体敌百虫的安全浓度分别为２００ｍｇ／Ｌ和０．４ｍｇ／Ｌ。     

光棘球海胆的主要卵黄蛋白cDNA序列分析

提取成熟光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)性腺中的RNA做模板,根据NCBI数据库中已知海胆(编号:AB097218、AB192414、AY090112)主要卵黄蛋白MYP cDNA保守序列设计引物,用LA PCR方式分段扩增并测序得到了光棘球海胆MYP cDNA的全序列。扩增的cDNA全长4 061 bp,包含4 047 bp的开放阅读框,共编码1 349个氨基酸。用CluxtalX1.83对光棘球海胆与其他几种已知海胆MYP cDNA及推导的氨基酸序列进行比对,用Mega3.01计算遗传距离及构建进化树,结果表明,光棘球海胆与其他7种海胆的MYP具有高度的同源性。从氨基酸水平上看,光棘球海胆与红海胆(Pseudocentrotus depressus)亲缘关系最近,遗传距离为0.069±0.01;与同科的马粪海胆(Hemicentrotus pulcher-rimus)、紫球海胆(S.purpuratus)、中间球海胆(S.intermedius)的遗传距离分别是0.095±0.012、0.098±0.011和0.101±0.012;与白棘三列海胆(Tripneustes gratilla)、拟球海胆(Paracentrotus lividus)及绿海胆(Lytechinus variega-tus)亲缘关系相对较远,遗传距离分别是0.216±0.017、0.218±0.017和0.535±0.028。获得光棘球海胆MYP cDNA序列可为进一步研究MYP基因的功能和系统的进化分析奠定基础     

杂交海胆浮游幻体期的饵料效果研究

采用7种单胞藻饲育杂交海胆浮游幼体以研究其饵料效果。结果表明:简单角刺藻是最佳的饵料品种,牟 氏角毛藻稍次之,再次分别为:盐藻,湛江叉鞭金藻。而小新月菱形藻,扁藻,小球藻均不适合作为杂交海胆浮游幼体的 饵料。对优选出的几种饵料进行混合投喂时,则以简单角刺藻与盐藻混合的饵料效果最佳。     

中间球海胆早繁育苗技术的研究

中间球海胆的繁殖期通常为10－11月，通过生物促熟技术使其繁殖期可提前至4－5月。亲胆在18－20℃的条件下投喂自制的促熟饵粒培育，当亲胆积温达到1850℃时，即可进行人工催产，催产诱导率达80％以上。结果表明：促熟水温以18－20℃；促熟饵粒以HD－2＋海带为最佳，海胆幼虫培育成活率为87％，早繁育苗与10月份育苗相比可减少能源消耗，育苗生产成本可降低71％，经济效益显著。