转化人参皂苷Re的活性菌株的鉴定

[目的]筛选长白山人参土壤中的活性微生物,转化单体人参皂苷产生稀有抗肿瘤成份。[方法]从长白山人参根际土壤中分离各类菌株,对单体人参皂苷Re进行微生物转化;结合菌落形态、产孢结构、孢子形态特征以及菌株ITSrDNA核酸序列分析,对活性菌株进行鉴定。[结果]从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株68株,其中菌株SRS一10对三醇组人参皂苷Re具有较强的转化活性。[结论]阳性菌株SRS-10被鉴定为链格孢Alternaria alternata,能将人参皂苷Re转化为人参皂苷Rgl。     

鞘氨醇单胞菌2-F2将人参主皂苷Re转化为人参稀有皂苷Rh1

从人参根系土壤中分离的菌株2-F2将人参主皂苷Re转化为稀有皂苷Rh1,其转化机理为Re→Rg1→Rh1.进行16S rRNA基因序列的系统发育分析,菌株2-F2与Sphingomonas asaccharolytica IFO15499T在同一分支上,同源性为99.5%.该菌株属于鞘氨醇单胞菌属.     

人参皂苷Re对心血管系统的药理作用研究进展

人参皂苷Re作为人参皂苷的一类主要有效成分,在治疗心血管系统疾病方面受到国内外学者的持续关注。查阅人参皂苷Re在保护心血管系统方面的药理活性的相关文献,从对心肌缺血组织的保护作用、抗心肌细胞凋亡、抗心律失常及对心肌细胞的减毒作用等方面进行综述,以期为进一步研究人参皂苷Re在保护心血管系统方面的临床应用与新药开发提供参考。     

HPLC法测定蒺参胶囊中人参皂苷Re的含量

目的建立蒺参胶囊中人参皂苷Re的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定。结果人参皂苷Re在1.65～6.05μg之间与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为95.98%,RSD为1.35%(n=5)。结论方法简便、可靠、准确,可用于蒺参胶囊的质量控制。     

人参皂苷Re对谷氨酸致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

对人参皂苷Re对神经细胞的保护作用并研究其作用机理。建立SH-SY5Y神经细胞谷氨酸损伤模型,用MTT法检测细胞存活率以及选取适宜浓度,用比色法检测丙二醛(MDA)、硝酸还原酶法(NO)和荧光探针负载法检测细胞内活性氧水平(ROS)。由谷氨酸导致SH-SY5Y细胞损伤模型,与模型组做比较,人参皂苷Re可以提高细胞存活率,同时减少由谷氨酸引起的MDA含量、ROS含量和NO含量增加。与对照组比较,模型组细胞存活率下降,MDA含量、NO含量和细胞内ROS水平增加。人参皂苷Re能有效保护谷氨酸损伤的神经细胞,并抑制细胞凋亡,提高神经细胞存活率。     

高效液相色谱法-重结晶法分离人参皂苷单体Re

利用高效液相色谱法,以甲醇和水的混合溶液作为流动相进行梯度洗脱,经过制备柱从原料中分离出人参皂昔Re和Rg1的混合物。确定利用重结晶的方法进行人参皂昔Re和Rg1的分离,确定了结晶溶剂为V己脯：V水=20：80的混合溶液;结晶温度为20℃、结晶时间为5h、混合物与重结晶溶剂的固液比为1：6（g：mL）的结晶条件。在上述重结晶条件下,可得到Re纯度达91％以上的白色粉末,其收率可达92％。对得到的白色粉末进行了结构分析,确定白色粉末就是人参皂苷单体Re,并且纯度在91％以上。     

正交试验法筛选人参皂苷提取工艺的研究

目的筛选人参皂苷最佳提取工艺。方法采用正交试验法进行优选,高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量。结果提取次数和乙醇浓度对提取工艺有显著影响。结论人参皂苷最佳提取工艺为A2B2C2D3,即药材用70%乙醇回流提取3次,每次加醇8倍量,提取时间1.5h。     

酶法转化人参皂苷Re为Rg1的研究

研究了酶法转化人参皂苷Re为人参皂苷Rg1的酶反应条件和产率。用含人参皂苷-α-鼠李糖苷酶的Sp39、Sp00、Sp48菌种水解Re得到Rg1,其中AbsidiaSp39的酶活力最高。最适培养基为人参浸出物浓度是30%。该菌产酶作用于底物Re的最佳反应条件是:pH=6时酶活力最高,酶反应最适温度为45℃,酶反应20h,酶法转化Re为Rg1的转化率为56%。     

超声波法提取西洋参茎叶中人参皂苷Re工艺的优化

以甲醇为提取溶剂,采用超声波法从西洋参(Panax quinquefolium L.)茎叶中提取人参皂苷Re,通过高效液相色谱法测定人参皂苷Re含量,设计单因素试验和正交试验考察超声波频率、超声波时间、提取温度和料液比对人参皂苷Re含量的影响,优化提取工艺条件.结果表明,各因素对西洋参茎叶中人参皂苷Re提取率的影响由大到小依次为提取温度、料液比、超声波时间、超声波频率.优化的提取条件为超声波时间60 min、提取温度45℃、超声波频率45 kHz、料液比m西洋参∶V甲醇=1∶20(g/mL).     

高效液相色谱法测定心脉素注射液中20(S)-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的含量

建立心脉素注射液中20（S）-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的高效液相色谱测定法。采用YWG-C18分析柱，以甲醇-磷酸溶液(1→25)(7：3)为流动相，在203nm波长处检测。平均回收率分别为99．5％和100．6％。相对标准偏差分别为1．2％和1．4％。该方法准确、简便。     

人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物与人参皂苷的增强记忆活性对比

通过建立3种损伤性拟痴呆模型,即东莨菪碱致胆碱能损伤拟痴呆小鼠模型、40%乙醇损伤拟痴呆小鼠模型、氯霉素注射致痴呆小鼠模型,每日给予小鼠受试药物,通过跳台试验和被动回避试验对小鼠进行行为学检测,并对小鼠脑内胆碱能含量进行检测,对比人参三醇型皂苷的黑根霉发酵产物和部分人参皂苷的增强记忆活性。结果表明:人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物3种损伤模型中均显示出增强记忆活性,且与对照组相比差异显著。人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物组和人参皂苷Rg1组小鼠脑内乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性明显高于空白对照组(P0.05),乙酰胆碱酯酶(AchE)活性低于空白对照组(P0.05),说明人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物不仅能降低AchE活性,而且能增强ChAT活性,并且此活性与小鼠脑内的胆碱能系统具有一定关系。     

人参皂苷抗鸡新城疫病毒的试验研究

为探讨人参皂苷抗鸡新城疫病毒的作用机理,试验用鸡新城疫病毒人工感染雏鸡,采取人参皂苷口服,观察试验鸡只的临床症状及体重变化,测定血清抗体效价的变化情况。结果表明,人参皂苷组可以明显推迟人工感染鸡新城疫病毒(NDV)雏鸡的发病日龄,缩短病鸡的发病过程。试验鸡饲喂人参皂苷后可明显降低发病率和死亡率并促进抗体的产生。说明人参皂苷可以降低病毒对组织的损害程度,增强雏鸡对新城疫病毒的抵抗力。     

人参皂苷Rb3对肝糖异生作用机理的研究

为了探讨人参皂苷Rb3在降低血糖方面的分子调控机制,利用HepG2细胞为研究材料,系统分析了人参皂苷Rb3对肝糖异生关键酶PEPCK、G6Pase和转录因子FOXO1、HNF4α的影响。结果表明,人参皂苷Rb3可以显著抑制HepG2细胞肝糖异生途径关键转录因子FOXO1、HNF4α蛋白表达,从而抑制PEPCK和G6Pase酶活性及糖异生作用,该作用能够被AMPK抑制剂Compound C部分阻断,推测人参皂苷Rb3抑制肝糖异生作用是通过激活AMPK信号通路实现。AMPK信号转导通路作为重要的糖脂代谢靶点,在糖尿病及相关代谢类疾病的调控中发挥着重要的作用,为探讨人参皂苷Rb3治疗糖尿病的作用机制提供了新的理论依据。     

红参加工中皂苷的脱羧降解反应及其产物的研究

从鲜人参中提取分离出天然皂苷,模拟红参加工工艺过程,探讨红参加工中天然皂苷成分转化过程,以揭示出皂苷成分转化机理。方法：将红参粉以甲醇提取,乙醚脱脂,正丁醇萃取;水层通过大孔树脂（Ｄ１０１型）吸附,水洗除去水溶性发质和糖分。再经过硅胶柱层析和阳离子交换树脂柱层析,获得丙二酸单酰基人参皂苷。模拟红参加工工艺过程得转化物,对该转化物进行分离鉴定,诸如化学试验、ＩＲ、ＦＤ－ＭＳ等仪器分析。结果表明：从鲜人参中分离出丙二酸单酰基人参皂苷－Ｒｂ２和－Ｒｂ２等皂苷,通过模拟红参加工试验发现在７５℃烘干过程,丙二酸单酰基人参皂苷－Ｒｂ２转化为乙酰基人参皂苷－Ｒｂ２,即人参皂苷Ｒｓ１。结论：人参皂苷Ｒｓ１是红参加工烘干阶段产生的,对其分解产物的分析有二氧化碳放出,说明该反应是丙二酸单酰基人参皂苷上的丙二元到遇热发生脱羧降解反应     

红参炮制加工中的皂苷水解反应及其产物的研究

选取鲜人参根制成匀浆,加入被研究的目标皂苷（Ｍ－Ｒｂ１、Ｒｂ１、Ｒｅ、Ｒｏ）,研究鲜人参中天然皂苷在生产加工实践中的水解变化。采用ＨＰＬＣ对１０种人参皂苷标品建立标准图谱和分离条件,然后对上述加工前后的目标皂苷（Ｍ－Ｒｂ１等）、鲜人参浆、不同目标皂苷＋鲜人参浆等一系列样品进行定性、定量测定。结果表明：在加工红参全过程中,人参二醇型（ｐａｎａｘａｄｉｏｌ－ｔｙｐｅ）丙二酸单酰基人参皂苷Ｒｂ１（简称Ｍ     

D-101大孔吸附树脂对人参皂苷吸附容量的影响

用比色法研究了D－101大孔树脂在不同条件下的吸附容量及使用寿命。结果表明：D－101大孔吸附树脂对人参皂苷的吸附容量较大（约为皂苷：树脂＝1：10），效果好，且不受上样量及时间的影响，纯化简单，便于工业化生产。大孔树脂部分死吸附后，吸附量还是相对稳定的，约为新树脂的50％。     

大孔吸附树脂提取多杀菌素的方法

采用大孔树脂吸附法提取多杀菌素。通过树脂选型,筛选出XAD-4作为多杀菌素提取的吸附剂;吸附最适pH值为11.0,流速为1/6(1/min),加入2%氯化钠;采用丙酮梯度解吸,总收率达64.7%。