应用高效液相色谱分析兔出血症病毒核酸

本试验应用聚乙二醇(PEG)沉淀、有机溶剂抽提和差速离心等方法,提取和纯化兔出血症病毒。用核酸酶降解病毒子表面污染的核酸后,再抽提,得到病毒核酸,并经琼脂搪凝胶电泳-电洗纯化,得到高纯度的病毒核酸。应用高效液相色谱对提纯的病毒核酸分析结果表明,兔出血症病毒的核酸为ssDNA.它的碱基组成为:C23.7,G20.5,T31.9,A 24.0。它的G+Cmol％为44.2。     

兔病毒性出血症的防制

兔病毒性出血痛俗称“兔瘟”，具有流行快、发病率和致死率都很高等特点，是危害养兔业的一种毁灭性传染病。在农村中，许多养兔户因缺乏免疫防制意识，没有给兔只打疫苗，致使兔瘟仍在一些地方时有发生，给养兔户造成严重经济损失。     

兔病毒性出血症垂直感染试验

<正> 兔病毒性出血症(俗称兔瘟)是近几年新发现的一种病毒性传染病.该病病程短,传播快,流行面广,发病率和致死率高,已给养兔生产带来严重威胁.为了弄清感病母兔能否通过胎盘感染胎儿而造成垂直感染,进一步阐明其发病规律、感染途径及传染源等流行因素,并为防治本病提供科学依据,我们于1989年进行了本试验.材料与方法1.种毒本省费县兽医站提供的野毒,通过兔体传代,取其1～4代混合毒,以pH     

兔出血症病毒结构多肽的研究

纯化ＲＨＤＶ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,硝酸银染色显示８条多肽,分子量分别为８５．１,７１．２,６４．５,６１．４,５７．３,５４．０,２９．２,２８．１ｋＤ,免疫转印结果确认其中的６条多肽为病毒结构多肽,分子量分别为６４．５,６１．４,５７．３,５４．０,２９．２,２８．１ｋＤ且其相对百分含量分别为６５．８７,３．１７,３．９７,１０．３２,９．５２,７．１４％,表明分子量为６４．５ｋＤ的多态为病毒主要     

兔病毒性出血症诊断试剂盒的研制

兔病毒性出血症是我国目前对家兔危害最烈的传染病，各地时有发生。对该病的诊断，一般根据流行病学、临床症状和大体病理变化即可作出初步诊断。而实验室诊断一般是用新鲜人Ｏ型红细胞做平板血凝试验。为了便于在现场就能作出确诊，我们以冻干醛化红细胞为突破口，研制了...     

兔病毒性出血症

兔病毒性出血症俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的急性、高度致死性传染病,主要病理变化为呼吸系统出血,实质器官淤血、肿大、出血,肝脏坏死。一、病原本病毒属于嵌杯状病毒科,无囊膜,具有凝集人的红细胞的能力。能     

兔病毒性出血症的诊治

1病因兔病毒性出血症俗称兔瘟,或称兔出血症。本病是由兔病毒性出血症病毒引起的兔的一种急性、高度接触性传染病。病征是突然发病,体温升高,呼吸急促,死前发出尖叫声,口鼻流血。剖检可见支气管和肺部充血、     

“兔病毒性出血症”组织灭活苗的研制和应用

本文报告了“兔病毒性出血症”(俗称兔瘟)组织灭活苗的研制程序、测试结果和应用效果。本苗是用人工感染兔的肝、脾和肾的5%组织匀浆中加入0.25%福马林溶液(最后浓度 V/V),37℃灭活96小时而制成的。本苗的安全性可靠,免疫原性良好。兔肌注射0.5毫升,7天产生免疫力,近期保护率100%,6个月的保护率87.5%。普通冰箱内的保存期半年。在大田等十几个县市预防接种8万余头兔,取得了很好的效果。     

兔出血症病毒（RHDV）及其免疫复合物在兔体内的动态分布

用RHDV人工感染易感兔,每隔4小时剖杀一组,整个病程大多为24小时,且病变典型.血凝试验查得,主要脏器病毒出现时间顺序是肝(攻毒后12小时)、脾、心、肾(16小时)、肺(20小时);病程后期,病毒含量从高到低依次为肝、脾、肺、肾、心。免疫荧光间接法检查感染兔各脏器,发现病毒经肌注兔体后4小时,即可定位于肝细胞,并在肝细胞核内复制增殖;兔感染病毒后16小时,在肝、脾、肾小球中可检出有免疫复合物沉着或抗体附着。电镜检查,肝细胞核内发现有病毒粒子,直径为25～30nm,细胞结构破坏严重。作者认为,RHDV 是一种 DNA 病毒;免疫复合物引起的免疫损伤及肝细胞结构、功能被破坏是兔发生病毒性出血症的重要原因。     

兔病毒性出血症弥漫性血管内凝血动态研究

对兔出血症的凝血象和组织病理学变化进行了动态研究。结果表明：兔出血症伴有弥漫性血管内凝血（ＤＩＣ）病理过程，并呈动态发展规律。凝血象检测发现：感染后６ｈ凝血酶原时间（ＰＴ）、白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）缩短或正常，为高凝期，该期短，很快进入低凝期。感染后１８ｈＰＴ、ＫＰＴＴ显著延长，死前更明显。血小板数（ＰＣ）呈渐进性降低，纤维蛋白（原）降解产物（ＦＤＰ）在感染后６ｈ显著增加（Ｐ＜０．０１），感染后１８ｈ达高峰值。组织病理学观察表明：肺的病变严重而且有规律，感染后１２ｈ肺的微血栓检出率最高，同时在心、肝、肾、脑等器官也见微血栓。感染后２４ｈ或死兔的肺出血严重，血栓少见，表现为纤溶亢进的特征性变化。此外，患出血症的兔血管壁早期损伤明显，先于高凝期，可能是ＤＩＣ的启动因素之一。     

兔病毒性出血症发病机理的初步研究

兔病毒性出血症是兔的一种败血性传染病,通过电镜观察和免疫胶体金-银法的监测,病毒最先侵害的靶器官是肝、脾和肺,然后到达全身血流,最后分布到其它器官。发现动物在感染后18～24小时,在肝、脾、肺、肾和肠上皮细胞、血管壁内皮细胞、循环的中性白细胞、淋巴细胞及肥大细胞的核内有病毒颗粒,其直径为32～34nm,无囊膜。感染后24小时直到死亡前,大部分病毒颗粒被释放到细胞浆和间质中去。初步认为本病是由于病毒血症对各器官的直接损伤,尤其对血管壁的损伤,导致全身弥散性血管内凝血(DIC)及全身性出血。由于血液的丧失,继而使全身各器官发生缺氧,最终引起生命重要器官的功能衰竭而死亡。     

兔出血症病毒核酸的电镜图

病毒性出血症病兔肝悬液离心去杂后其上清用聚乙二醇浓缩,又经正丁醇-异戊醇除去杂蛋白,然后以差速离心和蔗糖梯度离心,提取兔出血症病毒(RHDV)。提纯的病毒用核酸酶降解污染的细胞核酸后,加入8mol/L尿素,使核酸从病毒粒子中释放出来,经水相法展开,附于有碳膜的铜网上。检样经醋酸铀染色和铂旋转喷涂投影,于透射电镜下观察。RHDV核酸呈线状,平均长度为1.92μm。经公式推算出分子量为2.30×10~6道尔顿(Dalton)。     

兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

通过ＥＬＩＳＡ迭加试验对５株抗兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明，６株单抗分别针对３类不同的抗原决定簇。ＣＧ４－１、ＣＨ３－１和ＡＡ８－１针对病毒结构多肽上的同一决定簇，ＣＦ２－１和ＲＭ－１７针对另一决定族，而ＲＭ－１４针对第３种决定簇；其识别表位可能与ＡＡ８－１非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。